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红景天甙对黑素细胞生物学作用的研究及美白中草药筛选过程中一些问题的探讨

马晶波  
【摘要】: 面部色素沉着是由各种内、外因素引起的以面部色素形成过多为表现的病理性变化,临床上常见于黄褐斑、雀斑和黑变病等多种疾病。由于多方面因素的限制,目前尚缺乏安全有效的美白剂治疗。 经临床观察,红景天外用制剂具有治疗黄褐斑的作用,我们基于这个事实,从细胞分子生物学角度,研究红景天在皮肤美白功能方面的药物作用机理。 第一部分我们以黑素细胞为受试细胞,检测红景天甙对细胞的增殖、酪氨酸酶的活性及黑素合成的抑制作用。结果表明红景天甙对黑素细胞具有低细胞毒性,较强的细胞酪氨酸酶及黑素合成抑制作用。同时结果还表明,红景天甙对酪氨酸酶活性抑制的机制不是竞争性抑制,而是通过其它的途径抑制了酪氨酸酶的活性。 论文第二部分应用半定量 RT-PCR 及Wester blot方法,检测红景天甙对酪氨酸酶mRNA转录和相应蛋白表达的调节作用。结果表明,一定浓度的红景天甙可以下调黑素细胞酪氨酸酶mRNA和蛋白的表达。初步推断,红景天甙可能是通过调节酪氨酸酶mRNA和蛋白的表达实现对黑素细胞黑素合成的抑制。 第三部分建立紫外线照射致色素沉着细胞模型,检测红景天甙对紫外线照射致色素沉着的影响。试验结果显示,红景天甙对中波紫外线诱导黑素细胞黑素合成有明显的抑制作用。 论文最后,我们建立了紫外线照射诱导豚鼠背部皮肤色素沉着模型,通过体表疗效评估、皮肤色素值测定以及组织病理染色观察,表明红景天外用制剂对豚鼠皮肤无明显刺激反应;对UVB诱导豚鼠皮肤黑素沉着有抑制作用。进一步表明红景天治疗色素沉着性疾病的安全性与有效性。 通过上述实验,证实了中药红景天确有抑制皮肤黑素细胞黑素合成的作用。其作用的机理主要在于红景天甙直接抑制酪氨酸酶mRNA转录和蛋白的表达,而对酪氨酸酶活性无竞争性抑制作用。我们认为,无细胞系统蘑菇酪氨酸酶抑制实验适于美白中草药的初筛,而黑素细胞酪氨酸酶活性抑制实验能更准确地判定美 WP=5 白中草药的功效和机理。


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