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自由生活阿米巴及其胞内菌的相互关系研究

李勤学  
【摘要】:自由生活阿米巴(FLA)是一类单细胞生活的原生生物,广泛分布于自然环境中,以细菌和腐生生物为食,具有两个生活期,表现为活动状态的滋养体期和静止状态的包囊期。其中棘阿米巴属、巴拉姆希属、福氏耐格里阿米巴、Sappinia diploidea阿米巴能引起人和哺乳动物的疾病,主要为棘阿米巴性角膜炎、肉芽肿性阿米巴脑炎、原发性的阿米巴脑膜脑炎,皮肤感染等。 更重要的是越来越多细菌被发现能在FLA内生存和繁殖,因此FLA被称为微生物界的“特洛伊木马”。FLA捕食行为参与了自然界营养和能量的转化,控制着环境中细菌数量生态平衡。经过长期相互作用和生物进化选择,一些细菌能够避免被吞入后的溶酶体溶解,维持其生长活性,偶然情况下导致宿主细胞的裂解,从而相互间建立了共生或寄生关系。能在阿米巴内共生或寄生的细菌统称为抗阿米巴菌(ARB)。自1980年首次发现嗜肺军团菌在棘阿米巴内生存繁殖以来,随着阿米巴共培养方法及现代分子技术的应用,至今所发现阿米巴内共生菌有嗜肺军团菌、LLAPs、肺炎衣原体、副衣原体、Afipia felis、Burkholderia cepacia、Burkholderia pseudomalleis、0157大肠杆菌、李斯特单核细胞菌、鸟分枝杆菌,牛分枝杆菌,Simkania negevensis、霍乱弧菌、新隐球菌、弗朗西斯兔热菌以及最近发现的存在于多噬棘阿米巴的巨病毒等。因此FLA胞内菌的发现与相关领域的研究成为现代微生物学科新的研究热点。 越来越多的证据显示自由生活阿米巴与社区获得性肺炎(CAP)和院内感染性肺炎(HAP)有关,HAP是最常见院内感染,约0.5%—1%的住院病人发生HAP,也是院内感染主要致死原因,尽管有标准的诊断方法,全世界仍有45%-55%成人CAP和20-75%的HAP不明原因。嗜肺军团菌、假单胞菌等胞内菌是供水系统和空调通风系统等环境中常见的ARB菌,可能是一些临床上不明原因的疾病的致病菌,引起临床非典型呼吸系统感染。在环境中广泛分布FLA可能扮演着这些胞内生长菌的环境贮存宿主和传播媒介,人群面临着潜在的ARB菌暴露危险。因此我们拟开展FIA及其胞内菌的相互关系的研究。 目的 ①观察衣原体目成员与FLA的是否存在普遍的共生关系;②基于ARB菌与阿米巴宿主间的共生或寄生关系,拟以阿米巴原虫为工具,构建衣原体目成员新的分离培养及鉴定方法;③基于环境中FLA可能是许多胞内致病菌的贮存宿主和传播媒介的假设,拟进行医院和社区环境中FLA及其胞内共生菌的调查研究;④以新建的阿巴共培养方法,开展临床呼吸系统感染的病原学研究,期望从临床CAP和HAP分离出可能的胞内致病菌,为临床不明原因的呼吸系统感染提供新的检测方法;⑤探索霍乱弧菌与环境FLA的相互关系。


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