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针刺对MCAO大鼠缺血半暗带影响的基础研究

张秀花  
【摘要】:本文通过TTC、RT-PCR技术、原位末端标记法、免疫组织化学法,分别研究了针刺对大鼠MCAO脑梗塞体积及缺血半暗带CADmRNA基因表达,细胞凋亡、Bcl-2和HSP70蛋白表达的影响,为临床针刺治疗急性脑梗塞,挽救缺血半暗带提供理论依据。 本实验包括三部分:实验一 针刺对大鼠MCAO脑梗死体积的影响(TTC);实验二 针刺对大鼠MCAO缺血半暗带CADmRNA表达的影响(RT-PCR);实验三 针刺对大鼠MCAO缺血半暗带细胞凋亡、BCL-2、HSP70的影响(免疫组化)。三部实验均选取96只Wistar大鼠,随机分为正常对照组(A,6只)、模型组(B,30只)、针刺组(C,30只)和药物组(D,30)只,后三组又分为术后3h、6h、12h、24h和48h组,每一时间点各有大鼠6只,随机抽取5只用于指标检测。 实验结果:实验一 A组经TTC染色后,脑组织呈红色,B组、C组和D组正常脑组织呈红色,梗塞部分呈白色,C组脑梗死体积明显小于B组和D组(P0.01);实验二 A组可见少量CADmRNA基因表达,B组在3h CAD基因表达明显高于A组(P0.01),12h达到高峰,48h仍明显高于正常范围(P0.01),C组与B组比较各时间段明显低于B组(P0.01),48h基本接近正常;实验三 A组未见凋亡细胞,无Bcl-2和HSP70阳性细胞,B组在3h可见大量凋亡细胞,少量Bcl-2和HSP70阳性细胞,凋亡细胞于24h达到高峰;C组在各时间段凋亡细胞明显少于B组(P0.01),而BCL-2和HSP70细胞在3h均有较强表达,12h达到高峰,48h仍有较强表达,与B组比较P0.01。 结论:(1)针刺能明显降低大鼠MCAO的脑梗死体积;(2)针刺可抑制大鼠IP中CAD基因的诱导;(3)针刺能明显抑制IP中神经细胞的凋亡;(4)针刺可促进Bcl-2和HSP70蛋白表达;(5)针刺可挽救大鼠脑缺血半暗带。


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