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尼古丁刺激DCs抗肿瘤机制及肿瘤微环境DCs失能研究

高丰光  
【摘要】:树突状细胞(dendritic cells, DCs)是机体最为重要的抗原递呈细胞,其介导产生的抗原特异性CTL是机体抗肿瘤免疫的主要机制,因此DCs的功能状态直接影响肿瘤免疫治疗的效果,也可能与肿瘤在机体内的免疫逃避密切相关。为探讨尼古丁刺激未成熟DCs (immature DCs, imDCs)抗肿瘤机制和肿瘤细胞对imDCs功能状态的影响,imDCs先以尼古丁刺激或与表达肿瘤特异性抗原的小鼠淋巴瘤细胞EG7、表达肿瘤相关抗原的小鼠黑色素瘤细胞B16和小鼠肝癌细胞Hepa1-6体外直接共培养,次以流式细胞术检测imDCs的表面分子表达情况、吞噬能力及imDCs所介导的抗原特异性淋巴细胞增殖能力,再以ELISA、ELISPOT分别检测imDCs所介导抗原特异性淋巴细胞增殖反应中细胞因子IL-12分泌、抗原特异性CTL增殖分化情况,最后以表达肿瘤特异性抗原之小鼠淋巴瘤EG7细胞、表达肿瘤相关抗原之小鼠淋巴瘤EL4、肺癌LLC、肝癌Hepa 1-6细胞荷瘤小鼠,并经腹腔转输尼古丁刺激联合肿瘤抗原负载之imDCs,检验尼古丁刺激imDCs的抗肿瘤效果。结果显示:尼古丁刺激不但可明显增加imDCs CD80、CD86、CD40、CD54等表面分子和趋化因子受体CCR7表达,而且也明显增强imDCs对抗原的吞噬能力;尼古丁刺激也明显增强imDCs所介导的抗原特异性淋巴细胞增殖、IL-12分泌、CTL增殖分化能力;尤为重要的是,小鼠荷瘤实验证实,尼古丁刺激imDCs体内转输不但对表达肿瘤特异性抗原的淋巴瘤有预防和和治疗效果,而且也可用于表达肿瘤相关抗原的小鼠淋巴瘤、肺癌、肝癌的预防和治疗。肿瘤细胞-imDCs共培养不但显著降低imDCs表面分子CD80、CD54、CD11b、CD11a及MHC II类分子表达,而且也降低imDCs所介导的抗原特异性淋巴细胞增殖、IL-12分泌及CTL增殖分化能力。上述结果提示:尼古丁刺激能明显改善imDCs所介导的抗原特异性CTL增殖的能力,尼古丁刺激imDCs具有明显的抗肿瘤效应,尼古丁刺激imDCs可望成为肿瘤免疫治疗的有效策略。肿瘤细胞与imDCs共培养可直接损害imDCs所介导的抗原特异性CTL增殖的能力,可能是肿瘤逃避机体免疫打击的机制之一。


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