收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

L-单甲基—精氨酸对减少关节软骨细胞凋亡的机制研究

芦北极  
【摘要】:目的 目前,我国社会人口已经出现老龄化趋势,经相关流行病学的调查结果显示退变性骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的发病率已呈逐年升高趋势,预计在不久的将来,此疾病必将成为我国成年男性丧失劳动能力的主要原因之一。以往的研究已显示退变性骨关节炎的病理学特征主要为关节部位的软骨细胞呈现明显的凋亡现象,软骨细胞外基质的降解过程呈明显进行性。一些研究还显示,一氧化氮(NO)及其附属产物的浓度表达水平与关节软骨细胞的凋亡数目,以及骨关节炎疾病的严重程度呈显著的正相关性,在疾病的早期阶段,NO及其附属产物会刺激和诱导关节软骨细胞发生凋亡,使关节软骨出现病理性降解。L-单甲基-精氨酸(L-NG-monomethyl-arginine, L-NMMA)是L-精氨酸的一种同类物,可与L-精氨酸竞争一氧化氮合成酶(Nitric oxide synthase,NOS)的结合部位,对3种NOS均有抑制作用,选择性不明显,随着作用时间延长,使诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)不可逆地失活。鉴于L-单甲基-精氨酸对兔实验性膝关节骨关节炎关节软骨细胞凋亡的影响机制尚未完全阐明,本文拟选择这一课题进行研究,以阐明其作用机制。 方法 选取30只实验性大白兔随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、L-NMMA低剂量治疗组(C组)、L-NMMA中剂量治疗组(D组)和L-NMMA高剂量治疗组(E组),总共5个组,每组6只。采用HE染色法检测各组的病理表现;检测各组兔关节滑液中NO和血清NO的表达水平;采用原位凋亡染色(TUNEL)和流式细胞术检测软骨细胞的凋亡状况;采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)法检测各组兔血清骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-,TGFβ1)的表达水平;采用蛋白质印迹(western-bloting)法检测各组软骨组织半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspases-3)的表达;采用免疫组织化学方法检测软骨组织Bcl-2相关X蛋白(Human Bcl-2associated X protein,Bax)和重组人B细胞淋巴瘤因子2(B-Cell Lymphoma-2,Bcl-2)的表达。 结果 1.正常组苏木精-伊红染色法(hematoxvlin-eosin staining, HE)染色显示:软骨表层平整、光滑,细胞分布均匀,无簇聚软骨细胞,潮线完整;HE染色均匀,无失染现象;模型组HE染色显示:表层变薄,有裂隙深至软骨下骨;细胞排列紊乱,有大量簇聚软骨细胞,潮线消失;HE染色不均匀,全层明显失染;随着L单甲基精氨酸治疗浓度提高,软骨组织结构的破坏程度在组织学上呈现明显缓解。模型组兔关节软骨Mankin评分明显高于正常组(P0.01),且随着L-单甲基-精氨酸治疗浓度提高,兔关节软骨Mankin评分明显下降(P0.05)。 2.模型组兔关节液和血清NO的表达水平明显高于正常组(P0.01),且随着L单甲基精氨酸治疗浓度的提高,关节液和血清NO的表达水平明显下降(P0.05)。 3.模型组兔关节软骨细胞的凋亡率和凋亡指数明显高于正常组(P0.01),且随着L单甲基精氨酸治疗浓度的提高,凋亡率和凋亡指数明显下降(P0.05)。 4.模型组兔血清BMP2、TGF β1的表达水平明显低于正常组(P0.01),且随着L-单甲基-精氨酸治疗浓度的提高,兔血清BMP2、 TGFβ1的表达水平明显上升(P0.05)。 5.模型组兔关节软骨组织Caspases-3的表达水平明显高于正常组(P0.01),随着L-单甲基-精氨酸治疗浓度提高,Caspases-3表达水平明显下降(P0.05)。 6.模型组兔关节软骨组织Bax的表达水平明显高于正常组(P0.01),随着L-单甲基-精氨酸治疗浓度提高,Bax的表达水平明显下降(P0.05);模型组兔关节软骨组织Bcl-2的表达水平与正常组无明显差异性(P0.05),随着L-单甲基-精氨酸治疗浓度的提高,Bcl-2的表达水平明显上升(P0.05);随着L-单甲基-精氨酸治疗浓度的提高,Bcl-2/Bax数值明显上升(P0.05)。 结论 L-单甲基-精氨酸(L-NG-monomethyl-arginine, L-NMMA)可明显降低关节液和血清NO及关节软骨组织Caspases-3的表达水平,升高血清BMP2、TGFβ1的表达水平,可能通过上调Bcl-2/Bax的数值而抑制关节软骨细胞的凋亡,L-NMMA在未来可作为骨关节炎的治疗方法之一,用于临床。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郑兴,章同华,王成海,乔德标,丁鸿钧;充血性心力衰竭患者血浆精氨酸加压素变化[J];临床心血管病杂志;1992年04期
2 沈炳玲;;高胆固醇血症血浆L-精氨酸减少[J];国外医学(内分泌学分册);1993年02期
3 陈新龙,陆树良!200025上海,许伟石!200025上海,陈志龙!200025上海,史济湘!200025上海;精氨酸对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合影响的实验研究[J];解放军医学杂志;2000年06期
4 房林,薛崇德,周以明;精氨酸对肠粘膜屏障功能的影响[J];华夏医学;2000年02期
5 梁力建,郑进方,罗时敏;精氨酸对大鼠胃肠外营养性肝损害的影响[J];中华肝脏病杂志;2000年06期
6 胡新华,张强,孙达欣,郭宏,郎晓讴,王廷振,刘恩卿;精氨酸对大肠癌病人肿瘤细胞增殖活性的影响[J];中国医科大学学报;2001年05期
7 赖佳明!510080广州,梁力建!510080广州;精氨酸对肝硬化肝癌患者术后全胃肠外营养的肝脏保护作用[J];中华普通外科杂志;2001年08期
8 顾剑峰,李厚祥,陈玉泉;急性胰腺炎使用左旋精氨酸时机的实验研究[J];肝胆胰外科杂志;2001年02期
9 刘勇;精氨酸可减轻顺铂肾毒性[J];中国肿瘤;2001年05期
10 罗伟香,彭贺新;精氨酸联合纳洛酮治疗肝硬化性肝性脑病疗效观察[J];护理学杂志;2003年11期
11 梁伟,DAVALIAN Dariush,TORCHILIN Vladimir P;新型肽类促进剂—寡聚精氨酸与牛颌下腺粘蛋白的相互作用(英文)[J];药学学报;2004年12期
12 曹扬,张抒,姚欣敏,杨枫;精氨酸强化低热量肠外营养联合生长激素在外科危重患者中的应用[J];实用医院临床杂志;2005年04期
13 单威;王玉春;逄丽红;;精氨酸、运动与免疫功能[J];齐齐哈尔医学院学报;2006年04期
14 王润玲;张庆伟;杨金荣;符敬伟;张骏;刘昌孝;;精氨酸布洛芬糖浆与布洛芬片剂人体药动学及生物等效性比较[J];中国新药与临床杂志;2006年01期
15 孙学成;唐国都;吴建胜;梁志海;邓德海;;大剂量左旋-精氨酸对大鼠胰腺及细胞因子的影响[J];中华消化杂志;2006年06期
16 任永锋;吴承堂;刘晋峰;;左旋精氨酸对严重腹腔感染患者肠屏障功能的影响[J];实用医学杂志;2007年10期
17 宫路路;林瑞新;文海荣;房学东;;精氨酸对恶性梗阻性黄疸患者肿瘤坏死因子-ɑ和可溶性白细胞介素2受体的影响[J];肝胆外科杂志;2007年04期
18 蒋小华;李宁;朱维铭;黎介寿;;精氨酸对短肠综合征大鼠肠道代偿的影响[J];中华实验外科杂志;2007年08期
19 付小玲;欧阳金芝;张木勋;张建华;;左旋精氨酸/一氧化氮通路对小鼠胰岛β细胞凋亡的影响[J];中国现代医学杂志;2008年07期
20 晏沐阳;王士雯;翟永志;;精氨酸对高胆固醇血症兔冠状动脉功能的效应[J];中华老年心脑血管病杂志;2008年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邓凯东;Wong C.W.;Nolan J.V.;;早期日粮精氨酸对鸡淋巴器官和免疫力的长期影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会——第九届学术研讨会论文集[C];2004年
2 马秀玲;郭长江;耿战辉;杨继军;韦京豫;高兰兴;;精氨酸对肝脏IGF-1分泌的调控作用及其意义[A];全国危重烧伤患者早期复苏对策专题研讨会论文汇编[C];2005年
3 马现永;林映才;蒋宗勇;郑春田;陈芳;曹庭;王丽;;精氨酸调控肥育猪机体内基因表达研究[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
4 闵定宏;张福庆;李国辉;;血管内皮生长因子和L-精氨酸联合作用于大鼠缺血皮瓣的实验研究[A];第八届全国烧伤外科学年会论文汇编[C];2007年
5 高开国;蒋宗勇;林映才;郑春田;陈芳;;日粮中添加精氨酸对母猪繁殖性能的影响[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会2009年学术年会“回盛生物”杯全国养猪技术论文大赛论文集[C];2009年
6 茅惠明;魏玮;熊伍军;陈炳官;;高效液相色谱法同时测定血浆L-精氨酸和L-瓜氨酸浓度[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
7 高开国;蒋宗勇;林映才;郑春田;陈芳;;母猪日粮中添加精氨酸对哺乳仔猪生长的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集[C];2008年
8 杨洪强;高华君;赵海洲;;苹果根系精氨酸代谢及其分子生理学研究(摘要)[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
9 范晋海;贺大林;王明珠;张琳琳;张越;何辉;龙清志;;小分子细胞穿膜肽-精氨酸多肽膀胱肿瘤摄入的体内体外研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年
10 郭渝成;曾祖荫;雷鸣;张志高;陈敏;张碧霞;吴强;;高血压病患者微血管改变及L精氨酸治疗作用的研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 芦北极;L-单甲基—精氨酸对减少关节软骨细胞凋亡的机制研究[D];苏州大学;2012年
2 马秀玲;精氨酸对肝脏IGF-1分泌的调控及其促进免疫作用机制的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2003年
3 牟佳佳;基于L-精氨酸骨架的氨肽酶N抑制剂的设计、合成及活性研究[D];山东大学;2009年
4 高鑫;蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)在RD细胞诱导分化中作用机制的研究[D];中国协和医科大学;2008年
5 白永怿;L-精氨酸影响动脉内皮功能的荟萃分析及脑卒中的遗传易感性研究[D];中国协和医科大学;2009年
6 张莉;壳寡糖、氨基葡萄糖及其衍生物的制备和抗肿瘤活性研究[D];中国海洋大学;2005年
7 陈雪岚;钝齿棒杆菌精氨酸生物合成基因簇的研究[D];江南大学;2005年
8 周强;异体软骨细胞复合透明质酸苄基酯凝胶修复关节软骨缺损[D];中国医科大学;2005年
9 段王平;不同年龄兔膝关节软骨单位生物学特性分析[D];山西医科大学;2011年
10 金其贯;谷氨酰胺和精氨酸对运动性免疫抑制干预作用的研究[D];北京体育大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 蒋明玉;口服精氨酸促进长骨线性生长的作用及机制的研究[D];复旦大学;2011年
2 邢金;谷氨酰胺和精氨酸联合应用对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用研究[D];吉林大学;2009年
3 赵晶;p16精氨酸甲基化修饰及其功能的初步研究[D];东北师范大学;2011年
4 宋京翔;精氨酸增强的胃肠外营养在结直肠癌患者中的应用及其临床意义[D];第一军医大学;2002年
5 曾春花;精氨酸硫酸锌胶囊治疗少弱精子症的临床和作用机制的研究[D];华中科技大学;2007年
6 刘源岗;聚精氨酸/海藻酸钙微胶囊的制备与性能表征[D];华侨大学;2003年
7 姚海峰;微生物转化合成瓜氨酸的研究[D];北京化工大学;2008年
8 温秀平;外源性精氨酸保护肝损伤作用及其机制的研究[D];山西医科大学;2004年
9 宋晓红;内毒素诱导性葡萄膜炎眼中iNOS和精氨酸循环相关酶的表达[D];青岛大学;2007年
10 刘润平;精氨酸功能化碳纳米管的制备及其分散性和溶解性的研究[D];中南大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 郭安定;补充精氨酸 消除性疲劳[N];医药养生保健报;2005年
2 高新;废弃蛋白提取精氨酸带来高效益[N];中国化工报;2007年
3 麦国荣;精氨酸的临床新用途[N];中国医药报;2002年
4 成银霞;外周镇痛药作用新机制:激活精氨酸/NO/cGMP/蛋白激酶G/ATP敏感性钾通道 Analgesics:Stimrlators of the NO-cGMP-PKG-K+ ATP Channel[N];中国医药报;2006年
5 中华预防医学会副会长 黄永昌;氨基酸与人体健康[N];保健时报;2003年
6 宫靖;“限价令”实施 上市药企不敢怠慢忙表态[N];上海证券报;2007年
7 韩万宁;S哈药今年日子不好过[N];中国证券报;2007年
8 周虹;明明白白吃干果[N];卫生与生活报;2007年
9 张献怀;骨性关节炎的发病原因[N];人民日报海外版;2008年
10 北京朝阳医院(京西院区)骨科 杨立辉;骨关节炎治疗误区多[N];保健时报;2006年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978