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负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子的制备及抗肿瘤作用评价

程潜峰  
【摘要】:[研究背景]纳米粒子载药技术可以提高负载药物的稳定性和生物利用度,增强其抗肿瘤效果。但传统高分子材料制成的纳米载体应用于机体时,经常会诱导人体产生一系列的超敏反应,影响了其在临床上的应用。以红细胞等天然生物材料为基础的纳米载药系统,由于具有安全、可降解、生物相容好等优势,近年来得到了越来越多的关注。[研究目的]采用具有极高的生物相容性、无免疫原性的红细胞膜为材料,无毒、安全、简单的构建负载姜黄素的纳米药物投递系统,并评价其体内外抗肿瘤效果。[研究方法]在0℃条件下,用低渗破膜法提取红细胞膜,再通过超声法制备负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子(Cur-RBC-NPs)。比较加入不同浓度药物所得纳米粒子的粒径和包封率来优化载药纳米粒子的制备条件;通过透射电镜、动态光散射仪等手段对纳米粒子进行表征。采用共聚焦显微镜观察人胃癌细胞株MKN45和AGS对纳米粒子的摄取情况;用免疫荧光技术评价纳米粒子在肿瘤组织的渗透和滞留效应。通过MTT法研究负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子的体外抗肿瘤作用。通过量取肿瘤体积,评价负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子在体内对人胃癌细胞株MKN45裸鼠皮下瘤模型的局部治疗效果。[研究结果]所制备的负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子具有球形结构,粒径分布均匀,平均粒径274.9±2.6 nm,包封率为64.7±2.1%,载药率5.24±0.21%。具有良好的药物缓释特性。纳米粒子能够被人胃癌肿瘤细胞株MKN45和AGS摄取至核周释放出姜黄素;MKN45裸鼠瘤周注射纳米粒子后,没有表现出明显的肿瘤组织穿透性,但与裸药组相比,粒子可以在瘤周保持更长的时间,起到药物缓释作用。体外细胞毒性实验证实Cur-RBC-NPs保留了姜黄素的药理活性,具有显著的杀灭肿瘤细胞能力。在体内MKN45细胞皮下瘤模型抗肿瘤实验中,与姜黄素原药和Cur-RBC-NPs静脉给药组相比,负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子组抑制肿瘤能力更强。[结论]负载姜黄素的红细胞膜纳米粒子原料安全、无毒,制备方法简便,可以增强负载药物的缓释性和抗肿瘤效果,红细胞膜纳米粒子有望成为有临床应用前景的纳米给药平台。


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