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乳腺癌细胞侵袭转移相关miRNAs的研究

吴正升  
【摘要】:第一部分不同侵袭力乳腺上皮细胞差异性miRNA表达谱的研究 目的:检测不同侵袭力人乳腺上皮细胞株中miRNAs的表达谱,分析差异性表达的miRNAs,筛选出可能与乳腺癌细胞侵袭力相关的niRNAs。 方法:应用高通量miRNA芯片(:niRBase数据库11.0版)检测人乳腺上皮细胞株HBL100、乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-468和MDA-MB-231中miRNA的表达谱,通过图像分析和数据统计分析方法,筛选出差异性表达的miRNAs。使用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法验证miRNA芯片结果,同时进一步在临床人乳腺病变(良性病变和乳腺癌)组织中检测miRNAs表达状况。 结果:将miRNA芯片分组为①低侵袭乳腺细胞组—-HBL100和MCF-7,②高侵袭乳腺癌细胞组——MDA-MB-231和MDA-MB-468。对芯片数据进行SAM分析,根据两组细胞miRNA相对表达量的差异和趋势,我们筛选出18个可能与乳腺癌细胞侵袭相关的miRNAs,其中7个miRNAs在高侵袭力乳腺癌细胞组显著上调,11个miRNAs在高侵袭乳腺癌力细胞组显著下调。我们选择其中显著下调的miR-339-5p和miR-340为进一步研究对象,real-time PCR检测结果显示它们在两组乳腺细胞和新鲜乳腺组织中表达状况与miRNA芯片一致。 结论:侵袭力不同的乳腺上皮细胞niRNAs表达谱存在差异性表达,提示miRNAs可能参与了乳腺癌侵袭行为的调控。 第二部分miR-339-5p和miR-340对乳腺癌细胞迁移和侵袭生物学行为作用的研究 目的:检测niR-339-5p和miR-340对人乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的生物学行为的作用。 方法:以乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231为研究对象,通过脂质体转染技术分别将miR-339-5p和miR-340的抑制物(ASO)和模拟物(mimic)转入细胞中,检测乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭行为的改变。使用原位分子杂交方法检测临床存档石蜡包埋的乳腺癌和乳腺良性病变组织中miR-339-5p和miR-340表达,并且分析其与乳腺癌临床病理特征和患者预后的关系。 结果:过表达niR-339-5p和niR-340可以显著抑制高侵袭乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移和侵袭,下调内源性miR-339-5p和niR-340表达可以显著促进低侵袭乳腺癌细胞MCF-7的迁移和侵袭。上述两种miRNA对乳腺癌细胞增殖无显著影响。临床乳腺癌组织中miR-339-5p和miR-340表达较良性病变组织表达显著下调,并且它们表达量与乳腺癌淋巴结转移和临床分期等呈显著负相关,与患者预后生存期呈正相关。 结论:niR-339-5p和miR-340在乳腺癌发生和发展过程中可能发挥了重要作用,是乳腺癌侵袭和转移的潜在生物学标志物。 第三部分miR-339-5p和miR-340抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭分子机制的研究 目的:探索niR-339-5p和miR-340抑制人乳腺癌细胞迁移和侵袭生物学行为的分子机制。 方法:利用生物信息学方法预测miR-339-5p和miR-340可能的靶基因,从中筛选可能参与调控乳腺癌细胞侵袭和迁移相关的潜在靶基因。通过体外实验,转染外源性miR-339-5p和miR-340ASO或mimics后,通过real-timePCR及western-blot检测转染后潜在靶基因1mRNA和蛋白表达。克隆目标基因3’UTR,将其与质粒psiCHECK-2(含荧光素酶报告基因)连接后,与miR-339-5p和miR-340mimics分别共转染乳腺癌细胞,进行荧光素酶报告实验(Luciferase Reporter Assay)验证它们的靶基因。 结果:在miR-339-5p和miR-340众多潜在靶基因中,分别选取BCL-6和c-Met为研究对象。转染miR-339-5p(?)miR-340的ASO或1mimics后,BCL-6和c-Met表达水平出现相应的上调或下调改变。荧光素酶报告实验显示:miR-339-5p和miR-340可分别直接结合BCL-6和c-Met基因3’UTR。 结论:miR-339-5p和miR-340可能分别通过调控靶基因BCL-6和c-Met(?)挥其抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭作用。


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5 中国抗癌协会乳腺癌专业委员会副主任委员 徐兵河;三原则应对“中国特色”乳腺癌[N];光明日报;2010年
6 记者 顾泳;乳腺癌近十年发病率增47%[N];解放日报;2010年
7 张献怀;治疗乳腺癌局部溃烂有新招[N];健康报;2010年
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