慢性阻塞性肺病氧化抗氧化失衡与炎症反应关系的研究
【摘要】：氧化应激增强、氧化抗氧化失衡在慢性阻塞性肺病(COPD)发病机制中的作用正受到越来越多的关注。但对急性发作期氧化应激与炎症反应之间的关系以及抗氧化剂对氧化抗氧化失衡和炎症反应的作用尚无一致的结论。本研究观察单个核细胞炎性细胞因子TNF-α和IL-8 mRNA表达与反应性氧核素(ROS)产生的关系以及抗氧化剂N—乙酰半胱氨酸(NAC)能否减少ROS产生从而抑制炎症反应。探讨COPD急性发作期氧化抗氧化变化以及与炎症反应的关系。研究分四部分:1.LPS刺激THP-1细胞后TNF-α和IL-8 mRNA表达和反应性氧核素产生以及N—乙酰半胱氨酸对其影响的研究。2.COPD急性发作期患者氧化抗氧化失衡与炎症反应关系的研究。3.LPS刺激COPD缓解期患者血单个核细胞后炎性细胞因子表达和反应性氧核素产生以及N—乙酰半胱氨酸对其影响的研究。4.慢性阻塞性肺病急性发作期患者呼出气冷凝水8—异前列腺素测定及其意义。
第一部分:LPS刺激THP-1细胞后TNF-α和IL-8 mRNA表达和反应性氧核素产生以及N-乙酰半胱氨酸对其影响的研究
目的:观测LPS刺激THP-1细胞后TNF-α和IL8 mRNA表达、反应性氧核素(ROS)产生以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能否减少ROS产生从而抑制炎症反应。方法:体外培养THP-1细胞株,荧光微量平板法测定THP-1细胞不同时间(0、0.5、1、1.5、3、24和48小时)ROS产生,荧光微量平板法和流式细胞仪测定不同浓度LPS(20、40、60、80、100和120ng/ml)刺激THP-1细胞24小时后ROS产生以及不同浓度NAC(0.1、1、10和20mM)对其的影响。RT-荧光实时定量PCR测定不同浓度LPS刺激THP-1细胞后TNF-α和IL-8mRNA表达以及
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