水和离子通道在胸膜和肺部液体转运中作用的实验研究

【摘要】：第一部分 水和离子通道在胸膜腔液体转运中的作用 Ⅰ 胸腔液体转运的实验方法研究 目的 小鼠胸腔液体转运的方法学研究。 方法：小鼠吸入麻醉后，胸膜腔内直接注入高渗或等渗液体，在不同的时点收集胸腔积液，测量体积、渗透压和~(125)I记数。分析反映胸腔液体转运的指标。 结果：~(125)I标记的白蛋白在胸腔内被吸收；高渗液体注入胸膜腔后，体积先增加，随后减少，渗透压逐渐减少；等渗液体注入胸膜腔后，渗透压变化不明显，体积逐渐减少。 结论：胸膜腔内直接注射形成胸腔积液的方法可以用来进行小鼠胸腔液体转运的研究，渗透压的变化可反映高渗液体在小鼠胸腔内转运，体积的变化可反映等渗液体在小鼠胸腔内转运。 Ⅱ 水与离子通道调节剂在小鼠胸腔液体转运中的作用 目的：探讨上皮钠通道(epithelial sodium channel，ENaC)、水通道(aquaporin，AQP)和囊性纤维化跨膜调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator，CFTR)调节剂在小鼠胸腔液体转运中的作用。 方法：小鼠吸入麻醉后，胸膜腔内分别注入0.25 ml高渗和等渗液体，分别予以ENaC激动剂特布他林和抑制剂阿米吡嗪、AQP增强剂地塞米松和抑制剂氯化汞、CFTR激动剂CF-16和抑制剂CF_(inh)-172，在不同时间点回收胸腔液体，测量其渗透压、容积和示踪剂~(125)I-白蛋白计数。根据胸腔液体滤出率和吸收率变化，研究钠通道和水通道在胸腔液体转运中的作用。RT-PCR检测ENaC和CFTR在胸膜上的表达情况。 结果：ENaC抑制剂阿米吡嗪抑制高渗液体引起的胸腔液体滤出和等渗液体吸收(p＜0.05)，ENaC激动剂特布他林增加胸腔液体的滤出和吸收(p＜0.05)；水通道增强剂地塞米松增加高渗液体引起的胸腔液体的滤出(p＜0.05)，抑制剂氯化汞则起抑制作用(p＜0.05)，地塞米松和氯化汞对胸腔液体的吸收无影响(p＞0.05)。ENaC和CFTR在胸膜上有表达。CFTR抑制剂CF_(inh)-172显著抑制异丙肾上腺素对于胸腔液体吸收的促进作用(p＜0.01)，激动剂CF-16不能显著增强异丙肾上腺素的这种作用(p＞0.05)。