补肾中药与阿法骨化醇联合应用对去势大鼠骨质疏松的防治作用

【摘要】： 绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)是常见的原发性骨质疏松症,其发病率较高,对中、老年女性健康造成严重威胁。然而,其病理机制仍未清楚阐明,防治药物的有效性不尽理想。 我国的中医中药在“肾主骨”、“肾虚骨痿”和“益肾壮骨”等关于骨病的病理机理和治疗方面具有独到和丰富的理论和经验,并积累了大量的中医文献著作。依据“肾主骨”理论,中医学认为骨质疏松症多与肾虚有关,属“肾虚骨痿”范畴。因此,补肾壮骨是治疗骨质疏松症的治本方法。本研究采用我院中医科多年治疗老年肾亏相关病症的补肾方药,并联合应用阿法骨化醇,研究对去势诱发的大鼠骨质疏松模型的防治作用,同时探讨其相关机制。 目的研究补肾方药与阿法骨化醇联合应用对去势(ovariectomy, OVX)大鼠骨量丢失、骨结构改变的防治作用,并检测血清1,25(OH)2D、Ca、P含量,探讨雌激素缺乏诱发骨质疏松和药物干预作用的机理。 方法手术摘除雌性大鼠双侧卵巢,以子宫湿重、子宫湿重／体重、子宫内膜厚度和血清雌二醇水平(E2)判断卵巢摘除是否完全；以骨干重、灰重、骨密度(BMD)、骨组织形态计量、骨生物力学测定和骨代谢生化标志物等判断骨质疏松表现。采用酶免法检测血清25(OH)D和1,25(OH)2D水平,并检测血清Ca、P、血清碱性磷酸酶(ALP)值、尿吡啶酚／肌酐(Pyd／Cr)值。 6月龄SD雌性大鼠随机分为5组：假手术对照组(SHAM)、OVX组、OVX给予补肾中药组(OVX+TCM)、OVX给予补肾中药和阿法骨化醇组(OVX+TCM+VD)和OVX给予尼尔雌醇干预组(OVX+CEE3)。手术后35天开始灌服给药,给药13周后处死,检测骨量指标、骨组织病理形态计量、骨生物力学性能、血清25(OH)D和1,25(OH)2D、骨代谢生化标志物指标等。 结果 1、OVX大鼠子宫湿重、子宫湿重／体重、子宫内膜厚度和血清E2水平均较SHAM组明显降低,骨干重、灰重、体积骨密度(vBMD)等骨量指标和腰椎骨小梁形态计量、骨生物力学性能等骨质疏松指标较SHAM组均明显降低(P0.01),血清ALP和尿Pyd/Cr增高,形成高转换病理特点的雌激素缺乏型骨质疏松大鼠模型。 2、OVX给予尼尔雌醇干预的大鼠骨量指标和腰椎骨小梁形态计量、骨生物力学性能等指标较OVX组明显增加,骨转换指标得到抑制。 3、OVX后联合给予补肾中药和阿法骨化醇大鼠腰椎vBMD和股骨vBMD分别增加7.2%(P0.01)和3.3%(P0.01),骨结构明显改善,抗骨折性能明显提高,骨形成和骨吸收生化标志物降低。对OVX大鼠骨质疏松的防治作用优于单用补肾中药组。 4、OVX大鼠血清1,25(OH)2D的含量明显增高(P0.01),并出现血清钙降低,低钙和高水平1,25(OH)2D成为激活骨吸收,引起骨质疏松的病理机制之一。尼尔雌醇可使血钙水平恢复,1,25(OH)2D水平回落,骨重建速率抑制,为防治骨质疏松的有效机理之一。 5、补肾中药和补肾中药联合阿法骨化醇干预组血清钙未见明显恢复,血清1,25(OH)2D水平仍维持在高水平。 结论 OVX大鼠血清钙降低和1,25(OH)2D明显增高,是导致骨质疏松的病理机制之一。尼尔雌醇对雌激素缺乏诱发的骨量丢失和骨结构改变有效,与血清低钙得以纠正和高水平1,25(OH)2D回落有关。补肾中药和阿法骨化醇联合应用对OVX大鼠骨质疏松有明显防治作用,其作用机理可能与补肾中药多靶点作用和高水平1,25(OH)2D上调24,25(OH)2D,增加骨形成和骨矿化有关。