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青阳参总甙抗癫痫作用的分子机理研究

李先春  
【摘要】:青阳参总甙(Qingyangshenylycosides,QYS)是萝摩科鹅绒属植物青阳参(Cynanchum Otophyllum Scheid)根粉提取物,已有动物实验表明QYS对大鼠听源性惊厥(audiogenic seizure,AGS)发作、“点燃”效应(kindling effect)以及硫酸亚铁诱导的癫痫发作具有明显的对抗作用,表现出显著的抗癫痫效应(antiepileptic effect).以往研究表明QYS对中枢神经系统(CNS)中乙酰胆碱浓度、5—HT、c-fos、神经肽浓度以及GABA能都有一定的影响,但对QYS抗癫痫作用的分子生物学机理到目前为止还知之甚少。 DBA/2J小鼠是一种先天性对强噪音敏感的小鼠,在受到高强度的声音刺激后便会相继出现狂奔(wild running)、阵挛(colus)、强直性痉挛(tonus)等异常行为。因此,DBA小鼠成为研究癫痫发生机制和筛选新型抗癫痫药物(antiepileptic drugs,AEDs)较好的实验动物。本实验就以DBA小鼠为实验动物,运用动物药理学方法考察QYS对强噪音诱导的听源性惊厥和PTZ(pentylenetatrazol)诱导的全身性癫痫(PTZ-induced generalized epilepsy)发作的影响;运用高密度基因芯片技术、实时定量PCR技术以及Western blot等分子生物学技术,分别考察强噪音诱导的小鼠AGS发作后基因表达的变化,分析AGS发作相关的基因差异表达;考察QYS对中脑下丘基因表达谱的影响以及QYS抑制AGS发作后基因表达谱的变化,对QYS抗癫痫作用的分子生物学机制进行初步探讨,同时为筛选新型抗癫痫药物提供一些理论基础。 1.青阳参总甙对听源性惊厥发作和PTZ诱导的癫痫发作的行为学研究 连续两天腹腔注射方式给予动物不同剂量的QYS后,考察QYS对强噪音(113.5dB SPL的电铃声)诱导的听源性惊厥发作的影响。结果显示对照组(Con组)动物和给予75mg/kg组动物(QY75)中AGS发作的潜伏期分别为2.21±0.25秒和2.20±0.36秒,两组间不存在显著差异(student t-test,P0.05),而且两组动物都出现了明显的强直痉挛,即Tonus%为100。而给予100 mg/kg以上剂量的QYS可以非常明显地延长强噪音诱导的AGS发作的潜伏期(Kruskal-Wallis one-way ANOVA,P


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