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~(18)F-FDG细胞结合率早期评价热化疗对结肠癌细胞HCT116杀伤作用的实验研究

薛兆强  
【摘要】:第一部分5-FU对人结肠癌HCT116细胞摄取~(18)F-FDG的影响 目的:通过检测结肠癌HCT-116细胞~(18)F-FDG细胞结合抑制率影响因素和5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗后早期对结肠癌HCT-116细胞摄取~(18)F-FDG的影响,探讨利用~(18)F-FDG细胞结合率早期评价化疗的疗效。 方法:1、依据预实验结果依次改变实验条件:(1)细胞浓度,(2)反应时间,(3)~(18)F-FDG放射性活度,(4)葡萄糖的浓度,进行~(18)F-FDG细胞结合率测定。2、改变5-FU浓度,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)测细胞生长抑制率和~(18)F-FDG细胞结合抑制率。 结果:当细胞浓度1×10~6/瓶、加入~(18)F-FDG放射性活度为3.7KBq,葡萄糖浓度为5.5mmol/L,反应时间为100min,细胞结合率为(43.77±4.16)% ,加入终浓度10、20、30和50μg/ml5-FU 100μL作用24h后,细胞结合率分别为(32.47±5.43)%、(26.44±3.62)%、(22.26±3.63)%、(16.10±6.40)%;细胞结合抑制率分别为(25.81±5.64)%、(39.58±3.74)%、(49.31±5.16)%、(62.27±7.50)% ,各组之间差异均有统计学意义,且随5-FU剂量增加而下降,两者呈负相关(r=-0.879,P0.01)。给药24h后MTT实验细胞生长抑制率与细胞结合抑制率呈正相关(r=0.831,P0.01)。 结论:5-FU作用24h后结肠癌HCT116细胞的~(18)F-FDG细胞结合率下降,~(18)F-FDG细胞结合抑制率升高,可以通过~(18)F-FDG细胞结合抑制率早期评价5-FU对结肠癌的杀伤作用。 第二部分~(18)F-FDG细胞结合率早期评价热化疗对结肠癌细胞HCT116的杀伤作用 目的:一方面是论证温热是否影响肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,另一方面研究~(18)F-FDG作为PET的常用显像剂,是否可以早期评价温热化疗的疗效。 方法:热疗(43℃,30min)、化疗(5-FU浓度为100μg/ml 10μl)、和热化疗(热疗后立即加入5-FU)治疗24h或48h前后,分别测定MTT法测定细胞的生长抑制率、~(18)F-FDG细胞生长抑制率、流式细胞仪测早期凋亡率,透射电镜观察细胞形态超微变化及细胞培养液中葡萄糖浓度和乳酸脱氢酶释放量。 结果:HCT-116细胞经热疗、化疗、热化疗治疗24h和48h后,~(18)F-FDG细胞结合抑制率分别为(12.70±3.34)% (26.94±4.82)% (21.71±4.11)%和(25.47±7.09)%(37.18±5.16)% (39.33±9.19)% ,MTT细胞生长抑制率为(11.67±3.44)%、(26.00±5.68)%、(20.99±7.08)%和(19.38±5.49)%(39.24±7.83)% (42.71±9.59)%,24h细胞培养液中葡萄糖浓度和乳酸脱氢酶释放量分别为(6.65±0.41)mmol/L(7.56±0.27)mmol/L(7.64±0.65)mmol/和(35.83±7.65)U/L,(50.67±7.76)U/L,(52.33±8.32)U/L,24h流式细胞仪检测细胞早期凋亡率分别为(9.80±0.16)%,(19.80±2.40)%,(15.70±1.80)%,透射电镜观察发现细胞发生形态学改变,但未见凋亡小体出现。24h早期凋亡率及24h和48hMTT细胞生长抑制率、~(18)F-FDG细胞结合抑制率、细胞培养液中葡萄糖浓度和乳酸脱氢酶释放量治疗前与治疗后各组间分别经t检验,有统计学意义(P0.05)。 结论: ~(18)F-FDG细胞结合率可以早期评价温热化疗对结肠癌细胞HCT116的杀伤作用,并且温热化疗(43℃,加热30min后立即加入5-FU)与5-FU单独化疗比较无协同作用。


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