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人脐血造血干/祖细胞体外扩增和移植SCID小鼠的实验研究

苏丽萍  
【摘要】: 脐血作为一种新的造血干/祖细胞来源,可以成功地替代骨髓和 动员外周血用于临床上骨髓衰竭病人的造血重建。这已经被越来越多 的实验研究所证明。这是因为脐血中含有丰富的造血干/祖细胞: CD34~+CD38~-细胞、集落形成细胞(CFC)、长期培养启动细胞(LTC- IC)的含量均高于骨髓和动员外周血。另外脐血移植后移植物抗宿主 疾病(GVHD)的发生率和严重程度也比骨髓和动员外周血细胞移植 低。但是由于单份脐带血中所含有的造血细胞数量较少,限制了脐血 移植的应用,目前脐血移植主要用于儿童和低体重成人患者。为了扩 大脐血移植的应用范围,首先必须对脐血造血干/祖细胞进行体外扩 增,这也是目前移植领域中倍受关注并急需解决的课题之一。 近年来陆续发现了几种新的造血生长因子如FL、TPO、SCF等, 并已证明它们在早期造血调控中发挥着重要作用。因此我们参考国内 外新的方法并加以改进,在原有实验结果的基础上,采用细胞因子组 合FL+TPO+SCF+IL-6来扩增脐血造血细胞,通过无基质细胞接触的 液体悬浮培养、细胞表型动态测定、体外集落形成试验等方法探讨了 这一因子组合对脐血CD34~+细胞的体外扩增效应,发现与经典的细胞 因子组合(SCF+IL-3+IL-6+GM-CSF+EPO)相比,该扩增方案能更 有效扩增CD34~+细胞,在产生了相当数量的较成熟细胞的同时,能在 较长时间(至少4周)内仍保持一定比例的造血干细胞成分。 为了进一步了解扩增后细胞的移植能力和造血潜能,我们以严重 联合免疫缺陷(SCID)小鼠作为脐血移植的动物模型,将扩增后的脐血 造血细胞通过尾静脉注入受亚致死量辐照的SCID小鼠体内,无菌饲 养4周后取其骨髓细胞,通过人CD45~+细胞的流式细胞仪检测和Alu 人脐血造血干/祖细胞体外扩增和移植 SC小鼠的实验研究 中文摘要 基因的PCR检测,在小鼠体内均发现了人源细胞,表明了扩增后的 脐血造血细胞可以长期植人SCID小鼠体内,从而改善或重建其造血 功能。


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