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评估运动员免疫机能的指标与方法研究

王恬  
【摘要】: 研究目的:通过建立一个由T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)、自然杀伤T细胞(NKT)、树突状细胞(DC)、Th1/Th2细胞亚群相关细胞因子等多个免疫指标构成的检测网络系统,采用流式细胞仪检测技术、酶联免疫斑点技术、实时荧光定量PCR技术等目前国际流行的免疫检测方法,观察女子赛艇运动员高住高练低训(HiHiLo)和低住高练(LoHi)过程中及女子游泳运动员冬训期训练过程中免疫机能的动态变化状况,旨在了解运动员机体免疫功能的变化特点和规律,寻找有意义的免疫指标及有应用价值的检测方法,为更准确掌握运动员对训练方式和运动负荷的适应状况、及时掌握运动员身体机能的变化状态、提高运动训练质量提供客观依据。 研究方法: 模拟低氧训练的研究:受试者为上海市赛艇队12名女子赛艇运动员,分成HiHiLo组和LoHi组,进行为期5周的模拟低氧训练。HiHiLo组为低氧训练+低氧睡眠+常氧专项训练。LoHi组为低氧训练+常氧专项训练。低氧训练和睡眠时低氧房空气的氧含量为15.4%,相当于2500m的海拔高度。在低氧训练前、低氧训练的第1周、第4周、第5周及恢复2周周末清晨抽取受试者肘静脉血。应用流式细胞仪检测技术、实时荧光定量PCR技术等检测方法,分别检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、NK细胞、NKT细胞的表达;γ-干扰素(IFN-γ)mRNA、白介素-4(IL-4)mRNA以及穿孔素(PFR)mRNA在外周血白细胞中的表达;外周血皮质醇(C)、睾酮(T)的浓度。 冬训期运动训练的研究:受试者为浙江省游泳队8名女子游泳运动员。冬训期训练周期由二周中等强度大运动量训练、二周大强度中运动量训练及一周中等强度中运动量恢复训练所构成。以运动训练周期前的调整期作为基础值。于调整期、冬训期训练第2周、第3周、第4周、恢复1周周末运动结束36h后清晨抽取受试者肘静脉血。应用流式细胞仪检测技术、酶联免疫斑点技术、实时荧光定量PCR技术等检测方法,分别检测外周血DC、CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞、NKT细胞的表达;典型的Th1型和Th2型细胞因子IFN-γ、IL-4蛋白水平和基因水平在外周血白细胞中的表达;白细胞及其分类的数量和百分比;外周血C、T的浓度。 研究结果:模拟低氧训练的研究结果如下:1、低氧训练的第4周、第5周NKT细胞表达明显下降。2、5周的模拟低氧训练结束后淋巴细胞亚群中的各项免疫指标已基本恢复至低氧训练前水平或高于低氧训练前水平。3、低氧训练第5周IFN-γmRNA表达上调,IL-4mRNA、PFRmRNA则出现表达下调,Th1/Th2比值升高。4、HiHiLo组和LoHi组总体变化趋势相似,二组之间多数指标无显著性差异变化。 冬训期运动训练的研究结果如下:1、运动可刺激DC生成明显增多,并随运动量与运动强度的增加而增加。2、运动量与运动强度增加后NKT细胞表达呈现明显下降。3、冬训期运动训练的第4周T淋巴细胞亚群表达明显下降,恢复1周时仍处于较低水平。4、不同检测方法检测的Th1/Th2比值在冬训期的变化不明显或出现升高。 研究结论:1、5周的模拟低氧训练能使机体的免疫功能得到一定程度的提高,表明HiHiLo、LoHi是安全有效的低氧训练法。2、NKT细胞在运动训练过程中变化早、幅度大,可考虑作为首选的免疫指标监测运动员的免疫机能。3、DC可作为新的免疫指标运用于运动免疫的监测中。4、运动员进行不同负荷的运动所测得的免疫指标的变动趋势表明,持续时期较长的大负荷运动,有可能引起免疫功能出现抑制性变化。5、不同运动训练过程中各免疫指标的变化并不呈现完全同步的趋势。6、模拟低氧训练及冬训期运动训练中机体Th1/Th2细胞平衡均维持正常或向着Th1方向漂移,并没有明显的运动免疫性抑制失衡现象出现。7、流式细胞术胞内细胞因子检测、酶联免疫斑点技术、实时荧光定量PCR技术均为理想的研究方法,可在运动免疫的研究中推广应用。


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