收藏本站
收藏 | 论文排版

加压毛细管电色谱二维联用技术的研究及其在复杂体系分离中的应用

吴漪  
【摘要】:加压毛细管电色谱(pCEC)以压力流结合电渗流为驱动力,克服了电色谱本身不能定量进样、焦耳热明显和易产生气泡等缺点,同时可提供梯度洗脱,有利于复杂样品的分离分析。近年来,由于各种组学的出现,对分析技术提出了更大的挑战。两维联用技术结合两种不同分离机理的分析模式,可以有效地提高系统的峰容量和分辨率,为复杂样品的分析提供了更好的分离手段。加压毛细管电色谱对带电物质本身就兼具毛细管电泳和高效液相色谱的双重机理,进一步发展加压毛细管电色谱技术的二维联用,将提供一种基于三重分离机理基础上的分析平台,具有更好的选择性和更大峰容量,应用领域十分广阔。本论文将建立基于加压毛细管电色谱的二维联用技术,并用于中药、生物样品等复杂样品的分离分析,取得了较好的结果。 本论文共分为六章,主要包括: 第一章介绍了选题背景和意义。主要介绍了毛细管电色谱和加压毛细管电色谱的基本原理和色谱柱技术,并描述了二维色谱联用技术的特点和研究进展,在此基础上阐述了发展加压毛细管电色谱二维联用技术的优势。 第二章将加压毛细管电色谱用于中药黄柏提取液的分离分析。通过对提取溶剂、流动相组成、检测波长、施加电压等条件的优化,建立了中药黄柏提取液的加压毛细管电色谱分析方法。其中着重讨论了电压对黄柏分离的影响,并以药根碱、小檗碱和巴马汀等三种标准品为验证对象,研究了pCEC的双重选择性。发现与通常的微径液相相比,pCEC可调节参数多,对优化复杂样品的分离具有更多和更好的可能性,为其在二维联用中发挥电压对分离带来的独特优势提供了方法基础。 第三章构建了强阳离子交换-反相双相整体柱加压毛细管电色谱(Biphasic SCX-RP monolithic pCEC 2D system)二维系统。为了实现二维联用体系的简单、方便和实用,在本实验中将SCX和RP两种填料通过整体柱技术合成在一根毛细管中,制成新型SCX-RP双相整体柱,并将其应用于二维pCEC的体系,构建了双相柱二维pCEC分离模式。尝试利用NH4Cl盐从SCX柱上进行四步洗脱,再用乙腈-水梯度对RP柱进行洗脱,用于牛血清白蛋白(BSA)酶解液的分离。此技术的实现为二维技术的发展提供了新的思路。 第四章建立了强阳离子交换毛细管液相色谱和反相加压毛细管电色谱(μ-SCXLC/RP-pCEC)二维联用系统。通过对单维分析条件、二维体系流动相的匹配度、片段切割次数等条件进行了优化,分别构建了离线和在线两种μ-SCXLC/RP-pCEC二维联用体系,并用于中药、生物样品等几种复杂体系的分析。其中第一维SCX采用NH4Cl盐-水体系,离线模式采用线性梯度洗脱,在线模式采用台阶梯度洗脱;第二维pCEC采用乙腈-水体系,离线和在线模式均采用梯度洗脱。并通过理论深入研究了实验构建的二维系统的正交性、峰容量等表征参数,发现从理论上可证明此二维体系正交程度较高,黄柏、BSA酶解液和人血清酶解液三种样品分离的正交性均超过了75%,三种样品离线体系的实际峰容量达到568、940和576,在线模式达到355、436和480,远远高于单维分离体系,证明构建的二维体系可以有效地提高峰容量和分辨率。 第五章构建了两种亲水性液相色谱和反相加压毛细管电色谱二维系统:氰基液相色谱-反相加压毛细管电色谱(CN-LC/RP-pCEC)和氨基液相色谱-反相加压毛细管电色谱(Amide-LC/RP-pCEC)。第一维亲水色谱分别选用氰基和氨基两种亲水模式色谱柱,流动相采用甲醇-水体系;第二维采用反相C18色谱柱,流动相采用乙腈-水体系。利用三种色谱柱对不同极性物质分离能力带来的互补性和正交性,不同流动相带来的选择性,通过离线收集浓缩的方法解决两维流动相匹配问题的基础上,构建了两种离线CN-LC/RP-pCEC和Amide-LC/RP-pCEC二维联用模式,并用于复杂样品BSA酶解液和人血清酶解液的分离分析,峰容量达到了600-700。 第六章构建了反相加压毛细管电色谱和反相液相色谱-离子阱质谱(RP-pCEC/RP-LC-LTQ)二维分离系统。考虑到多肽类物质在不同pH值下在反相色谱上保留情况不同,第一维RP-pCEC采用碱性流动相,第二维RP-LC采用酸性流动相,且第二维直接与LTQ质谱相联,用于肝硬化病人蛋白质组学研究。发现此二维体系可鉴定出人血浆酶解液中4760个非冗余肽段。正常人和肝硬化病人的血浆中均鉴定出100个以上的蛋白,并找到了31个差异蛋白。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 马蓓蓓;毛细管气相色谱及其联用技术在环境分析中的应用[J];中国卫生检验杂志;2000年06期
2 杜达安,许瑛华;顶空固相微萃取-气相色谱法测定水中的丙烯腈[J];卫生研究;2005年04期
3 许一平;罗启恩;;高效液相色谱技术在中药指纹图谱研究中的应用[J];中国科技信息;2007年12期
4 黄鑫;宋凤瑞;刘志强;刘淑莹;;现代质谱及其联用技术在中药五味子研究中的应用[J];世界科学技术(中医药现代化);2009年01期
5 邵丽娟;施泽明;倪师军;徐进勇;;成都市城郊鱼甲基汞的安全性研究[J];安徽农业科学;2009年28期
6 王绪明,白林;高效液相色谱及其联用技术在药物分析中的应用新进展(二)[J];解放军药学学报;2004年06期
7 周婷;王家玥;肖小华;李攻科;;天然产物样品前处理分离分析联用技术研究进展[J];世界科学技术(中医药现代化);2009年01期
8 孙鹤;;药物中有关物质检查方法的研究进展[J];求医问药(下半月);2011年07期
9 李开密,史宏兰,吴予明,蔡毅,徐伟民,王家政;凝胶色谱与紫外吸收分析仪联用技术分离青霉素G中抗原性高分子杂质的研究[J];郑州大学学报(医学版);1987年02期
10 梁延寿;超临界流体萃取—超临界流体色谱法联用技术及其在生药分析中的应用[J];药物分析杂志;1996年01期
11 徐新元;气相色谱(GC)、红外光谱(FTIR)联用技术及其在药物分析中的应用[J];中成药;2001年06期
12 吴玫涵,聂凌云;气相色谱-质谱联用技术在我国中药研究中的应用[J];解放军药学学报;2002年02期
13 牟彩萍 ,石俊英;红外光谱定量、联用技术及在中药质量控制中的应用[J];山东医药工业;2002年04期
14 陈执中;;新的芯片毛细管电泳及其联用技术研究应用进展[J];药物生物技术;2007年01期
15 李瑞芬;叶明德;;中草药中微量元素铁锰锌铜锶的形态分析[J];微量元素与健康研究;2010年02期
16 陈鸳谊;李行诺;张翠萍;颜继忠;;高效制备液相色谱在天然产物分离中的应用[J];药学进展;2010年08期
17 侯化;聚合酶链反应与高效毛细管电泳联用技术的现况及前景[J];陕西医学检验;1999年04期
18 王二丽,陈丹,包国荣;色谱—质谱联用技术在中药研究中的应用[J];福建分析测试;2003年02期
19 王绪明;高效液相色谱及其联用技术在药物分析中的应用新进展(一)[J];解放军药学学报;2004年05期
20 王绪明;;近年来红外光谱在临床医药学中的应用新进展[J];现代仪器;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孙婧;何滨;江桂斌;;HPLC-ICP-MS联用技术分离鉴定生物体内锡结合蛋白[A];中国化学会第27届学术年会第02分会场摘要集[C];2010年
2 江晓胜;周虎;张雷;夏其昌;曾嵘;;双向液相色谱与串联质谱联用技术(2D-LC-MS/MS)用于高通量鉴定大鼠肝脏亚细胞蛋白质组[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
3 严秀平;李妍;尹学博;李峰;江焱;王冬冬;;毛细管电泳-原子荧光/吸收光谱在线联用技术[A];第三届全国微全分析系统学术会议论文集[C];2005年
4 赵云强;杨明伟;郑进平;付凤富;;基于CE-ICP-MS联用技术分析检测食品中不同元素形态化合物[A];第六届全国环境化学大会暨环境科学仪器与分析仪器展览会摘要集[C];2011年
5 胡扬;薛佳;陈奇;韩雪;;核磁共振及其联用技术在药物代谢研究中的应用[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
6 田亚峻;占双林;崔彦斌;陈运法;;热重-质谱联用技术对氢气氛下苯CVD体系碳纳米管生长研究[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)[C];2006年
7 许瑛华;;顶空固相微萃取—气相色谱法测定水中的丙烯腈[A];第十五次全国色谱学术报告会文集(上册)[C];2005年
8 廖芸;吴素素;欧阳钢锋;;SPME与GC/MS联用技术检测人血清中邻苯二甲酸酯[A];第六届全国环境化学大会暨环境科学仪器与分析仪器展览会摘要集[C];2011年
9 李彦;胡融刚;卓向东;林昌健;;扫描微电极技术与扫描隧道显微镜联用系统的研制[A];第十三次全国电化学会议论文摘要集(下集)[C];2005年
10 贾丽;杜艳艳;刘海清;邢达;;加压毛细管电色谱与固相微萃取联用技术的研究[A];中国光学学会2006年学术大会论文摘要集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吴漪;加压毛细管电色谱二维联用技术的研究及其在复杂体系分离中的应用[D];上海交通大学;2011年
2 陈贝贝;基于ICP-MS的联用技术及其在生命体系中元素与形态分析的应用[D];武汉大学;2010年
3 梁振;多分离模式/电喷雾质谱联用方法发展及相关基础研究[D];中国科学院研究生院(大连化学物理研究所);2005年
4 刘智超;复杂信号解析与建模方法研究[D];南开大学;2009年
5 孔祥吉;污水处理过程中内分泌干扰物的分布特征与去除效果研究[D];哈尔滨工业大学;2008年
6 王惠英;光散射技术及其在药物生物大分子分析中的应用研究[D];西南大学;2007年
7 李彦;金属腐蚀研究中具有时间—空间分辨的电化学技术[D];厦门大学;2009年
8 陈宾;原子光谱/质谱中的气体样品引入新方法及其在中药分析中的应用[D];厦门大学;2002年
9 余莉萍;原子荧光在线联用技术在形态分析中的应用[D];南开大学;2004年
10 王佳静;基于毛细管电色谱技术的药物复杂体系分离分析方法研究[D];第二军医大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 白小红;毛细管微萃取在痕量元素及其形态分析中的研究[D];山西师范大学;2010年
2 开天瀚;联用技术在生物分子检测中的应用[D];中南大学;2012年
3 郭梅;亚临界水萃取-固相(微)萃取联用技术的研究[D];华中科技大学;2004年
4 胡良;利用HPLC-ICP-MS联用技术研究血清中硒的形态[D];南华大学;2011年
5 高艳艳;GC-MS联用技术中的离子源气体密度分布和色谱流量控制研究[D];天津大学;2010年
6 游水英;低压离子色谱与化学发光联用技术在环境分析中的应用研究[D];西南大学;2006年
7 张磊;低压离子色谱和化学发光联用技术研究还原性阴离子[D];西南大学;2007年
8 黄科;全氟修饰毛细管硅胶整体柱的制备及应用研究[D];湖南师范大学;2011年
9 刘玲;低压离子色谱及其与化学发光联用技术的应用研究[D];西南师范大学;2002年
10 夏黎明;利用HPLC和HPLC/MS分析比较当归有效成分的研究[D];南京工业大学;2003年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 杨洪军;中药质量控制技术与方法[N];中国中医药报;2007年
2 杜英峰 张兰桐;现代分离分析技术在中药研究中各领风骚[N];中国医药报;2005年
3 贺浪冲 田颂九;中药分析研究初步形成特色[N];中国医药报;2007年
4 澳门大学中华医药研究所 王一涛 李绍平;适应中药国际拓展的质量控制[N];医药导报(中药报);2003年
5 梁展红 郭胜民;全球药物创新的六大模式(19)[N];中国医药报;2002年
6 梁展红 郭胜民;全球药物创新的六大模式[N];中国中医药报;2002年
7 ;国外仪器仪表发展趋势漫谈(待续)[N];中国机电日报;2000年
8 王红;我国毛细管电泳技术步入先进行列[N];中国化工报;2004年
9 山西 刘文君;新型多功能食品清洗机渐受青睐[N];电子报;2006年
10 王红;分析化学亟待求新突破[N];中国化工报;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978