肾衰保肾胶囊对慢性肾衰早期大鼠残余肾功能的保护作用及其机制的研究

【摘要】： 目的：通过实验研究观察肾衰保肾胶囊对5／6肾切除CRF早期大鼠肾脏病理形态和功能的保护作用，从增殖、凋亡及凋亡线粒体途径方面，探讨肾衰保肾胶囊延缓CRF进展的机理。 方法：建立大鼠5／6肾切除CRF早期模型，实验分3组：假手术组(K组)、5／6肾切除组(M组)、肾衰保肾胶囊治疗组(S组)，在造模一周后用肾衰保肾胶囊进行干预治疗，在12周的观察期内分2周、4周、8周、12周4个不同的时间段对各组进行肾功能、24小时尿蛋白定量及残肾组织标本光镜检查；采用原位检测TUNEL、免疫组化二步法分别检测肾组织中的Caspase-3、Caspase-9、CytC、PCNA动态表达情况；采用Real TimePCR检测肾组织内的Caspase-3、Caspase-9mRNA的动态表达水平。 结果：M组2周后出现Scr、BUN、24h尿蛋白定量的逐渐升高。肾脏病理变化为：2周肾小球增大、系膜细胞轻度增生、肾小管扩张；12周出现局灶节段性硬化的肾小球、肾间质轻度纤维化。肾组织细胞增殖、凋亡指数和增殖／凋亡比值均升高。肾实质细胞Cytc的表达随着建模时间延长显著增加；Caspase-3、Caspase-9mRNA明显增加且与肾组织中的Caspase-3、Caspase-9表达趋势一致。S组与M组比较肾功能部分改善，尿蛋白的排泄减少；形态学上系膜基质的增生、肾小球硬化和肾间质纤维化均减轻。与M组比较S组肾小球系膜细胞和／内皮细胞、肾小管上皮细胞8周前增殖指数、12周凋亡指数均显著减少；肾间质细胞增殖指数4周后减少，同期的凋亡指数增加。与M组比较S组肾小球、肾小管细胞增殖／凋亡比值8周前降低但12周时升高；肾间质细胞增殖／凋亡比值降低。CytC表达减弱，Caspase-3、Caspase-9mRNA升高幅度降低。 结论：肾衰保肾胶囊对残肾组织的功能和形态有保护作用。肾衰保肾胶囊主要通过抑制肾小球系膜细胞和／内皮细胞、肾小管上皮细胞前期的增殖、后期的凋亡；抑制肾间质细胞的增殖促进同期的凋亡。降低前8周但升高1 2周的肾小球、肾小管细胞增殖／凋亡比值；降低肾间质细胞增殖／凋亡比值来调节肾脏细胞增殖和凋亡的平衡。肾衰保肾胶囊可能通过线粒体途径减少肾实质细胞凋亡。