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人类β1,3半乳糖基转移酶7对HL-60细胞增殖与侵袭特性的影响

行书丽  
【摘要】: 目的:β1,3半乳糖基转移酶7(β3GalT7)是β3糖基转移酶大家族的一个新成员。蛋白质O-糖基化的改变与细胞黏附和肿瘤转移密切相关,有研究提示该酶可能与肿瘤的生物学行为有关。本文通过上调及抑制β3GalT7基因在HL60细胞中的表达,来探讨β3GalT7基因对HL60细胞的生长、增殖、侵袭能力等方面的影响。 方法:通过脂质体介导将重组载体pEGFP-C1, pEGFP-C1-T7-Sense, pEGFP-C1-T7-Antisense)转染入HL60细胞;利用MTT法检测细胞增殖情况的变化,并用流式细胞仪分析各细胞株的细胞周期的改变以及Transwell侵袭实验检测其对HL60细胞侵袭转移能力的影响;运用RT-PCR和Western blot检测浸润转移相关功能基因TGFβ1、MMP2、MMP14在mRNA水平和蛋白质水平的表达变化。将随机分成HL60组、HL6O-0组、HL60-S组和HL60-AS组的裸鼠(BAIB/c)分别给予各亚细胞株皮下接种以构建人粒细胞白血病HL60细胞异种移植瘤,并观察致瘤时间和瘤的大小,组间对照进行统计学分析;对瘤组织进行病理形态学观察,并通过半定量RT-PCR检测瘤组织中β3GalT7的表达。 结果:随着β3GalT7基因表达的增高,细胞生长增殖加快,反之亦然。体外穿膜实验结果显示转染正义组细胞侵袭能力高于对照组(P0.05),反之亦然。随着β3GalT7表达上调,MMP2、MMP14在mRNA和蛋白质水平的表达上调;随着β3GalT7表达下调,MMP2、MMP14在mRNA水平和蛋白质水平的表达下调。而β3GalT7和TGFβ1的表达则呈负相关。接种HL60-S细胞的裸鼠成瘤时间明显缩短,成瘤率为100%,肿瘤终体积和重量均明显大于接种HL60细胞组的裸鼠(P0.01);接种HL60-AS细胞裸鼠成瘤时间明显延长,成瘤率为80%,肿瘤终体积和重量均明显小于接种HL60细胞组裸鼠(P0.01);HL60-0细胞组和HL60细胞组肿瘤体积和重量比较无明显差异(P0.05)。 结论:β3GalT7基因对HL-60细胞株体内体外增殖和侵袭能力有一定的影响。具体机制有待深入研究。


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