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人多发性骨髓瘤患者来源的DCs的体外诱导及生物学特性研究

王网珍  
【摘要】:多发性骨髓瘤(MM)为浆细胞恶性增殖性疾病,其特征是浆细胞合成分泌单克隆的独特型(Id)。迄今,应用常规化疗(马法兰、强的松等),MM患者中位生存期仍然徘徊在3年左右。大剂量化疗结合自体造血干细胞移植可延长患者的中位生存期,但仍远未达到治愈。 树突状细胞(DCs)是体内已知的功能最强的抗原提呈细胞(APC),有文献报道,采用MM患者单核细胞来源的DCs负载Id后的免疫治疗方案,患者出现显著的抗肿瘤免疫应答。MM患者经过传统治疗后易留下微小残留肿瘤,此时使用以DCs及DCs激发的细胞毒性T细胞(CTL)为物质基础的免疫治疗有助延长患者生存期,并延迟复发,值得深入探讨。 目的 本研究在体外从多发性骨髓瘤患者外周血单核细胞诱导DCs,并对其生物学特性进行初步研究,旨在为以DCs为物质基础的MM的免疫治疗提供实验依据。 方法 从MM患者和正常人外周血中分离获得单核细胞,在含GM-CSF和IL-4的培养基中培养,在培养的第7d,以诱导凋亡的多发性骨髓瘤细胞XG-2进行抗原负载,24h后加入TNF-α继续诱导2~3d,获得具有典型树突状形态的MM患者来源和正常人来源的DCs。进而通过免疫荧光标记、流式细胞仪分析、FITC-Dextran吞噬实验、酶联免疫吸附试验(ELISA)、混合淋巴细胞反应(MLR)和MTT法等方法比较MM患者和健康志愿者外周血单核细胞来源的DCs的形态、增殖、表型及功能差异。 结果 MM患者和正常人来源的DCs皆具有典型的形态特征,两者的生长曲线亦无明显差异。同时患者和正常人来源的DCs细胞均高表达CD1α、CD80、CD86


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