原发性肾病综合征患儿外周血和肾组织中GRα、GRβ的表达及其临床意义

【摘要】：目的检测糖皮质激素受体α(GRα)和糖皮质激素受体β(GRβ)在原发性肾病综合征(PNS)患儿外周血和肾组织中的表达,探讨GRα、GRβ在PNS患儿糖皮质激素(GC)耐药中的作用及介导耐药的可能机制。 方法选择苏州大学附属儿童医院住院的PNS患儿25例,按照GC对患儿的疗效分成两组:激素耐药型肾病综合征(SRNS)10例,激素敏感型肾病综合征(SSNS), 15例,10名健康儿童作为正常对照组,分两个时间点采集外周血标本:(1)发病初未用GC时(A);(2)足量GC治疗4周后(B)。进行如下实验:①逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PNS患儿不同时间点PBMC中糖皮质激素受体GRα和GRβ的表达;另选10名健康儿童作为检测PBMC中GRαmRNA和GRβmRNA的对照组。②10例SRNS患儿均在激素治疗4周后行肾活检,以免疫组织化学方法检测肾组织中糖皮质激素受体GRα和GRβ的表达,另选5例儿童正常肾组织作为检测肾组织中GRα和GRβ的对照组。 结果(1)SSNS组、SRNS组和正常对照组中外周血PBMC中均有GRα和GRβ的表达,以GRα为主;(2)激素治疗前PBMC GRαmRNA的表达:治疗前SSNS/SSRNS/对照组间之间比较无显著差异,激素治疗4周后SSNS组和SRNS组PBMC GRαmRNA的表达均有所下降(p0.05);(3)治疗前SRNS组PBMC GRβmRNA水平高于SSNS和Control组(P0.05),治疗后SRNS组PBMC GRβmRNA较治疗前有升高(p0.05);(4)SRNS组和正常对照组肾组织细胞中均有GRα和GRβ的表达,然而SRNS组GRβ的表达高于正常对照组(p0.05),GRα的表达低于正常对照组(P0.05);(5)外周血GRβmRNA的表达与24小时尿蛋白定量(24hUTA)、与肾脏病理积分有相关性(r分别为0.469,0.672,p均0.05),SRNS组肾组织中GRβ的灰度值与病理积分有相关性(r=-0.7826,p0.05),即肾组织中GRβ的灰度值越小,其GRβ表达阳性率越高,肾脏病理积分越大,肾脏病变程度越重;另外SRNS组24小时尿蛋白定量与肾脏病理积分呈明显正相关(r=0.648,p0.05),PBMC GRβmRNA的表达量与肾组织中GRβ灰度值呈明显负相关(r=-0.6502,p0.05),即PBMC GRβmRNA的表达量与肾组织中GRβ阳性表达率呈明显正相关。 结论(1)肾病综合征患儿激素治疗后PBMC中GRαmRNA的下降可能是激素敏感性下降的原因之一;(2)SRNS组在治疗前PBMC中GRβmRNA表达异常升高,提示SRNS组在激素治疗前即有激素耐药因素存在,经激素治疗后PBMC中GRβmRNA较前明显升高,说明在SRNS组中激素治疗可进一步诱导激素耐药;(3)PNS患儿PBMC中GRβ的表达量与肾组织中GRβ阳性表达率、24h尿蛋白定量和肾脏病理积分呈明显正相关,提示SRNS PBMC中GRβ的水平可反映肾脏病变的严重程度。