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经门静脉肝脏内骨髓间充质干细胞移植的实验研究

王平  
【摘要】:第一部分 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究 目的: 观察体外经肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导或与肝组织共培养后的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)是否具有肝细胞特异性的基因及蛋白质表达的功能。 材料和方法: 梯度密度离心方法分离BMSC,经流式细胞仪鉴定后,两种体外诱导方法:HGF诱导0天、10天及20天;与正常或者受损肝组织共培养48小时,采用RT-PCR,Western blot和细胞免疫化学染色方法检测肝细胞特异性的AFP、白蛋白和细胞角蛋白8等的表达。 结果: BMSC经HGF诱导10d后,可以检测到AFP mRNA和蛋白质的表达,诱导20d后,可以检测到AFP及白蛋白的mRNA和蛋白质的表达。同时发现BMSC表达的HGF受体c-Met mRNA明显减少。与肝组织共培养48小时后,RT-PCR、Western blot和细胞免疫化学染色方法可以检测到BMSC表达白蛋白和细胞角蛋白8的mRNA和蛋白质。 结论: 经HGF体外诱导或与肝组织共培养后,BMSC可以表达肝细胞特异性的基因和蛋白质,具有向肝细胞样细胞分化的潜能。


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