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醛糖还原酶在非糖尿病性肾小球肾炎和肾脏纤维化过程中的作用及机制研究

蒋涛  
【摘要】:肾小球硬化是临床多种肾小球疾病,如肾小球肾炎、IgA肾病、糖尿病肾病及狼疮性肾炎等导致慢性肾功能衰竭的重要病理基础,其主要病理特征是肾小球结构的毁损以及肾小球内细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的异常积聚,而ECM合成和(或)降解失平衡被认为是导致肾小球硬化的重要发生机制之一。因此,近年来的研究热点已逐渐集中到ECM代谢的调控机制,及其与肾小球硬化发生、发展的相互关系上。 肾脏系膜细胞(mesangial cell,MsC)作为肾小球内功能活跃的固有细胞,不仅在维持肾小球正常结构和功能中具有重要地位,而且在急性肾小球炎症和以进行性肾小球硬化为特征的各种慢性肾小球肾炎疾病中也起着关键作用。体内外大量研究表明,肾脏MsC高表达转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1),可以通过直接促进ECM成分的合成或影响ECM合成和(或)降解主要调节酶系统的活性而促进ECM合成增加和沉积。因此,TGF-β1与肾小球硬化的发生发展有密切关系,是肾小球硬化病变发生发展过程中的重要介质之一。 我们课题组前期通过SSH-PCR研究发现,醛糖还原酶(aldose reductase,AR)是大鼠MsC中TGF-β1相关反应性基因之一。AR为NADPH依赖性醛-酮还原酶家族成员,是多元醇代谢通路中的限速酶。由于AR与糖代谢关系密切,所以以往对AR的研究主要是集中在糖尿病并发症中,例如糖尿病肾病、视网膜病等,并已有采用ARI进行糖尿病并发症实验治疗的研究报道。但新近的研究表明,AR发挥其某些作用、功能并不一定与高糖状态有关,其参与的很多病理过程也并无高血糖的诱因。因此,作为TGF-β1相关反应性基因之一,AR是否同样也参与了TGF-β1具有重要作用的、非高糖诱因所导致的。肾小球硬化等病理过程值得关注。 本课题拟采用制备大鼠抗Thy-1肾炎模型、细胞培养、基因转染、RT-PCR、Western blot以及EMSA等实验方法,分别从体内、体外两方面观察AR在肾小球肾炎、纤维化及硬化等病理过程中的表达及其与TGF-β1的相互关系;观察AR在TGF-β1诱导


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