收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

淋巴细胞基因表达谱揭示淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的分子机制

陈瑜  
【摘要】: 背景与目的: 免疫衰老是老年个体感染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病等患病率、死亡率增高的重要因素,亦是老年个体寿命预后的重要参数。衰老过程中伴随着免疫系统稳态的打破,表现为免疫细胞数量减少、增殖能力下降、免疫反应性降低等。免疫稳态在衰老进程中的成功重建,将有助于降低老年个体相关疾病的发病率、死亡率,提高老年个体的生存质量,延缓衰老。 近年来,关于免疫衰老相关机制的大量研究结果表明,淋巴细胞过度凋亡及对凋亡刺激的易感性增高是免疫衰老中免疫稳态失衡的重要分子机制之一。对于细胞凋亡的认识随着分子生物学手段的不断完善而取得了飞速进展,人们已经认识到多基因调控、多种信号传导途径的交互作用是细胞凋亡相关分子机制的重要特征。细胞凋亡与细胞增殖虽互为对立面,但正常情况下,二者在体内处于动态平衡,以维持机体细胞数量的平衡及自身的稳定。一旦二者之间的平衡被打破,就可能导致组织细胞稳态失去平衡,进而产生相应的疾病。就免疫系统而言,细胞凋亡参与了免疫衰老进程中淋巴细胞数量的减少、增殖能力的下降及免疫效能的减低等免疫稳态的失衡,因此针对淋巴细胞凋亡进行的有效干预将有助于老年期免疫稳态的重建。 尽管许多研究已经表明细胞凋亡是免疫衰老的重要分子机制,但目前尚缺乏可以调节免疫衰老进程中细胞凋亡与增殖失衡进而重建免疫稳态的有效手段,这正为我们的研究提供了切入点。鉴于目前对于免疫衰老过程中相关调控基因表达的研究局限于选取既定基因进行研究,而不能较全面地反应这一前提下基因表达的全貌;此外,多数研究集中于对某些刺激诱导下淋巴细胞凋亡及相关基因表达的研究,尚不能反应衰老个体体内淋巴细胞的基本状态及相关调控基因的基础表达。 故本研究拟在对老年大鼠脾淋巴细胞即刻凋亡(spontaneous apoptosis)百分率进行定量分析的同时,采用高通量的基因芯片技术对老年大鼠脾淋巴细胞基因表达谱进行分析,目的在于尽可能全面地了解导致老年状态下免疫稳态失衡的基因背景。同时我们进一步观察了淫羊藿总黄酮(Epimedium Flavonoids,EF)对老年大鼠脾 WP=4 淋巴细胞凋亡的影响,并分析了淫羊藿总黄酮干预后的老年大鼠脾淋巴细胞基因表达谱,目的在于了解淫羊藿总黄酮重建衰老进程中免疫稳态的基因调控模式,全面地阐明淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的分子作用机制。 材料 1、动物分组:实验用清洁级SD大鼠由复旦大学动植物科学部提供,23月龄大鼠30只,雌雄各半,随机分为2组,即老年对照组(OC组)、淫羊藿总黄酮组(EF组); EF组给予EF灌胃,OC组同时给予蒸馏水灌胃,灌胃时间为3个月。另设4月龄SD大鼠7只作为年轻对照组(YC组)。所有动物乙醚麻醉,无菌取脾,分离脾脏淋巴细胞。 2、药物制备:本研究采用辽宁产朝鲜淫羊藿(Epimedium Kereanum Nakai),由上海市医药工业研究院中药室提取淫羊藿总黄酮。实验时以蒸馏水配制为3g/100ml的溶液,根据0.06g/kgBW/d灌胃。 方法和结果 1、采用流式细胞技术结合Annexin Ⅴ-PI双标记对老年大鼠、年轻大鼠及淫羊藿总黄酮干预后的大鼠脾淋巴细胞即刻凋亡百分率进行定量分析。结果表明:年轻大鼠淋巴细胞凋亡百分率为10.91±6.70,老年大鼠淋巴细胞凋亡百分率为25.81±9.11,与年轻大鼠淋巴细胞凋亡百分率相比较,有极显著性差异(p0.01)。淫羊藿总黄酮干预后的老年大鼠淋巴细胞凋亡百分率为11.95±4.38,与老年大鼠对照组淋巴细胞凋亡百分率相比较,有极显著性差异(p0.01)。因此,结果提示,老年大鼠与年轻大鼠比较,其淋巴细胞呈现过度凋亡,而淫羊藿总黄酮可显著下调老年大鼠淋巴细胞的过度凋亡。 2、采用全基因组的研究手段—基因芯片技术(Gene Chip Rat Genome U34A Set, Affymetrix)结合MicroArray Suite 5.0、NetAffy等软件分析,比较并进一步分析老年大鼠与年轻大鼠淋巴细胞差异表达的基因表达谱及淫羊藿总黄酮干预后的老年大鼠淋巴细胞基因谱。结果表明: 老年大鼠与年轻大鼠相比较,表达上调的基因有116个,表达下调的基因有215个。结合我们研究的背景进行分析,老年大鼠淋巴细胞特征性的基因表达模式有以下特点:⑴具有促进细胞凋亡作用的基因表达显著上调,如:参与细胞凋亡发生中心控制及效应环节的Caspase1、Caspase3;Calpain Ⅱ;Dnase gamma;PKC delta;Bnip3l;p47等。具有抗凋亡作用的基因如Cathepsin B、Mta1等表达显著下调。⑵具有抗增殖作用的基因表达显著上调,如Rb、Anti-proliferative factor等。具有促进细胞增殖作用的基因表达显著下调,如c-myc、c-fos、Jun、A-raf;Rgc32、Cyclin WP=5 B1、Cyclin G-associated kinase等。⑶参与淋巴细胞活化增殖及免疫效应等基本信号通路的组成元件中,多个重要信号分子的表达显著下调,如酶关联受体信号途径重要信号分子Serine/Threonine protein kinase、cAMP dependent protein kinase、Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase 2、Spleen tyrosine kinase、inositol trisphosphate receptor subtype 3 (IP3R-3)、RAC protein kinase gamma、guanylate cyclase、protein-tyr


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 葛淑兰,田景振;大孔吸附树脂对淫羊藿总黄酮的分离纯化工艺研究[J];中国药学杂志;2005年05期
2 李娜,宋少江,李仁;不同采收期朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷及总黄酮的含量测定[J];中药研究与信息;2005年02期
3 马慧萍,贾正平,葛欣,何晓英,陈克明,白孟海;淫羊藿总黄酮抗大鼠实验性骨质疏松作用研究[J];华西药学杂志;2002年03期
4 张秀珍,韩峻峰,杨黎娟,钱国锋;淫羊藿总黄酮对体外培养骨细胞功能的影响[J];中国新药与临床杂志;2004年09期
5 张艺,肖崇厚,孟宪丽,刘永源,钟国跃;8种川产商品淫羊藿总黄酮的含量测定及资源利用[J];中国中药杂志;1995年04期
6 刘崇铭,王敏,梁利春;淫羊藿黄酮对脑血流与脑缺血的作用[J];沈阳药科大学学报;1995年03期
7 佘白蓉,秦达念,王晟,佘运初;淫羊藿总黄酮对雄性大鼠生殖功能影响的初步研究[J];中国男科学杂志;2003年05期
8 蒋淑君,王桂兰,崔存德,徐红;淫羊藿总黄酮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴钙调蛋白基因表达的影响[J];中国应用生理学杂志;2004年04期
9 李勇,季晖,李萍,谢林;淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的影响[J];中国药科大学学报;2002年01期
10 胡道德;姚慧娟;顾磊;王松坡;刘皋林;;淫羊藿总黄酮对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响(英文)[J];Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences;2008年02期
11 曾骆,戴静;淫羊藿总黄酮吸附洗脱工艺的研究[J];华西药学杂志;2004年06期
12 陈瑜,沈自尹,陈伟华;淋巴细胞基因表达谱揭示淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的分子机制[J];中国中西医结合杂志;2004年01期
13 蒋淑君,许兰芝;淫羊藿总黄酮的药理作用研究进展[J];中医药学报;2004年04期
14 马慧萍,贾正平,白孟海,葛欣,何晓英,陈克明;淫羊藿总黄酮对大鼠实验性骨质疏松生化学指标的影响[J];中国药理学通报;2003年02期
15 姜鸿,王树实,邹桂欣;益骨宁颗粒剂中淫羊藿提取工艺研究[J];时珍国医国药;2000年01期
16 黄秀兰,周亚伟,王伟;淫羊藿黄酮类化合物药理研究进展[J];中成药;2005年06期
17 宋丽晶,刘建璇,张晓宇,毋英杰;淫羊藿总黄酮提取物对维甲酸致大鼠骨质疏松模型的影响[J];特产研究;2002年04期
18 陆兔林,张余生,毛春芹,叶定江;炮制对淫羊藿中淫羊藿苷及总黄酮的影响[J];中国中药杂志;2002年06期
19 杨静玉,于庆海,李爽,徐静华;淫羊藿总黄酮对免疫功能低下小鼠的免疫增强作用[J];沈阳药科大学学报;1997年03期
20 卢泓,庄珂;正交设计优选淫羊藿提取工艺研究[J];长春中医学院学报;2004年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 郭姗姗;高英杰;时宇静;苏丹;崔晓兰;王意忠;;一枝蒿总黄酮体外乙肝病毒作用机理的实验研究[A];2009年全国中药学术研讨会论文集[C];2009年
2 陈胜璜;雷凤莲;;比色法测定藤茶中总黄酮的含量[A];中国自然资源学会全国第四届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2000年
3 钱春燕;郭启华;谷学新;邹洪;;银杏样品中总黄酮的光度测定[A];中国化学会第八届多元络合物会议论文[C];2002年
4 李君珂;姜子涛;李荣;;树脂吸附法分离纯化首乌叶总黄酮[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
5 唐春萍;陈艳芬;江涛;陈钦勇;何家劲;;高良姜总黄酮对大鼠实验性胃溃疡模型的影响[A];中华中医药学会中药实验药理分会第七届学术会议论文摘要汇编[C];2007年
6 楼洪刚;何俏军;吴洪海;楼宜嘉;;鸡肝散总黄酮提取物对实验性心肌缺血的保护作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会暨全国药理学术会议论文摘要汇编[C];2002年
7 楼洪刚;何俏军;吴洪海;楼宜嘉;;鸡肝散总黄酮提取物对实验性心肌缺血的保护作用[A];中国药理学会第八次全国代表大会论文摘要集(第二部分)[C];2002年
8 王琦;李雪;刘彦;朱志兵;薛英威;傅松滨;;应用基因表达谱芯片研究胃癌基因表达谱[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
9 李辉;梁春凤;;超声提取白背三七总黄酮的研究[A];第九届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2010年
10 蔡彦宁;温玫;张愚;陈彪;;帕金森患者尾状核中基因表达谱研究[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈瑜;淋巴细胞基因表达谱揭示淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的分子机制[D];复旦大学;2003年
2 田素礼;应用基因表达谱芯片探讨Oxaliplatin诱导人结肠癌细胞凋亡分子机制的实验研究[D];吉林大学;2005年
3 胡吉;垂体瘤组织基因表达谱及发病机制研究[D];复旦大学;2005年
4 黄志刚;应用肿瘤基因解剖工程数据库及RNA干扰技术检测大肠癌基因表达谱[D];复旦大学;2005年
5 黄静;扶正增效方对非小细胞肺癌放射增敏的临床及基因表达谱研究[D];北京中医药大学;2006年
6 姚实林;阳虚质理论及其外周血基因表达谱研究[D];北京中医药大学;2007年
7 马丽娟;利用激光捕获显微切割及基因芯片技术构建喉鳞状细胞癌基因组差异表达谱[D];中南大学;2008年
8 周美启;针刺心经与小肠经干预急性心肌缺血大鼠心脏和下丘脑基因表达谱比较研究[D];广州中医药大学;2005年
9 祝骥;人红白血病K562细胞基因表达谱芯片制作及应用研究[D];华南理工大学;2002年
10 张骞;红色毛癣菌孢子EST构建及基因表达谱分析[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王永禄;淫羊藿总黄酮抗骨质疏松二类新药研究[D];辽宁中医学院;2003年
2 傅爱冬;淫羊藿总黄酮的药学研究[D];湖北中医学院;2004年
3 任宇皓;黄芪多糖、淫羊藿多糖及淫羊藿总黄酮对NDV、IBDV活性的影响[D];南京农业大学;2000年
4 江永南;淫羊藿总黄酮磷脂分散物及其药动学与药效学研究[D];沈阳药科大学;2001年
5 司红丽;狗舌草总黄酮的提取及抗肿瘤作用研究[D];西北农林科技大学;2003年
6 向大雄;葛根总黄酮及其生物粘附性缓释片的研制与体内外评价[D];湖南中医学院;2002年
7 李泉;新型露酒的开发与研制[D];中国农业大学;2004年
8 刘长姣;红景天总黄酮超高压提取工艺及其粗提物生物活性的研究[D];吉林大学;2007年
9 范维刚;新疆罗布麻叶有效成分的提取研究[D];新疆大学;2005年
10 高昕;东北红豆杉枝叶中黄酮类成分富集工艺研究[D];黑龙江中医药大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 陈瑜;沈自尹;陈伟平;淫羊藿总黄酮重建衰老免疫稳态的分子机制[N];中国医药报;2005年
2 常怡勇;淫羊藿药理研究进展[N];中国中医药报;2004年
3 福建 许英章;淫羊藿有益气安神之效[N];民族医药报;2000年
4 本报通讯员 刘安琴 孙全明;质量标准研究为安康淫羊藿“正名”[N];安康日报;2006年
5 主任医师 尚学瑞;补肾阳用淫羊藿[N];医药养生保健报;2007年
6 山东中医药大学2006级硕士研究生 周根锋;淫羊藿寒温之争乃因炮制所致[N];中国中医药报;2007年
7 陈国华;温补肾阳佳品——淫羊藿[N];中国中医药报;2000年
8 ;淫羊藿治疗肾阳虚证机理被揭示[N];中国中医药报;2005年
9 赵民生;巴戟天、仙茅及淫羊藿功效异同[N];中国中医药报;2010年
10 沈施德;淫羊藿开发新用途[N];上海中医药报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978