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骨髓间充质干细胞结合生物材料及向成骨细胞诱导分化的研究

段巧艳  
【摘要】: 研究目的:本课题初步研究了丝素羟基磷灰石复合材料与骨髓间充质干细胞的生物相容性及其骨诱导性,为丝素羟基磷灰石复合材料作为支架材料应用于骨组织工程奠定理论基础。 研究方法:实验组分为:丝素(Silk Fibroin,SF)、胶原(collagen,C)、羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)、HA与丝素共混材料(1:1比例,HA/SF=1:1)、HA与丝素共混材料(4:1比例,HA/SF=4:1)、空白对照组。通过HE染色、MTT及流式细胞仪等方法比较BMSCs在不同的生物材料上的黏附、伸展、增殖情况及表面抗原表达情况。结合生物材料诱导BMSCs向成骨细胞定向分化,通过ALP活性检测,改良的钙钴法染色和Von Kossa染色鉴定诱导细胞的成骨特性及评价生物材料对BMSCs成骨性能的影响。 结果:SF组、HA/SF=1:1组、HA/SF=4:1组、HA组与对照组相比,能够支持BMSCs的黏附、增殖,尤其是HA/SF=4:1复合材料可能和胶原一样能促进细胞的黏附、增殖。流式细胞仪分析表明丝素羟基磷灰石复合材料对BMSCs表面抗原表达影响较小。BMSCs在不同生物材料上成骨定向分化显示:HA/SF=4:1复合材料组的促成骨分化能力明显高于胶原、丝素及空白组,也高于HA/SF=1:1组,一定条件下,能够促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。 结论:丝素羟基磷灰石复合材料具有良好的生物相容性及骨诱导性,为其进一步在骨组织工程领域应用展示了无比广阔的前景。


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