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野桑蚕体内分离的NPV和BmNPV的比较研究

李兵  
【摘要】: 分离野外收集的具有典型核型多角体病毒病症的野桑蚕的多角体病毒(Wild Bombyx mori nuclear polyhedroris virus,w-BmNPV),通过扫描电镜观察其外形和家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nuclear polyhedroris virus,BmNPV)的外形存在差异;利用野桑蚕病蚕的体液对该病毒进行空斑筛选,筛选后的病毒经家蚕细胞进行大量扩增,扩增后的病毒作为研究材料。 经电子显微镜观察,该病毒感染对象不管是家蚕和野桑蚕其外形六方形都不改变,而BmNPV在不同的环境条件下可表现为四方形和六方形的不同比例。也就是说w-BmNPV比BmNPV更稳定;同时也发现w-BmNPV的毒力比BmNPV更强。 对w-BmNPV和BmNPV以及(Antheraea paphia nuclear polyhedroris virus,ApNPV进行RAPD分析,研究结果表明,w-BmNPV和BmNPV不是同一种病毒;w-BmNPV和BmNPV的进化关系较近,而与ApNPV的进化关系较远。 通过对w-BmNPV的多角体蛋白基因polh基因的克隆和序列分析,结果发现,w-BmNPV的polh基因的ORF内有三个碱基和BmNPV有差异,分别是+22、+703和+711,使+7位的Pro变成了Ser,使+229位的Pro也变成了Ser,+711位G变这A,没有引起该位点+231位Ala的改变。由Ser和Pro在形成蛋白二级结构的构象常数可知,w-BmNPV的多角体较BmNPV更稳定,证明了w-BmNPV的多角体蛋白较BmNPV更为稳定。


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