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HPLC-CL联用技术在食品添加剂检测中的应用

袁奕沁  
【摘要】:本课题将高灵敏度的化学发光检测技术与高效能、高分辨力的高效液相色谱以适当的方式相结合,集两种技术之优点于一体,建立了以下常见食品添加剂的检测方法。 本文详细考察了化学发光反应及色谱分离分析的最佳条件。通过单因素分析,讨论了化学发光试剂,氧化剂等的用量对化学发光反应效果的影响,优化了最佳化学发光反应条件;通过对流动相、流速、柱温及检测波长的研究,优化了最佳色谱分离分析条件。 在最佳化学发光和色谱条件下,建立了香兰素、苏丹红Ⅰ、维生素C和过氧化苯甲酰的HPLC-CL测定法,考察了所建方法的线性范围、精密度、检出限和准确度,并将所建方法用于食品中相应分析,研究了所建方法的可行性。同时考察了所建方法用于实际样品测试的重现性。 对于香兰素,在碱性条件下,香兰素能增强光泽精-过氧化氢-氢氧化钠体系的化学发光强度,基于此建立了高效液相色谱和化学发光联用测定香兰素的方法,并成功应用于食品中香兰素的测定。所建香兰素分析方法的线性范围为1.0~20.0μg·mL-1,回归方程为I=8.539+2.953×106 C,相关系数R=0.9921,精密度为1.97%(c=80μg·mL-1,n=6),检出限为3ng·mL-1,加标回收率为98.2-103.3%。 对于苏丹红Ⅰ,在碱性条件下,苏丹红Ⅰ对鲁米诺一高碘酸钾体系有增敏作用。根据这一现象,建立了高效液相色谱和化学发光联用测定苏丹红Ⅰ的分析方法。在最优化学发光和色谱条件下检测。所建苏丹红Ⅰ分析方法的线性范围为0.001~0.50μg·mL-1,回归方程为I=8.393×103C+224.5,相关系数R=0.9996,精密度为1.45%(c=0.01μg·mL-1,n=6),检出限为5ng·kg-1,加标回收率为95.0-104.0%。 对于维生素C,由于维生素C与重铬酸钾的还原反应产生铬(Ⅲ)能强烈催化鲁米诺的化学发光,基于此建立了食品中维生素C的检测方法。在最优化的化学发光条件和色谱条件下,所建维生素C分析方法的线性范围为0.01~10.0μg·mL-1,回归方程为I=2.383×103C+393.6,相关系数R=0.9979,精密度为1.57% (c=6.0μg·mL-1,n=6),检出限为0.5ng·mL-1,加标回收率为94.6-102.0% 对于过氧化苯甲酰,发现过氧化苯甲酰能增强高锰酸钾-鲁米诺化学发光体系的化学发光。根据这一现象,建立了高效液相色谱和化学发光联用测定过氧化苯甲酰的新方法。该线性范围为1.0~100.0μg·mL-1,回归方程为1=1.0427×104C+51.28,相关系数R=0.9971,精密度为2.1%(c=10.0μg·mL-1, n=6),检出限为0.2mg·g-1,加标回收率为97.5-99.2%。


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