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依达拉奉对重症急性胰腺炎大鼠脑损伤保护作用的实验研究

王小红  
【摘要】: 第一部分重症急性胰腺炎并发脑损伤的动物模型制作 目的建立易复制、重复性好的重症急性胰腺炎(SAP)并发脑损伤动物模型,为实验的第二部分和第三部分提供实验动物。方法60只雄性SD大鼠随机分为六组:正常对照组3h、6h、12h组及SAP组术后3h、6h、12h组,每组各10只。以0.1ml/min匀速逆行胰管注入5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g)建立SAP并发脑损伤大鼠模型。牛磺胆酸钠注射后3h、6h、12h检测大鼠血浆淀粉酶、脑组织含水量、脑组织微血管内聚集和附壁的白细胞计数以及胰腺和脑组织镜下病理学改变。结果血浆淀粉酶、胰腺组织镜下病理学评分及脑组织微血管内白细胞聚集及附壁计数各时间点水平均比正常对照组显著升高(P﹤0.01),而脑组织含水量及脑组织镜下病理学评分6h及12h其水平明显高于正常对照组(P﹤0.01~0.05);SAP组3h、6h、12h比较,上述各项指标其水平随着时间的延长均逐步升高(P﹤0.01~0.05);SAP组6h及12h脑组织镜下病理学评分与胰腺组织镜下病理学评分呈正相关(r为0.72,P﹤0.01)。结论牛磺胆酸钠诱导SAP并发脑损伤的大鼠模型容易复制,重复性好,建模成功。 第二部分炎症介质在大鼠重症急性胰腺炎并发脑损伤中的作用 目的探讨炎症介质在大鼠SAP相关性脑损伤中的作用。方法60只雄性SD大鼠随机分为六组:正常对照组3h、6h、12h组及SAP组术后3h、6h、12h组,每组各10只。以0.1ml/min匀速逆行胰管注入5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g)建立SAP并发脑损伤大鼠模型。牛磺胆酸钠注射后3h、6h、12h应用ELISA法检测脑组织丙二醛(MDA)含量、血浆及脑组织肿瘤坏死因子-a (TNF-a)的水平,应用RT-PCR法测定脑组织核因子-κB (NF-κB)p65 mRNA的表达水平。结果SAP组各时点脑组织MDA含量、血浆及脑组织TNF-a的水平、脑组织NF-κB p65 mRNA的表达水平与正常对照组比较均显著升高(P﹤0.01~0.05);SAP组3h、6h、12h比较,上述各项指标其水平随着时间的延长均逐步升高(P﹤0.01~0.05);SAP组6h及12h脑组织MDA含量、TNF-a水平、NF-κB p65 mRNA的表达水平及脑组织镜下病理学评分四者之间均呈正相关(r分别为0.77、0.82、0.78、0.84、0.82、0.70,P﹤0.01)。结论炎症介质自由基、TNF-a、NF-κB p65在SAP相关性脑损伤的发生、发展中发挥了重要作用。 第三部分依达拉奉对重症急性胰腺炎大鼠脑损伤的保护作用 目的研究依达拉奉对SAP大鼠脑损伤的保护作用及其可能机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为六组:SAP组术后3h、12h组、处理组3h、12h组及阳性对照组3h、12h组,每组各10只。分别在术后第3h、12h采集血液、胰腺组织、脑组织标本,观察血浆淀粉酶、胰腺组织及脑组织镜下病理学变化,应用ELISA法检测血浆、脑组织TNF-a的水平,测定脑组织含水量、MDA含量及微血管内聚集和附壁的白细胞计数。应用RT-PCR法检测脑组织NF-κB p65 mRNA的表达情况。结果处理组12h及阳性对照组12h血浆淀粉酶、胰腺组织镜下病理学评分、脑组织微血管内聚集和附壁的白细胞计数、脑组织含水量、脑组织镜下病理学评分、血浆及脑组织TNF-a的水平、脑组织MDA含量及脑组织NF-κB p65 mRNA其水平均比SAP组12h明显降低(P﹤0.01~0.05)。上述各项指标处理组12h与阳性对照组12h相比均无明显差异(P﹥0.05)。结论依达拉奉可能通过清除SAP大鼠脑自由基,抑制NF-κB的激活,减少TNF-a等细胞因子的生成,抑制炎症反应,从而对SAP大鼠脑损伤起保护作用。


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