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苏木提取物对动脉粥样硬化模型大鼠胆固醇逆转运的影响

于海睿  
【摘要】:目的:观察苏木提取物对体内外胆固醇逆转运及相关分子信号通路的影响,探讨苏木提取物抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:实验一:人THP-1单核细胞PMA诱导分化为巨噬细胞,应用50μg/ml ox-LDL和0.2μCi/ml ~3H胆固醇孵育细胞,应用不同浓度和不同作用时间的苏木提取物含药血清处理细胞。油红O染色鉴定泡沫细胞的形态;HPLC检测细胞内胆固醇水平;闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出率。实验二:40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苏木组、辛伐他汀组,每组10只。空白组给予普通饲料喂养,其余3组给予高脂饲料及腹腔注射维生素D_3复制动脉粥样硬化模型,模型复制时间12周。第13周空白组及模型组大鼠给予等体积羧甲基纤维素钠溶液灌胃;苏木组给予苏木提取物混悬剂灌胃;辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬剂灌胃,连续给药4周。第16周末,大鼠麻醉称重取材,HE染色观察大鼠主动脉及肝脏形态学变化;全自动生化仪测定血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平;ELISA法检测血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平;免疫组化法观察大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达;Western Blot、RT-PCR法检测大鼠肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达。结果:(1)苏木提取物含药血清呈浓度、时间依赖性促进THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出,降低细胞内TC、FC、CE含量。(2)HE染色显示苏木提取物能够减少血管壁脂质沉积,同时减轻肝脏细胞炎症肿胀及细胞内脂滴。(3)血清TC、TG、LDL-C、HDL-C结果:与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平升高(P0.01);与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠血清TC、TG水平降低(P0.05,P0.01)。(4)血清IF N-γ、TNF-α、IL-6结果:与空白组比较,模型组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平增加(P0.01),与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-6水平降低(P0.01)。(5)CD40L免疫组化结果:与空白组比较,模型组大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达强度增加(P0.01);与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠腹主动脉CD40L蛋白表达下调(P0.01)。(6)Western Blot及PCR结果:与空白组比较,模型组大鼠肝脏组织中PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达下调(P0.01),与模型组比较,苏木组、辛伐他汀组大鼠肝脏组织中PPARγ、L XRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因表达上调(P0.05,P0.01)。结论:1.苏木提取物含药血清呈浓度和时间依赖性促进细胞内胆固醇流出;2.苏木提取物能够减轻动脉粥样硬化模型大鼠腹主动脉及肝脏病理损伤;3.苏木提取物能够降低动脉粥样硬化模型大鼠血清TC、TG、IFN-γ、TNF-α、IL-6水平,下调CD40L蛋白表达,抑制炎症反应;4.苏木提取物促进胆固醇逆转运发挥抗动脉粥样硬化的作用,部分机制可能与上调肝脏组织中PPARγ、LXRα、ABCA1、Cav-1、SR-BI蛋白及基因的表达相关。


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