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水稻OsFAD6的克隆及其家族成员在低温等非生物胁迫中的作用

曹英萍  
【摘要】: 植物中的不饱和脂肪酸由脂肪酸去饱和酶(fatty acid desaturase)合成,它在植物的生长发育以及植物非生物胁迫方面起着重要作用。本研究采用RT-PCR方法,从水稻日本晴(Oryza sativa L.)中克隆了FAD6同源的脂肪酸去饱和酶序列OsFAD6。OsFAD6的ORF长度为1365 bp,编码454氨基酸的蛋白质序列,分子量44.35 kDa,等电点为9.24,推测N端38个氨基酸为叶绿体导肽,具有膜整合脂肪酸去饱和酶特有的三个组氨酸簇。FAD家族成员的聚类树分析表明,OsFAD6与其它物种中已发现的FAD6聚在一起。RT-PCR分析表明OsFAD6在水稻所有器官中都表达,在叶中表达量为最高。在水稻的FAD家族中,叶中的OsFAD2, OsFAD6mRNA对低温不响应,而OsFAD7和OsFAD8 mRNA在低温下上升。水稻叶中OsFAD2, OsFAD6, OsFAD3和OsFAD7的表达具有昼夜节律性,在光照下表达量低,而在随后的黑暗中表达量高。进一步的实验证明OsFAD6和OsFAD7表达的昼夜节律性变化可能与水稻幼苗中NADPH量的改变有关。 植物在低温下会增加细胞膜的不饱和脂肪酸含量以降低冷害程度,本实验分别利用冷诱导型启动子AtCor15a-promoter和OsFAD8-promoter以及组成型启动子CaMV35S-promoter来启动本研究小组已获得的OsFAD2, OsFAD6, OsFAD3, OsFAD8基因,通过转基因的方法转入水稻,以期获得耐低温的水稻品种。目前部分转基因株系已获得T2代种子。


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