收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

人BAFF基因转染细胞及其单克隆抗体的生物学特性

徐海燕  
【摘要】:BAFF(B cell-activating factor belong to the TNF family)是1999年发现的新分子,主要表达于单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、活化的T淋巴细胞和中性粒细胞等。其受体包括特异性结合受体BAFF-R、TACI和BCMA,三个受体主要表达于T和B淋巴细胞。BAFF与其受体共为TNF/TNFR超家族中的重要成员。业已发现,BAFF信号对B淋巴细胞的分化、发育及抗体的类型转换,及生发中心的维持具有重要作用;对T淋巴细胞具有共刺激作用;并与多种自身免疫病如SLE、RA和SS等、肿瘤如慢性B淋巴细胞性白血病、B细胞性非何杰金氏病及多发性骨髓瘤等,以及与心脏等器官移植的同种排斥反应相关。但对BAFF的基础研究尚需深入。为研究BAFF信号,本研究首先克隆了人全长BAFF分子,建立了BAFF基因转染细胞,并以此为免疫原,成功研制了一株抗人BAFF单克隆抗体,并深入探讨了其生物学特性。分析了健康人外周血来源和胸水来源T淋巴细胞表面BAFF的表达情况和意义。与此同时,本研究克隆了受体全长人TACI基因,建立了可溶性表达TACI-Fc融合蛋白的基因转染细胞,并探讨了所获得TACI-Fc融合蛋白的生物学效应。 一、人BAFF基因转染细胞的构建和BAFF分子对B细胞功能的影响 1.人BAFF基因的克隆和逆转录病毒表达载体的构建 根据BAFF基因(OeneBank:NM 006573)序列,利用RT-PCR方法从健康人外周血单个核细胞克隆出全长BAFF基因,装入pMD18-T载体,转化感受态大肠杆菌Top10。重组质粒T-BAFF经测序正确。利用PCR方法,从重组质粒T-BAFF扩增BAFF全长基因并引入酶切位点EcoR I和BamH I,装入逆转录病毒表达载体pSIV1,转化感受态大肠杆菌Top10。重组表达载体pSIV1-BAFF经测序正确。 2.脂质体转染法构建BAFF基因转染细胞 pSIV1-BAFF、辅助病毒载体pHIT456和pHIT60混合后,脂质体转染法转染包装细胞293T细胞,获得具有感染力的重组逆转录病毒。将含有完整BAFF重组逆转


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 许晓光,刘雪松,朱勇,宋朝君,金伯泉;抗CD30L/CD153单克隆抗体的制备与初步鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年06期
2 徐竹蔚,刘莹,户义,朱参胜,张圆,宋朝君,许晓光,金伯泉;抗3种标签蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年05期
3 郑纪山;李越希;唐祖明;高健;周宗安;邓小昭;;抗SARS病毒融合蛋白单克隆抗体的制备与初步鉴定[J];药物生物技术;2006年02期
4 夏国伟;生物免疫抑制治疗[J];复旦学报(医学科学版);2001年04期
5 王海涛,徐志凯,赵茜,张芳琳,薛小平,白文涛;抗GST单克隆抗体的制备和鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;1999年03期
6 王育才;丁勇;范清宇;张殿忠;单乐群;;抗人肌糖蛋白C单克隆抗体的制备及鉴定[J];现代生物医学进展;2009年07期
7 王友;张青云;王雅明;徐建军;;人Survivin基因克隆和单克隆抗体的研制及在肝癌中的表达[J];中华检验医学杂志;2006年03期
8 李超;林祥梅;余多慰;李全芬;李桂芬;韩雪清;;牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定[J];动物医学进展;2010年04期
9 郭建巍;王顺涛;郭黎明;冯健男;马骢;沈倍奋;;重组蓖麻毒素A链的原核表达和单克隆抗体的制备、鉴定及应用[J];免疫学杂志;2007年04期
10 杨明珍;李鹏;张竹君;易维京;李淑慧;赵利军;胡川闽;;抗淋巴样增强因子-1羧基端单克隆抗体的制备及其表位的初步鉴定[J];免疫学杂志;2008年02期
11 王文礼;王云龙;李晨阳;陈小科;刘利锋;;His标签单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年04期
12 董炜疆,胡海涛,冯改丰,杨广笑,王全颖;β淀粉样肽1~42单克隆抗体的制备[J];西安交通大学学报(医学版);2004年05期
13 张青云,杨敏,王雅明,徐建军;细胞因子Midkine融合蛋白的表达及其单克隆抗体的制备与应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2005年05期
14 李永清;杨敬;张莉;韦莉;;抗禽流感病毒M2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年05期
15 于占红;杨金菊;刘静;迟俊;陈苗;柳晓兰;刘莹;高建恩;孙启鸿;;PON2单克隆抗体的制备与初步鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年12期
16 张成全;陈祥;牛中伟;杨卫冲;徐正中;孟闯;潘志明;黄金林;焦新安;;重组牛γ-干扰素单克隆抗体的研制[J];中国动物传染病学报;2009年04期
17 戴楠;曹晓静;杨宇馨;李梦侠;易维今;王东;胡川闽;;人脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定[J];免疫学杂志;2010年03期
18 肖明兵;江枫;倪润洲;朱净;陆翠华;周嘉伟;;抗人Glypican3 N端融合蛋白单克隆抗体研制及特性鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2011年06期
19 祝令伟;冯书章;刘军;陈萍;;肠出血性大肠杆菌O157∶H7主要保护性抗原单克隆抗体的研制及特性分析[J];中国兽医学报;2006年03期
20 李瑞芳;秦爱建;许金俊;;抗奶牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的研制及其特性[J];中国人兽共患病学报;2006年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈任安;刘利;梁英民;;抗PTD-bcr/abl单克隆抗体的制备及鉴定[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年
2 杨肃文;张钧;周美霞;乐志安;谢鑫友;;尼克酰胺-N-甲基转移酶单克隆抗体的制备及鉴定[A];2008年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2008年
3 刘政;邱广斌;;抗MYCT-1单克隆抗体的制备及鉴定[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
4 胡茂志;焦新安;潘志明;黄金林;邵国青;刘秀梵;;抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
5 李宁;覃汉军;周春霞;王冬梅;马文波;林晨;张叔人;;应用anti-B7-H1单克隆抗体提高基因修饰瘤苗抗肿瘤免疫效应的研究[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年
6 徐璐璐;郭述良;罗永艾;;人DC—SIGN绿色荧光融合蛋白真核表达与功能鉴定[A];中华医学会2008年全国结核病学术会议论文汇编[C];2008年
7 李芳芳;;重症肌无力单链抗体融合蛋白的酵母菌表达及特异性鉴定[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
8 陈宏翔;涂亚庭;林能兴;黄长征;张丽霞;严小枫;;淋球菌MtrC融合蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株建立和特性鉴定[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
9 温新宇;胡美茹;黎燕;戚中田;沈倍奋;;抗人CD38单克隆抗体抗原识别表位的初步研究[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年
10 蔡斌;林毅;薛偕华;方玲;吴志英;王柠;;TAT-Ngb融合蛋白的原核表达及其对小鼠脑缺血影响的研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐海燕;人BAFF基因转染细胞及其单克隆抗体的生物学特性[D];苏州大学;2005年
2 王玉梅;嵌合降钙素基因的构建及表达[D];中国海洋大学;2005年
3 李英;大鼠抗肝癌单域抗体与力达霉素强化融合蛋白的构建及其抗肿瘤活性研究[D];中国协和医科大学;2005年
4 蒋骅;GST-EGFR融合蛋白冲击树突状细胞治疗头颈部鳞状细胞癌体内外实验观察[D];浙江大学;2008年
5 张世杰;人VSIG4分子的生物学特性及其对T细胞共抑制作用的研究[D];苏州大学;2009年
6 朱效娟;B细胞活化因子在ITP中的机制研究[D];山东大学;2010年
7 刘荣;人4-1BBL/抗CD20融合蛋白增强抗CD3/抗CD20双功能抗体的细胞毒作用及其机制研究[D];中国协和医科大学;2010年
8 游晓华;脑钠肽单克隆抗体的制备及初步临床应用研究[D];第二军医大学;2006年
9 戴廷军;特发性炎症性肌病的分子免疫病理诊断及分子免疫机制研究[D];山东大学;2010年
10 唐琳;肝再生增强因子与肝癌发生、发展关系的研究[D];重庆医科大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 范娅涵;EPO调节人CD34~+造血干细胞CD26的表达及CD26单克隆抗体的制备和鉴定[D];第三军医大学;2009年
2 毛一香;人B7-H4基因的克隆、表达及鼠抗人B7-H4单克隆抗体的研制[D];苏州大学;2005年
3 黄子逸;LIGHT基因转染细胞株和单克隆抗体的研制及其对T细胞的共刺激效应[D];苏州大学;2010年
4 李瑞芳;抗BovIFN-gamma特异性单克隆抗体的研制及其特性[D];扬州大学;2004年
5 乔祖健;猪肺炎支原体伴侣蛋白DnaK单克隆抗体的制备及鉴定[D];东北农业大学;2008年
6 王婉;人抗PRP8(pre-mRNA processing factor 8)分子单克隆抗体的制备及初步鉴定[D];山东师范大学;2007年
7 张敬梅;一株分泌猪IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞的制备与鉴定[D];安徽农业大学;2009年
8 申峻松;结核分枝杆菌lhp基因的原核表达及其产物的单克隆抗体研制[D];扬州大学;2008年
9 时红星;犬瘟热病毒的分离及单克隆抗体的研制[D];扬州大学;2008年
10 李妍;恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达、纯化及单克隆抗体的制备[D];第一军医大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 贾超时李德成;单克隆抗体产业研发项目将落户大庆[N];大庆日报;2008年
2 小许;市领导会见美国生物医药巨头[N];无锡日报;2010年
3 姜海;英科学家发现单克隆抗体[N];科技日报;2007年
4 本报记者  赖强;单抗药物期待中国加速度[N];医药经济报;2006年
5 本报特约撰稿人 李朝;单抗:生物医药发展的主旋律[N];医药经济报;2006年
6 本报记者 王耀翠;单抗药物增长强劲 中国企业奋起直追[N];中国高新技术产业导报;2011年
7 记者 项铮;赛诺菲巴斯德研制抗狂犬病单克隆抗体[N];科技日报;2008年
8 记者 杨俊坚;单抗药物:站在同一起跑线[N];医药经济报;2011年
9 张蕾;治疗用单克隆抗体[N];光明日报;2002年
10 李晓;“苏州系列”单克隆抗体走向世界[N];苏州日报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978