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两种环境激素对鲫鱼的免疫毒性研究

丁辉  
【摘要】: 以鲫鱼为受试动物,用甲草胺和阿特拉津两种除草剂染毒,研究这两种环境激素对鲫鱼的主要免疫细胞-淋巴细胞和巨噬细胞的活性功能的影响,观察甲草胺和阿特拉津体外染毒与长期暴露对鲫鱼的免疫毒性,为评价环境激素对动物的内分泌干扰效应及筛选环境激素的生物标志物提供科学依据。主要研究结果如下: 从鲫鱼血液中分离淋巴细胞体外培养,用甲草胺和阿特拉津染毒,开展对淋巴细胞生长活性的影响实验,结果表明,两种环境激素对淋巴细胞活性的抑制作用存在较明显的剂量-效应关系,甲草胺和阿特拉津对淋巴细胞的半数抑制浓度(IC_(50))分别为27.7±7.6μg/L和97.6±26.4μg/L。两种环境激素对鲫鱼淋巴细胞增殖的影响实验结果表明,甲草胺在浓度达到7μg/L时就对淋巴细胞增殖产生明显的抑制作用,而阿特拉津则在浓度达到50μg/L时才对淋巴细胞增殖产生抑制作用。 从鲫鱼的免疫器官-头肾中分离纯化得到巨噬细胞,体外培养,用甲草胺和阿特拉津染毒。实验结果表明,甲草胺和阿特拉津对巨噬细胞的IC_(50)分别为68.2±7.1μg/L和153.9±23.5μg/L。甲草胺和阿特拉津对鲫鱼巨噬细胞产生超氧阴离子(O_2~-)活性的影响实验结果表明,两种环境激素均可抑制巨噬细胞产生超氧阴离子(O_2~-)活性,但剂量-效应关系并不显著。 甲草胺和阿特拉津对细胞酶活的影响实验结果表明,两种环境激素对淋巴细胞的乳酸脱氢酶(LDH)酶活和巨噬细胞的LDH与酸性磷酸酶(ACP)酶活的抑制作用表现出明显的剂量-效应关系。因此可推断,甲草胺和阿特拉津对细胞酶活的抑制效应可能是其对鲫鱼淋巴细胞和巨噬细胞活性功能产生影响的主要原因。 将鲫鱼分别暴露于不同浓度的甲草胺和阿特拉津,60 d后采血,一部分用于分离淋巴细胞进行淋巴细胞增殖实验,一部分用于血液白细胞计数。长期暴露实验结果表明,浓度范围为64~500μg/L的甲草胺染毒组和浓度范围为6~3000μg/L的阿特拉津染毒组的淋巴细胞增殖水平与对照组相比均有不同程度的下降。血液白细胞计数实验结果表明,当甲草胺浓度为250和500μg/L,阿特拉津浓度为1500和3000μg/L时,染毒组血液白细胞数与对照组相比均有明显下降。 无论是体外染毒还是长期暴露实验均表明,当甲草胺和阿特拉津达到一定浓度后,对鲫鱼淋巴细胞和巨噬细胞的活性功能均表现出抑制作用,表明这两种环境激素对鲫鱼存在潜在的免疫毒性。


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