收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

一种新型的NADH荧光探针

金晶  
【摘要】:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)及其还原型(NADH)是生物体中广泛存在的辅酶。由于NADH在代谢和信号转导中的中心作用及其在疾病诊疗中的重要性,对组织与细胞内NADH的分布及动态变化进行生物成像将为相关研究提供重要的信息。但长期以来应用的NADH自发荧光成像的方法由于无法区分NADH与NADPH这两种不同的功能分子而存在重大缺陷,严重制约了相关研究的发展。本论文基于分子结构理性设计与蛋白质工程方法,利用对NADH特异性响应的ydiH蛋白与黄色荧光蛋白融合,构建了在NADH结合后荧光性质发生改变的荧光蛋白探针Perex。通过理性设计与定点突变的方法对Perex探针进行了改造与筛选,以提高Perex探针的对NADH的响应并降低其核苷酸的非特异性结合,最终得到了两个在不同浓度范围内灵敏、特异性响应NADH的Perex探针。本论文详细研究了物理及化学环境,pH、温度、以及其它吡啶核苷酸盐及类似物,对Perex系列探针的荧光性质,对探针的影响.。细胞生物学实验显示,该系列探针能在活细胞内表达并定位于亚细胞结构,指示生理浓度的NADH变化。本论文研究所得到的Perex探针将可用于建立监测NADH在活体、组织、细胞甚至亚细胞结构中分布的高时空分辨成像技术,可为对细胞生物学、生理学等生命科学基础研究及生物工程、代谢工程等应用基础领域提供有力研究工具。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前19条
1 Dongqing Ji;Zi Ying;Yuan Zhang;Wei Chen;Metini Janyasupab;Xinghua Gao;Lingyan Feng;Weijia Wen;;RhIr@MoS_2 nanohybrids based disposable microsensor for the point-of-care testing of NADH in real human serum[J];Chinese Chemical Letters;2020年08期
2 刘永生;张一;;有氧呼吸产生的[H]都是NADH吗[J];中学生物教学;2016年19期
3 ;Study of Differential Expression of COP9,JAK2,HSPs and NADH Genes in Taxol-Resistant Ovarian Carcinoma Tissues[J];Chinese Journal of Clinical Oncology;2008年05期
4 黄志华;刘铭;王宝光;张延平;曹竹安;;甲酸脱氢酶用于辅酶NADH再生的研究进展[J];过程工程学报;2006年06期
5 李小波,岑英华,孙国萍;2-萘酸加单氧酶基因及NADH:黄素还原酶基因的克隆与分析[J];微生物学报;2005年04期
6 ;Effect of Repetitive Bleeding on NADH-Cytochrome b_5 Methemoglobin Reductase Activity and Molybdenum Content in Erythrocytes of Rats[J];Biomedical and Environmental Sciences;1996年04期
7 张梦婕;曹思敏;王梦雨;李昊阳;李栋;赵泽楠;徐建华;;铝离子对辅酶NADH分子荧光增强和构象变化的影响[J];光谱学与光谱分析;2021年04期
8 沈莹;左成学;吴敏;王星果;张营;徐建荣;顾志良;;赤眼鳟线粒体NADH脱氢酶6基因克隆及序列特征分析[J];安徽农业科学;2010年01期
9 郑琦;曹启花;蔡汝秀;;催化荧光法研究辅酶NADH的抗氧化性能[J];武汉大学学报(理学版);2006年02期
10 钟文英,张剑荣,张祖训;线性变位极谱法研究(Ⅹ)——玻碳电极上NADH的氧化[J];高等学校化学学报;1989年10期
11 张玉林;张缙鸾;周玉英;吾甫尔;;遗传性高铁血红蛋白血症(NADH高铁血红蛋白还原酶缺乏)[J];新疆医学院学报;1987年02期
12 王梦雨;曹思敏;李昊阳;张梦婕;李栋;赵泽楠;徐建华;;辅酶NADH与色氨酸共振能量转移的荧光动力学研究[J];高等学校化学学报;2020年11期
13 ;A soluble polymer-supported NADH model:Synthesis and application[J];Chinese Science Bulletin;2010年25期
14 欧阳克蕙;瞿明仁;黎观红;;瘤胃酸中毒与NADH辅因子的营养调控[J];饲料工业;2010年21期
15 吴玲燕;王玉俭;温玉玲;严若峰;徐立新;宋小凯;李祥瑞;;捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白基因的克隆表达及功能分析[J];畜牧兽医学报;2017年04期
16 秦义;董志姚;刘立明;陈坚;;工业微生物中NADH的代谢调控[J];生物工程学报;2009年02期
17 梅册霞;王静雪;林洪;王晶;;细菌荧光素酶体外发光体系的建立及应用于NADH定量检测[J];微生物学报;2009年09期
18 ;Cell Toxicity Effect of Cadmium on Yeast Cells by Detecting NADH Autofluorescence[J];Wuhan University Journal of Natural Sciences;2007年02期
19 温居一,张积仁;多级超滤及亲和超滤法分离纯化NADH工艺的研究[J];药物生物技术;2005年05期
中国重要会议论文全文数据库 前20条
1 王晓东;Joseph Burnett;李健玮;Wilm Jones;Tony Saba;;辅酶NADH催化再生:转化率与选择性的重要意义[A];中国化学会第三届菁青论坛摘要手册[C];2020年
2 刘方园;徐鲁艺;王生杰;;N掺杂TiO_2的制备及光催化NADH的再生[A];中国化学会第二届全国光功能材料青年学者研讨会摘要集[C];2020年
3 刘恩丽;张晓丽;;脉冲恒电位电还原氧化石墨烯修饰电极上NADH的电催化氧化[A];第十三届全国电分析化学学术会议会议论文摘要集[C];2017年
4 Li-Jun Zhao;Ruo-Can Qian;Wei Ma;He Tian;Yi-Tao Long;;The Electrocatalytic Research of Catechol for NADH Oxidation by Single Nanoparticle Collision at Ultramicroelectrodes[A];中国化学会第30届学术年会摘要集-第三分会:纳米传感新原理新方法[C];2016年
5 ;The Roles of CtBPl,an NADH-dependent transcriptional co-repressor,in Carcinogenesis[A];中华医学会第十八次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2012年
6 Tian,Changlin;;FAD-Ubiquinone Mediated Electron Transfer in Yeast NADH-Ubiquinone Oxidoreductase Revealed using Electron Spin Resonance[A];第八届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2013年
7 朱疇蓉;伍欽荣;;甘油醛-3-磷酸脫氫酶-NADH絡合物熒光的熄灭作用[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
8 唐琳;曾伯平;王文彬;罗玉双;张建平;杨春英;;两种淡水鱼类胃瘤线虫NADH脱氢酶亚基Ⅰ的克隆与鉴定[A];2013年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2013年
9 赵玉政;金晶;呼庆勋;周海梦;易静;于振行;徐磊;王雪;杨弋;Joseph Loscalzo;;基因编码的高时空分辨NADH探针[A];第十届全国酶学学术讨论会论文集[C];2011年
10 Wen-Jun Niu;Rong-Hui Zhu;Sheng-Yuan Deng;Dan Shan;;Simple synthesis of nitrogen-doped carbon dots with selectivity and sensitivity in the detection of NADH[A];全国石墨烯材料技术发展与应用交流研讨会论文集[C];2015年
11 傅博;白雪源;;NAD+/NADH调控大鼠原代肾小球系膜细胞衰老的机制研究[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编[C];2018年
12 陈培勳;伍欽荣;鄒承魯;;L-谷氨酸脫氫酶 Ⅰ.谷氨酸脫氫酶-NADH絡合物熒光光譜的研究[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
13 涂新满;谢青季;杨琴;张友玉;姚守拙;;芳香胺邻醌聚合物/碳纳米管复合物用于高灵敏电催化检测NADH[A];第四届海峡两岸分析化学学术会议论文集[C];2006年
14 赵嘉;王乃兴;汪武卫;王桂霞;唐石;;新的手性三环系列NADH模型化合物的合成[A];中国化学会第二十五届学术年会论文摘要集(上册)[C];2006年
15 侯关伟;贾丽萍;霍瑞伟;姚飞;李娟;王怀生;;NADH在PDDA功能化石墨烯修饰电极上的电催化氧化及测定[A];中国化学会第十七届全国有机分析与生物分析学术研讨会论文集[C];2013年
16 林锡煌;方柏山;;短乳杆菌产NADH氧化酶的发酵条件优化[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年
17 吴言;郝雅荞;沈琦;刘鑫;潘镜宇;钱玙呈;韩雨轩;赵洪新;;敲除NADH脱氢酶、表达小RNA ryhB和nadE全面调节产气肠杆菌(E.aerogenes)厌氧代谢提高氢气产量[A];2017年浙江省微生物学会青年论坛——微生物与健康专题研讨会会议资料[C];2017年
18 ;Recent Progress of NAD~+ Metabolism[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
19 白震媛;许恒斌;庞海军;马慧媛;;磷钼钒多酸修饰电极的制备及其在NADH检测中的应用[A];第十四届固态化学与无机合成学术会议论文摘要集[C];2016年
20 杨金东;李秀涛;童遥;朱晓晴;;NADH辅酶氧化热力学动力学和真实机理[A];中国化学会第28届学术年会第6分会场摘要集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前20条
1 王梦;1,3-丙二醇生物合成系统的多模块构建与调控[D];北京化工大学;2018年
2 谢文权;NADH对放射性肠炎的保护作用及其机制研究[D];南方医科大学;2018年
3 常孟方;蛋白质的时间分辨荧光动力学及其在NADH/NAD~+比率定量测量中的应用[D];华东师范大学;2017年
4 徐小平;辅酶NADH对缺血再灌注介导肝细胞凋亡的保护机制[D];第四军医大学;2002年
5 刘珊珊;甘油3-磷酸的生物合成拮抗NADH还原应激从而缓解线粒体疾病[D];北京协和医学院;2021年
6 刘发全;还原型辅酶NADH抗辐射损伤的实验研究[D];第一军医大学;2002年
7 伍一洲;类囊体启发光驱动NADH再生系统构建及性能强化[D];天津大学;2020年
8 曹思敏;生物辅酶NADH的超快荧光动力学研究[D];华东师范大学;2021年
9 施露露;氧化葡萄糖酸杆菌中NADH脱氢酶Ⅱ的酶学性质及其功能研究[D];华东理工大学;2016年
10 秦义;光滑球拟酵母发酵生产丙酮酸中NADH的生理功能解析[D];江南大学;2011年
11 徐萌;辅酶NADH对化疗药物介导凋亡损伤的细胞保护机制[D];第一军医大学;2001年
12 温居一;还原型辅酶NADH抗突变作用分子机制的实验研究[D];第一军医大学;2005年
13 周新丰;有机硼化物合成及辅酶NADH模型物的光反应研究[D];合肥工业大学;2017年
14 张翀;产气肠杆菌荧光定量追踪及其NADH产氢途径机理研究[D];清华大学;2007年
15 李文斐;Ⅱ型NADH脱氢酶NDH2的结构与功能研究[D];清华大学;2015年
16 唐文花;猪5个NADH相关基因和SMTN基因的分离、定位、时空表达和关联分析[D];华中农业大学;2007年
17 许华建;辅酶NADH模型物反应机理的研究及其在有机合成中的应用[D];中国科学技术大学;2007年
18 钟本富;G6PD蛋白协调肿瘤细胞内NADH和能量稳态的相关研究[D];天津医科大学;2020年
19 谢昆;手性亚砜类辅酶NADH模型化合物的合成与反应研究[D];中国科学技术大学;2007年
20 张琳;辅酶NADH对阿尔茨海默病细胞模型作用机制研究[D];吉林大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 金晶;一种新型的NADH荧光探针[D];华东理工大学;2011年
2 刘晓雨;NADH调控神经突触可塑性基因表达的分子机制[D];山东大学;2020年
3 张凯琴;乙醇对大鼠H4-ⅡE细胞NAD~+、NADH、一氧化氮变化及线粒体功能的影响[D];延边大学;2019年
4 商望松;NADH穿梭抑制剂AOAA在小胶质细胞活化中的作用与机制研究[D];上海交通大学;2016年
5 金营营;基于硫氧还蛋白系统的遗传编码NADH荧光探针的构建[D];华中科技大学;2019年
6 曹威;NAD~+依赖酶CD38和NAD在氧化损伤和抗氧化中的研究[D];上海交通大学;2016年
7 李宗霖;创新型NADH电化学传感器设计[D];上海交通大学;2017年
8 张洁;用于检测NADH的荧光探针:设计、合成与应用[D];郑州大学;2019年
9 刘天龙;异丙醇脱氢酶固定化工艺研究[D];浙江大学;2018年
10 王青青;三种鸟类转录组测序与NADH家族的进化研究[D];安徽师范大学;2018年
11 赵跃辉;NADH荧光探针的设计合成及分析应用[D];山东师范大学;2018年
12 邹红建;利用g-C_3N_4基纳米复合材料光催化还原辅酶NADH再生[D];天津大学;2017年
13 李艳琴;肼致心肌成纤维细胞凋亡机制及NADH防治作用的研究[D];武汉大学;2005年
14 董凯鑫;一种基于罗丹明类染料荧光分子探针的合成及其在NADH检测方面的应用[D];天津理工大学;2016年
15 张梦婕;金属离子对辅酶NADH分子荧光动力学的影响[D];华东师范大学;2021年
16 李小波;2-萘酸加单氧酶基因及NADH:黄素还原酶基因的克隆与分析[D];中国科学院研究生院(武汉病毒研究所);2005年
17 孙青青;两种NADH电化学检测方法的研究[D];西北大学;2017年
18 花尔辉;NADH及脱氢酶型电化学生物传感器的制备方法研究[D];重庆医科大学;2013年
19 裴晗;玻璃体腔注射重组腺相关病毒—人NADH脱氢酶4亚基的实验研究[D];华中科技大学;2013年
20 董志姚;光滑球拟酵母中NADH代谢对其酵解途径的影响[D];江南大学;2008年
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 生命学院;杨茂君研究组在《自然》发表论文[N];新清华;2012年
2 通讯员 姚燕燕 记者 胡德荣;我国学者开发独特荧光探针[N];健康报;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978