收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

MicroRNA-1285靶向调控p53的实验研究

田姝  
【摘要】: p53介导的细胞信号转导途径在调节细胞正常生命活动中起重要作用。但是p53的调控机制非常复杂,很多机制尚不清楚。microRNAs (miRNAs)是一类内源性表达的小分子非编码RNA,能够在转录后水平调控基因的表达。本项研究我们拟探讨miRNAs对p53的调控。 首先,采用生物信息学预测软件TargetScan预测可能调控p53的miRNAs。进而通过高通量的荧光素酶检测系统筛选候选的靶向p53 3’UTR的miRNAs。我们发现p53能够被miR-1285所调控。然而与miR-1285有着共同种子序列的miR-612,对p53 3’UTR荧光素酶报告载体却没有作用。 根据TargetScan软件的预测,p53 mRNA 3’UTR有两个miR-1285结合位点,其序列与成熟的miR-1285序列几乎完全互补。我们构建了含有突变位点p53 3’UTR的荧光素酶报告载体。荧光素酶检测显示,miR-1285对突变型荧光素酶活性的抑制没有野生型显著。这表明miR-1285是通过与这两个靶位点的结合而发挥靶向调节p53基因的作用。 将miR-1285模拟物或RNA对照转染MCF-7、SH-SY5Y和HepG三株p53野生型细胞系。结果表明外源性表达miR-1285可以抑制p53 mRNA和蛋白水平的表达。SH-SY5Y细胞中miR-1285相对表达水平最高,将miR-1285反义寡核苷酸转染SH-SY5Y细胞,结果显示抑制miR-1285后p53的表达上调。 p21是p53下游的重要基因之一,我们进一步检测了miR-1285对于p21的作用。WWP-Luc是带有p21启动子的荧光素酶报告载体,将miR-1285与WWP-Luc共转SH-SY5Y细胞,其荧光素酶活性显著抑制。与此相一致,miR-1285可以下调SH-SY5Y细胞中p21 mRNA和蛋白水平的表达。 通过以上研究,我们首次发现miR-1285能够通过直接靶向p53 3’UTR而下调p53基因的表达。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 朱新霞;艾尼江;闫洁;赵海;;同步提取棉花DNA和RNA的方法[J];石河子大学学报(自然科学版);2011年03期
2 刘胜洪;刘文;刘明峰;杨凤婷;刘庆生;梁红;;一种高效提取猕猴桃DNA和RNA的方法[J];生物技术通报;2011年09期
3 马利华;武安全;杨同文;;巧用DNA凝胶回收柱提纯种子RNA[J];生物学通报;2011年03期
4 ;英科学家首次测出活体心脏能量水平[J];生命世界;2006年11期
5 唐丽霞;;发光的“魔树”[J];青苹果;2009年10期
6 高国生;翁彭剑;纪礽斌;李德周;李永燕;李红山;丁世雄;;靶向HBx小干扰RNA表达载体构建及其功能探讨[J];中国卫生检验杂志;2011年07期
7 朱志文;;巴西雨林重现失落荧光蘑菇[J];科学大观园;2011年16期
8 丁存宝;刘海燕;李桂秋;吴尚卓;贾长虹;;HCV NS3/4A蛋白酶抑制剂细胞筛选模型[J];生命的化学;2011年04期
9 ;科技要闻[J];科技导报;2011年21期
10 刘静;张国君;;光学分子影像技术及其在药物研发领域的应用[J];生物物理学报;2011年08期
11 林乐勋;赵文然;武帅钦;佟雷;王燕;张凤民;钟照华;;H9c2细胞对B组柯萨奇病毒3型重组株的易感性[J];微生物与感染;2011年02期
12 梁燕;王志钢;;细菌的群体感应及与病原菌致病性的关系[J];生物技术通报;2011年06期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 岳洋;朱化彬;郝海生;杜卫华;赵学明;王栋;;牛精子总RNA制备及mRNA线性扩增的初步研究[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
2 李士泽;赵雅楠;李玉恒;杨焕民;;冷诱导RNA结合蛋白的结构与功能[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
3 王洁;刘金亮;阴筱;高瑞;李向东;刘焕庭;;HC-Pro三个参与抑制RNA沉默氨基酸位点的鉴定[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 康磊;王荣福;闫平;;放射性标记对小干扰RNA在体内分布的无创性示踪研究[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
5 王峰;张秋平;陈金湘;;棉花总RNA的快速提取方法[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
6 赵庆华;田纪伟;王雷;董双海;王震;刘诚袆;;RNA干扰环氧化酶2对人腰椎退变终板软骨细胞生长增殖及凋亡的影响[A];第十九届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2010年
7 孙凯;汪谦;;液相芯片技术在小分子RNA检测分析中的应用[A];肝脏病防治学术研讨会及新进展学习班专刊[C];2005年
8 张晖;覃君慧;柳金雄;冯亚玫;陈秋生;;Sox2 RNA探针的制备及其mRNA在早期鸡胚中的原位杂交检测[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
9 孔瑞瑞;;hALP,一个新的t-UTP,通过结合并乙酰化UBF促进RNA Pol I的转录[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
10 吴修胤;张雪;张风河;;微小RNA与口腔肿瘤的研究进展[A];第八次全国口腔颌面—头颈肿瘤会议论文汇编[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李建华;髓样细胞分化蛋白88抑制乙型肝炎病毒复制的机制研究[D];复旦大学;2010年
2 翟妞;PIH1介导SNF5在激活核糖体RNA基因转录的调控机制[D];中国协和医科大学;2010年
3 于丽;纳米基因载体介导RNA干扰沉默Survivin基因治疗大肠癌的实验研究[D];中南大学;2009年
4 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
5 马进;水稻条纹病毒(RSV)RNA3、RNA4的克隆与抗RSV转基因水稻的培育[D];山东农业大学;2011年
6 金哲秀;RNA干扰抑制基质金属蛋白酶对小鼠动脉粥样硬化影响的实验研究[D];吉林大学;2011年
7 孙永刚;核干细胞因子RNA干扰对HT29细胞CDX2表达的影响[D];第三军医大学;2009年
8 刘爱军;脑内冷诱导RNA结合蛋白的表达及其神经保护作用研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
9 靳宇;RNA带扭结结构的组合研究[D];南开大学;2010年
10 鄂继福;应用RNA干扰技术沉默Med-19基因及其对大肠癌细胞增殖影响研究[D];第二军医大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 田姝;MicroRNA-1285靶向调控p53的实验研究[D];复旦大学;2010年
2 李喜英;黄瓜花叶病毒2b蛋白在RNA沉默通路中的作用方式研究[D];浙江理工大学;2010年
3 王冕;棉花RNA依赖的RNA聚合酶6(GhRDR6)基因的分离及功能分析[D];山东农业大学;2011年
4 王庆晓;RNA干扰逆转HeLaB2/DDP细胞顺铂耐药的研究[D];南京大学;2011年
5 石杜娟;利用RNA干扰技术抑制日本血吸虫酪氨酸羟化酶的合成[D];安徽医科大学;2011年
6 张旭;表达猪let-7c细胞株的建立及其对猪瘟病毒的调控作用[D];西北农林科技大学;2010年
7 王少军;RNA解旋酶p68在创伤愈合中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2010年
8 丁艳杰;葡萄病毒A MP基因RNA干扰载体的构建及其鉴定[D];中国农业科学院;2011年
9 崔广迪;基于H1N1的RNA二级结构的相似性比较研究[D];吉林大学;2010年
10 孟益聪;哺乳动物细胞有丝分裂中期染色体上RNA成分的研究[D];兰州大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 聂翠蓉;RNA:纵是配角也精彩[N];科技日报;2009年
2 记者 常丽君;新技术让研究进入单细胞内RNA的世界[N];科技日报;2011年
3 伊瑶;RNA干扰技术成明日黄花?[N];医药经济报;2011年
4 王小龙;科学家发现控制个体稳定的RNA片段[N];科技日报;2009年
5 本报记者 衣晓峰 聂松义 通讯员 陈英云;微小RNA揭开心律失常之谜的“金钥匙”[N];健康报;2010年
6 冯卫东;RNA干扰机制首次在人体中获得证实[N];科技日报;2010年
7 记者 常丽君;新RNA转录变体可简化生物线路[N];科技日报;2011年
8 记者 聂翠蓉;细胞“垃圾”也能变废为宝[N];科技日报;2008年
9 记者 刘海英;病毒会利用微RNA对人体实施攻击[N];科技日报;2010年
10 陈蕾;赛默飞世尔启动RNA干扰研究/药物筛选资助项目[N];中国包装报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978