收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

农药类环境激素低剂量暴露对鲫鱼内分泌干扰效应及生物标志物研究

伊雄海  
【摘要】: 本文以典型农药类环境激素甲草胺、阿特拉津为对象,选用鲫鱼为模式生物,研究不同剂量、尤其是低剂量甲草胺、阿特拉津暴露对鲫鱼的生殖、内分泌和免疫功能的影响。试验设计甲草胺和阿特拉津的暴露浓度为:1/8、1/16、1/64、1/256、1/1024、1/4000 LC50,采用半静态水体染毒方法,试验期间每天更换一半染毒溶液,以确保暴露浓度恒定不变,持续染毒2个月。应用分子生态毒理学等研究方法及体内、体外相结合手段,开展环境激素作用机理和剂量-效应关系研究,尝试建立低浓度暴露生态毒理学研究方法体系,寻找水环境污染的早期预报的生物标志物,为环境激素的生态和健康风险评价提供科学依据和技术支持。主要研究结果如下: 1、低剂量甲草胺及阿特拉津暴露可抑制鲫鱼的肝脏和精巢的生长、发育,使性腺指数和肝腺指数明显下降,作用影响呈非单调剂量效应关系。观察组织切片发现,甲草胺及阿特拉津暴露可损伤鲫鱼肝脏细胞结构,使肝脏细胞出现空泡、坏死、细胞肿大、胞质疏松等病理变化;并破坏鲫鱼精巢结构,影响其生殖能力,具有生殖毒性。 2、低剂量甲草胺及阿特拉津暴露对鲫鱼肝脏谷胱甘肽(GSH)和激素代谢关键酶[谷胱甘肽硫转移酶(GST)和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UDPGT)]活性的影响进行评价。结果表明,甲草胺及阿特拉津对上述各个酶系产生一定的干扰,呈现非单调剂量效应关系。GST和UDPGT活性及GSH含量对甲草胺、阿特拉津暴露均较敏感,这些指标从分子水平上反映了污染物对鱼体肝细胞的损伤,影响鲫鱼体内血清激素的平衡,造成内分泌系统的干扰危害,引起一系列的生理生化反应。 3、采用放射免疫技术,研究低剂量甲草胺和阿特拉津暴露对鲫鱼性激素[17β-雌二醇(E2)、睾酮(T)]及甲状腺激素[促甲状腺激素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)]的影响。结果表明,甲草胺可使鲫鱼体内的血清激素E2、TSH和T3水平上升,而T的水平下降。阿特拉津可使E2和T3水平上升,而对T及TSH没有显著影响。研究显示,鲫鱼体内血清性激素E2/T的比值是一种可以有效地指示污染水体中这两种农药类环境激素对鱼类的内分泌干扰毒性的生物标志物。 4、鲫鱼UDPGT作为E2激素代谢关键酶,在UDPGT受明显抑制的情况下,无法代谢体内产生的E2,使得E2得以在体内累积,表现为明显负相关的趋势。并且GST在调节甲状腺激素水平的过程中起重要作用,随着甲草胺及阿特拉津的染毒浓度增加GST酶活力下降而T3水平则持续上升。鲫鱼肝脏激素代谢关键酶的活性的改变,可影响鲫鱼体内激素的水平,表明内分泌干扰效应的机制。 5、研究建立测定鲫鱼卵黄蛋白原的间接竞争ELISA方法。结果表明,鲫鱼VTG为二个150、160kda的同源二聚体。低剂量的甲草胺和阿特拉津都能够诱导雄性鲫鱼体内产生卵黄蛋白原(VTG)。经低剂量甲草胺染毒后,鲫鱼体内VTG总体呈现为倒“U”型。而经阿特拉津诱导的鲫鱼体内的VTG呈现为不规则的波动,无明显剂量效应关系,对于鲫鱼而言,阿特拉津表现出内分泌干扰活性弱于甲草胺。并且雄鱼体内的VTG积累到一定程度以后,能导致肝、肾等各种组织病变。 6、提取鲫鱼血液总DNA,通过RAPD试验筛选出合适的引物,结果表明,低剂量甲草胺和阿特拉津暴露对鲫鱼DNA有损伤作用,可引起鲫鱼DNA序列发生变化,使DNA片断缺失或增加,并且基因多态性增加,存在一定的至突变性,呈非单调剂量-效应关系。 7、从鲫鱼血液中分离淋巴细胞体外培养,采用噻唑蓝(MTT)比色法开展对淋巴细胞生长活性的影响实验,结果表明,两种环境激素对淋巴细胞活性的抑制作用存在较明显的剂量-效应关系,甲草胺和阿特拉津对淋巴细胞的半数抑制浓度分别为27.7±7.6μg/L和97.6±26.4μg/L。两种环境激素对鲫鱼淋巴细胞增殖的影响实验结果表明,甲草胺在浓度达到7μg/L时就对淋巴细胞增殖产生明显的抑制作用,而阿特拉津则在浓度达到50μg/L时才对淋巴细胞增殖产生抑制作用。 8、从鲫鱼头肾中分离纯化得到巨噬细胞,体外培养,用甲草胺和阿特拉津染毒。结果表明,甲草胺和阿特拉津对巨噬细胞的半数抑制浓度分别为68.2±7.1μg/L和153.9±23.5μg/L。甲草胺和阿特拉津对鲫鱼巨噬细胞产生超氧阴离子(O2-)活性的影响实验结果表明,两种环境激素均可抑制巨噬细胞产生超氧阴离子(O2-)活性,呈非单调剂量-效应关系。 9、甲草胺和阿特拉津对细胞酶活的影响实验结果表明,两种环境激素对淋巴细胞的乳酸脱氢酶(LDH)酶活和巨噬细胞的LDH与酸性磷酸酶(ACP)酶活的抑制作用表现出明显的剂量-效应关系。由此可推测,甲草胺和阿特拉津对细胞酶活的抑制效应可能是其对鲫鱼淋巴细胞和巨噬细胞活性功能产生影响的主要原因。 10、通过活体染毒试验,采集血液样本,进行淋巴细胞增殖实验及血液白细胞计数。结果表明,低剂量甲草胺和阿特拉津染毒组的淋巴细胞增殖水平与对照组相比均有不同程度的下降,血液白细胞数与对照组相比也均有明显下降。无论是体外染毒还是低剂量活体暴露实验均表明,当甲草胺和阿特拉津达到一定浓度后,对鲫鱼淋巴细胞和巨噬细胞的活性功能均表现出抑制作用,表明这两种环境激素对鲫鱼存在潜在的免疫毒性。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 孙春岐;环境激素的研究进展[J];承德民族师专学报;2003年02期
2 汪丰云;环境激素化学[J];化学世界;2000年05期
3 ;环境激素威胁人体健康[J];黑龙江环境通报;2000年04期
4 ;环境激素威胁人体健康[J];陕西环境;2001年02期
5 刘苹;环境激素与人类健康[J];云南环境科学;2001年S1期
6 王勇,万涛,曾黎明;环境激素与FRP废弃物处理[J];广东建材;2001年05期
7 张美英;环境激素与生殖健康[J];西北人口;2002年02期
8 江田汉,杨晓明,赖玉平;环境激素问题浅析[J];环境保护;2000年05期
9 江田汉,杨晓明,赖玉平;环境激素问题浅析[J];中国环境管理;2001年01期
10 周少奇,林云琴;环境激素污染研究进展[J];环境污染与防治;2004年01期
11 倪合一;环境激素威胁人类繁衍[J];中国保健营养;1999年03期
12 王云采 ,贲越;环境激素,人类生殖健康的杀手[J];生活与健康;2004年04期
13 范士忠;;警惕“环境激素”危害健康[J];民防苑;2008年02期
14 刘建华;;抵御环境激素的侵害[J];环境;1999年07期
15 赵君;;“环境激素”的日常防护[J];健身科学;2002年05期
16 高晋华,张秋华;环境激素与环境风险评估[J];科技情报开发与经济;2004年02期
17 冯碧,邵健忠;环境激素对动物生存的威胁[J];四川动物;2002年01期
18 兰政文;小心环境激素它比癌症更可怕[J];中华养生保健;2002年07期
19 李克;;大自然的“新妖孽”:环境激素[J];语文新圃;2007年12期
20 顾娟红;;无处不在的环境激素[J];中国检验检疫;2008年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 黄龙全;张剑韵;;环境激素对人类健康的影响及其控制[A];食品安全的理论与实践——安徽食品安全博士科技论坛论文集[C];2005年
2 曹兴午;;环境激素与人类健康[A];首届全国生殖医学论坛暨生殖相关疾病诊疗技术学术研讨会论文集[C];2007年
3 包国章;;环境激素的污染途径及对野生动物种群及人类的影响[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(下册)[C];2001年
4 宋宏宇;王捷;;环境激素对生殖系统的影响[A];中国药理学会第八届全国药物毒理学术讨论会论文摘要集[C];2001年
5 徐勇;杨鲁静;;环境激素对儿童生长发育及健康的影响[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年
6 佘锐萍;田纪景;;环境激素——人类健康的隐形杀手[A];农产品质量安全与现代农业发展专家论坛论文集[C];2011年
7 李季;邵晓龙;许艇;王文珺;高宏斌;生威;;免疫分析技术在环境激素检测中的应用[A];持久性有机污染物论坛2006暨第一届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集[C];2006年
8 徐靖;周明华;田家华;胡扬根;郑爱华;;多氯酚类环境激素的光电催化降解[A];中国化学会第27届学术年会第02分会场摘要集[C];2010年
9 王佳平;赵一先;丁雷;景盛翱;耿志明;盛兆琪;牛晓军;;超声波降解邻苯二甲酸二乙酯的研究[A];上海市化学化工学会2007年度学术年会论文摘要集[C];2007年
10 王晓娟;;环境激素邻苯二甲酸二丁酯对拟南芥试管形态建成的干扰[A];全面建设小康社会——中国科协二○○三年学术年会农林水论文精选[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 伊雄海;农药类环境激素低剂量暴露对鲫鱼内分泌干扰效应及生物标志物研究[D];上海交通大学;2008年
2 黄荣新;酞酸酯类激素在污水厂的迁移及GAC吸附与生物降解研究[D];哈尔滨工业大学;2007年
3 邵晓玲;城市水循环中环境激素的变化规律与KMnO_4控制效能研究[D];哈尔滨工业大学;2009年
4 樊静;环境激素类污染物若干分析新方法研究[D];中国科学院研究生院(广州地球化学研究所);2007年
5 毛缜;环境激素壬基酚对小鼠神经毒性作用及其分子生物学机制研究[D];中国矿业大学;2008年
6 张明翠;邻苯二甲酸酯类环境激素的荧光免疫分析研究及应用[D];东华大学;2006年
7 赵宝秀;TiO_2/Ti与Fe双阳极光电催化氧化降解2,4-二氯苯酚的研究[D];哈尔滨工业大学;2007年
8 余宇燕;环境中微量氯苯酚类环境激素的免疫分析方法研究[D];东华大学;2006年
9 冯屹;同时检测多种环境激素污染物的液相免疫芯片技术研究[D];华中农业大学;2010年
10 曾红燕;环境雌激素的色谱测定方法研究[D];四川大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨飞;水上介质阻挡放电等离子对典型环境激素降解的研究[D];广西大学;2011年
2 冯碧;三种环境激素对鱼类免疫细胞活性与功能的影响[D];浙江大学;2003年
3 林兴桃;北京地区水中邻苯二甲酸酯类环境激素的研究[D];北京工业大学;2003年
4 房丽萍;邻苯二甲酸酯类环境激素分析方法及迁移规律研究[D];中国海洋大学;2004年
5 焦琳;渭河流域水体中外源性环境激素的污染调查及分析[D];西安科技大学;2010年
6 薛梅;渭河流域(西安段)湿地水体环境激素污染及其防治的研究[D];西安建筑科技大学;2003年
7 戴璇颖;环境激素阿特拉津的家蚕毒理研究[D];苏州大学;2005年
8 鲍园;大气中环境激素氧化降解机理的理论研究[D];山东大学;2011年
9 祁明亮;酞酸酯类环境激素的生物标志物研究[D];东华大学;2012年
10 符宇;生物膜反应器对邻笨二甲酸二丁酯的生物降解试验研究[D];湖南大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 李剑;环境激素防不胜防[N];中国妇女报;2003年
2 李树泉;环境激素对人类的危害[N];河北日报;2003年
3 杨俊杰 陈军 韩波;环境激素成为生物杀手[N];健康报;2004年
4 李剑;警惕环境激素的危害[N];人民日报海外版;2003年
5 李剑;环境激素的危害防不胜防[N];市场报;2002年
6 中国疾病预防控制中心环境所 蔡诗文 刘迎春;环境激素对健康威胁究竟有多大[N];健康报;2009年
7 本报记者 韩璐;环境激素:健康危害知多少[N];健康报;2009年
8 实习生 陈高翔 本报记者 李禾;缺乏界定标准 “环境激素”肆虐[N];科技日报;2010年
9 朱晓颖;相关部门就长江江鱼含“环境激素”展开评估[N];中国食品质量报;2010年
10 张天华;环境激素危害大[N];大众卫生报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978