收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

褐藻胶降解菌株的筛选、鉴定及其产酶活性研究

刘海超  
【摘要】:褐藻是我国主要的水产经济藻类。褐藻类细胞壁中含有大量褐藻多糖成分即褐藻胶,因其天然理化性质已被应用于众多领域。褐藻胶寡糖是褐藻胶水解后的产生的聚合度为20 DP以下的寡糖产物,具有抗菌、抗炎、抗衰老、促进生长等生物活性,已在食品、药品、日化等领域发挥重要作用。褐藻胶主要由化学、物理和生物法降解,其中生物降解法相比于前两种方法具有降解反应过程可控、天然产物活性高、对环境友好等优点,但目前市场上还没有可降解褐藻胶的专门发酵工程菌及褐藻胶裂解酶。主要原因是所筛选大部分可发酵降解褐藻胶的菌株多数存在产酶量低,酶活力不稳定,易失活等问题,还达不到工业生产要求。因此开发具有高酶活力褐藻胶降解菌株一直是重点研究方向,对于海洋资源的高值化利用具有重要意义。论文主要工作如下:(1)分别在仿刺参肠道、口虾蛄肠道、栉孔扇贝内脏、九孔鲍内脏和虾酱中取样,以海藻酸钠作为单一碳源配制培养基,以透明圈法定性初筛,DNS法复筛,从海洋生物中筛选得到一株高酶活性褐藻胶降解菌株B12,采用16S r DNA序列分析、生理生化实验、电镜观察,确定该菌为弧菌(Vibrio sp.)属。通过单因素试验及响应面优化试验对影响菌株生长和产酶条件的5个因素:发酵初始p H值、发酵温度、Na Cl质量浓度、接种量和装液量进行优化。获得了该菌株最优产酶条件为:p H6.52,28.20℃,Na Cl质量浓度为2.01%,接种量为2.10%,装液量为59.50 m L。在最优产酶条件下,B12菌株产酶活力可高达91.68 U/m L,相比于优化前提高了38.50%。菌株开始产酶时间提前了6 h,且于4℃冷藏保存酶活力稳定性较好。(2)对仿刺参进行实验室驯化培养、诱导仿刺参肠道菌群,采用海藻酸钠为唯一碳源配制培养基,利用透明圈法进行初筛,DNS法和紫外法复筛,从已驯化仿刺参肠道中筛选得到四株高酶活性褐藻胶降解菌株S1、S2、S10和S11,经16S r DNA序列分析、电镜观察,确定四株菌分别为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、微杆菌属(Microbacterium sp.)、弧菌属(Vibrio sp.)和微小杆菌属(Exiguobacterium sp.)。对该四株菌分别进行混合培养,获得S2与S11最佳配比组合,通过高通量微生物多样性检测分析混合菌株生长过程中菌群丰度的动态变化,并通过单因素试验及响应面优化试验对影响混合菌株产酶条件的4个因素:发酵初始p H值、Na Cl质量浓度、装液量和菌株混合培养温度进行优化。获得混合菌株发酵降解褐藻胶最优产酶条件为:混合发酵培养基初始p H为8.02,Na Cl质量浓度为40.71 g/L,装液量为79.73 m L,培养温度为27.96℃。在最优发酵条件下,混合菌株酶活力可达94.78 U/mL,相比于优化前提高了43.90%。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前13条
1 栾明鉴;何熹;林荣芳;姚艳艳;赵祥忠;;褐藻胶裂解酶研究进展[J];食品工业;2021年08期
2 魏丹;窦文芳;李恒;李会;许正宏;史劲松;;高效降解褐藻胶新菌种的筛选、鉴定及产酶条件优化[J];食品与发酵工业;2012年07期
3 刘海超;张健;刘芳;王共明;王艺欣;赵云苹;钟静诗;;1株褐藻胶降解菌的筛选、鉴定及产酶条件优化[J];微生物学杂志;2021年04期
4 黎艳;张兆峰;田苗;张云开;陈桂光;梁智群;;海洋纤溶酶高产菌株的选育及产酶条件优化[J];中国酿造;2012年02期
5 刘唤明;梁运祥;吴健;;木聚糖酶高产菌株的选育及其产酶条件的研究[J];中国酿造;2008年18期
6 帅玉英;张涛;江波;沐万孟;;γ-谷氨酰转肽酶高产菌株的筛选、鉴定及其产酶条件优化[J];食品与发酵工业;2010年03期
7 陈和秀;龙敏南;徐方成;邬小兵;徐惠娟;刘清锋;胡忠;;木聚糖酶生产菌株的筛选及产酶条件的优化[J];中国生物工程杂志;2007年11期
8 赵更峰,王兰,顿玉慧,马晓航;产肌酐水解酶菌株的分离、鉴定及产酶条件研究[J];河南师范大学学报(自然科学版);2005年01期
9 谭海刚;李静;;几丁质酶菌株L_(012)的产酶条件研究[J];粮油食品科技;2013年04期
10 周宜君;何文婕;符沙欧;田君端;马亭亭;戴景峰;;土壤中产碱性蛋白酶菌株的筛选及产酶条件的研究[J];安徽农业科学;2011年31期
11 俞晓霞;沈燕霞;张玲龙;钱坤;采克俊;;一株产淀粉酶的克雷伯氏菌株的分离鉴定及其产酶条件优化[J];湖州师范学院学报;2010年02期
12 张荣奎;贺淹才;刘爱花;魏巍;李红然;;土壤产几丁质酶菌株的筛选鉴定及产酶条件[J];华侨大学学报(自然科学版);2007年02期
13 张铁涛;徐云升;;纤维素酶高产菌株的产酶条件优化[J];中国调味品;2016年06期
中国重要会议论文全文数据库 前20条
1 张毅民;吕学斌;但汉斌;王虹;孙亚凯;;纤维素分解菌株的优化组合及其产酶条件研究[A];第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C];2004年
2 曹礼;郭图丽;周宏鑫;刘月桃;陈杰;李婷;雷玉明;;两株耐锰菌株的分离鉴定及其生长特性研究[A];环境工程2017增刊2[C];2017年
3 李勤;黄建安;李娟;张玥;刘仲华;;γ-谷氨酰转肽酶基因工程菌的构建及其产酶条件的初步研究[A];第六届海峡两岸茶业学术研讨会论文集(摘要)[C];2010年
4 佘小漫;何自福;李华平;虞皓;;广东茄科雷尔氏菌菌株生化变种的测定[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
5 吴晓玉;王园秀;黄俊宝;;系列诱变筛选冠菌素高产菌株[A];2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
6 张毅民;孙亚凯;吕学斌;王虹;但汉斌;;解磷菌株的筛选、复配及培养条件的研究[A];第九届全国化学工艺学术年会论文集[C];2005年
7 邓爱华;王宁;孙磊;马相汝;艾尔肯·热合曼;;一株耐高温耐盐碱菌株Bacillus clausii XJU-5的分离鉴定及其分泌的碱性蛋白酶性质的初步研究[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
8 邹颖颖;杨桥;罗雪松;周国玲;张磊;唐雅丽;李红;张珞珍;辛晓红;方呈祥;;新疆分离菌株的提取物对入噬菌体紫外诱导的抑制作用[A];湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集[C];2006年
9 张茹萍;郑洪波;贾春燕;贾玉;郑翠梅;张广民;;放线菌菌株97的鉴定及抑菌活性的研究[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
10 许谦;冯明光;徐均焕;刘志强;;安徽虫瘟霉菌株的强毒杀蚜效应与侵染速率[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
11 李德茂;李从发;刘四新;陈利梅;;生物还原苯丙酮酸制备手性3-苯基乳酸——菌株筛选与产酶条件研究[A];廿一世纪微生物学发展前沿与应用新技术研讨会论文摘要集[C];2003年
12 胡永娟;张紧紧;韩宗梁;马守田;邵云;;农田土壤中抗铬菌株的筛选鉴定及其生物学特性和吸附特性的研究[A];中国作物学会2013年学术年会论文摘要集[C];2013年
13 林杰;黄轮;陈菲;程碧英;陈金鹏;;银耳增白菌株——“9901”号的选育[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
14 沈美;郑裕国;沈寅初;;丙烯腈水解酶菌株的筛选及产酶条件优化[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
15 周洁;王波;谭伟;苗人云;叶小金;甘炳成;黄忠乾;彭卫红;;应用两种颉颃方法快速鉴别35株毛木耳菌株[A];第十届全国食用菌学术研讨会论文汇编[C];2014年
16 邱立友;汪世山;余功德;吴云汉;;几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件的研究[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
17 王松华;田亚平;;产酸性脲酶菌株的筛选、鉴定及其脲酶的应用初探[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
18 郑焕春;颜丽君;;白灵菇菌株选优研究报告[A];第二届全国食用菌中青年专家学术交流会论文集[C];2008年
19 夏秋瑜;刘四新;李从发;郭利芳;;几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件的研究[A];2005热带亚热带微生物资源的遗传多样性与基因发掘利用研讨会论文集[C];2005年
20 刘波;蓝江林;朱育菁;林抗美;车建美;郑雪芳;肖荣凤;周先治;葛慈斌;林营志;苏明星;史怀;刘芸;马丽娜;;青枯雷尔氏菌种下分化及其病害检测分子探针的研究与应用[A];第四届中国植物细菌病害学术研讨会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前20条
1 欧昌荣;褐藻胶寡糖的制备、分析及其应用研究[D];中国海洋大学;2003年
2 马丽艳;海洋细菌褐藻胶裂解酶在大肠杆菌中表达,加工与转运及重组酶的纯化与性质研究[D];中国海洋大学;2007年
3 周燕霞;褐藻胶裂解酶分泌菌株的分离鉴定及Tamlana holothuriorum s12~T中褐藻胶裂解酶的研究[D];山东大学;2016年
4 王林娜;海洋细菌Shewanella sp.Kz7的寡褐藻胶裂解酶研究[D];中国海洋大学;2014年
5 胡婷;系列褐藻胶寡糖的制备及其抗氧化相关生物学活性(拮抗酒精性肝损伤及防治帕金森症)研究[D];中国海洋大学;2014年
6 朱镭;苏云金芽胞杆菌高毒力菌株的比较基因组研究[D];华中农业大学;2015年
7 李昂;菌株Dyella ginsengisoli LA-4降解联苯及基因的克隆与表达[D];大连理工大学;2009年
8 李丽妍;褐藻胶裂解酶系的酶化学、产物分析及应用研究[D];中国海洋大学;2011年
9 葛含静;细菌纤维素高产菌株高压诱变选育及其机理研究[D];西北农林科技大学;2012年
10 刘焕民;L-缬氨酸高产菌株的选育及其特性的初步研究[D];江南大学;2011年
11 孙洁;乳酸菌发酵剂菌株的自溶特性及机理研究[D];中国农业科学院;2010年
12 夏永振;代谢工程技术构建产均聚物聚3-巯基丙酯的Advenella mimigardefordensis菌株[D];山东大学;2012年
13 王启业;基于木质纤维产丁醇高产菌株选育及关键酶基因表达分析[D];中南林业科技大学;2017年
14 孙纪全;除草剂异丙隆降解菌株的筛选鉴定及降解特性和应用研究[D];南京农业大学;2008年
15 韩峰;海洋弧菌QY103褐藻胶裂解酶的研究[D];中国海洋大学;2008年
16 赵志军;L-色氨酸生产菌株的构建及代谢调控研究[D];江南大学;2011年
17 罗涛;结核分枝杆菌北京家族菌株的起源、进化及其与现代人类迁移的联系[D];复旦大学;2012年
18 OJOKOH EROMOSELE;棕色固氮菌褐藻胶诱导大豆生成大豆抗毒素的研究[D];中国农业科学院;2015年
19 张卫兵;甘南牧区产凝乳酶细菌的筛选、产酶条件、酶学特性及应用研究[D];甘肃农业大学;2014年
20 王娉;中国大肠杆菌O157:H7暴发相关菌株的遗传学和毒力分析[D];中国疾病预防控制中心;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前20条
1 刘海超;褐藻胶降解菌株的筛选、鉴定及其产酶活性研究[D];上海海洋大学;2021年
2 吕春娥;稻草纤维素酶高产菌株的选育及其产酶条件的优化[D];福建农林大学;2010年
3 张博;产冷活性β-半乳糖苷酶低温菌株的筛选及产酶条件的优化[D];广东药学院;2011年
4 赵伟锋;一株产同型半胱氨酸酶菌株的分离及产酶条件研究[D];浙江大学;2006年
5 陈和秀;产木聚糖酶菌株的筛选、鉴定及木聚糖酶的分离纯化[D];厦门大学;2008年
6 吴巧玉;高产淀粉酶红曲霉菌株的筛选鉴定、条件优化及酶学性质的研究[D];浙江师范大学;2016年
7 赵更峰;一株产肌酐水解酶菌株的分离及酶特性研究[D];浙江大学;2003年
8 王庆玉;产褐藻胶裂解酶菌株的筛选鉴定、产酶优化与铜藻发酵的初步研究[D];烟台大学;2021年
9 余淼;产蛋白酶霉菌的分离鉴定、蛋白酶基因cDNA克隆及产酶条件优化[D];西南民族大学;2013年
10 张珂;亚油酸异构酶高产菌株的诱变选育及其催化性能的研究[D];安徽工程大学;2018年
11 李新鑫;竹林环境中木质素降解菌的筛选及产酶条件优化[D];浙江农林大学;2016年
12 唐尧;β-苯丙氨酸变位酶基因工程菌的构建及其产酶条件优化[D];安徽工程大学;2017年
13 郄卫那;木聚糖酶产生菌株Fusarium oxysporum sp.MJ-23的分离鉴定、酶学特性及产酶条件优化[D];南京农业大学;2013年
14 王迪;褐藻胶裂解菌株筛选及优化[D];大连海洋大学;2017年
15 许志斌;绿僵菌传代菌株的退化[D];南昌大学;2007年
16 陈朋;高产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及酶学性质研究[D];天津科技大学;2015年
17 徐凡;产褐藻胶裂解酶微生物的选育[D];福州大学;2016年
18 孙丽萍;锈凹螺褐藻胶裂解酶的酶学特性及褐藻胶寡糖的活性研究[D];中国海洋大学;2004年
19 李安雪;褐藻胶裂解酶基因工程菌的高密度培养与褐藻水解产物的应用研究[D];上海海洋大学;2013年
20 刘玉佩;芽孢杆菌褐藻胶裂解酶的实验室制备及其基因克隆与表达的研究[D];上海海洋大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前5条
1 记者 朱汉斌 通讯员 李诚斌;全球模式菌株库在广州启动[N];中国科学报;2020年
2 记者 莫文艺 通讯员 李诚斌;全球模式菌株库在穗启动[N];广东科技报;2020年
3 周建亮 刘会梅 郭悦;胶南成“褐藻胶之都”[N];青岛日报;2010年
4 记者 冯丽妃;中外计划5年内测序万种微生物模式菌株[N];中国科学报;2017年
5 本报记者 庄海菊;菌株绽放新希望[N];呼伦贝尔日报;2018年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978