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丙泊酚对脑缺血/再灌注损伤病理发展进程及细胞凋亡现象的影响

陈莲华  
【摘要】:目的:针对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤经时反应进程的不同时段,观察丙泊酚对脑损伤后神经功能缺陷程度、病理形态学结果、细胞凋亡形态学表现、及凋亡调节蛋白表达的影响。方法:雄性SD大鼠,采用大脑中动脉内线栓法阻断大脑中动脉供血区域的血流,诱发局灶性脑缺血/再灌注损伤,通过脑损伤后神经功能缺陷程度评估,脑梗死、脑水肿容积的数据化图像分析,观察丙泊酚对脑缺血/再灌注损伤保护作用的剂量相关效应和时间相关效应;采用细胞凋亡特异性标记(TUNEL染色)技术,结合电子显微镜下细胞超微结构检查,检测不同程度缺血条件下的细胞凋亡现象,并观察丙泊酚对细胞凋亡形态学表现的经时反应过程的影响;应用免疫组化染色标记技术分析缺血/再灌注后脑组织凋亡调节蛋白的表达,及丙泊酚对抗凋亡蛋白表达水平的影响。结果:通过应用定性和定量分析手段,在器官水平、细胞水平、亚细胞水平的观察结果表明,丙泊酚从缺血开始前即刻给药直到再灌注后3h给药,均能明显改善大鼠3h局灶性脑缺血24h再灌注后神经功能缺陷的程度,减少脑梗死和脑水肿容积,而再灌注3h后给药则不出现这种脑保护效应;90min缺血再灌注6h后细胞凋亡的形态学表现开始明显出现,24小时为凋亡峰值,3天以后凋亡逐渐减少,6h~3天为高峰期,再灌注3天以后凋亡逐渐转为坏死;严重缺血细胞凋亡的时间过程不明显,迅速表现为细胞坏死;丙泊酚在再灌注各个时段均有抑制细胞凋亡形态学表现的作用,最显著效果出现在再灌注后6h~3天;丙泊酚有增强再灌注后脑组织bcl-2蛋白表达的作用,这种增强作用于再灌注后24h~5天较明显。结论:大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤病理表现为细胞坏死和细胞凋亡并存,凋亡存在的比例决定于缺血严重程度,较短时间的缺血引起更明显的细胞凋亡现象,并存在一个凋


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