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曲古抑菌素A对人胃癌细胞生长调控及顺铂增敏作用的实验研究

毕慧锋  
【摘要】: 目的观察曲古抑菌素A(Trichostatin A, TSA)在体外对人胃癌细胞株SGC-7901的生长调控作用及顺铂(Cisplatin, DDP)化疗的增敏作用,初步探讨其作用机制。 方法(1)体外培养人胃癌细胞株SGC-7901。(2)MTT法检测不同时间与不同浓度下TSA对细胞的增殖抑制作用。(3)实验分为阴性对照、400nmol/L、800nmol/L、1600nmol/L TSA四组,作用48h后,流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布情况;RT-PCR法检测细胞bcl-2、caspase-3 mRNA表达情况;免疫组化(SP)法检测bcl-2、caspase-3蛋白表达情况。(4)实验分为单纯DDP、TSA+DDP两组,MTT法检测两组细胞增殖抑制情况;克隆形成实验检测两组细胞克隆形成率;Hochest 33258染色法检测两组细胞凋亡情况。 结果(1)MTT法检测TSA能抑制胃癌细胞株SGC-7901生长,具有明显时间-效应和剂量-效应依赖关系。(2)TSA作用细胞48h后,流式细胞仪检测细胞凋亡明显,G0/G1期细胞比例上升,S期比例下降,呈浓度依赖性(P0.05);RT-PCR检测发现细胞中bcl-2 mRNA随TSA浓度增加表达下降,caspase-3 mRNA随TSA浓度增加表达增加(P0.05);免疫组化(SP)法示细胞中bcl-2蛋白随TSA浓度升高而降低,caspase-3蛋白随TSA浓度升高而增加(P0.05)。(3)MTT法检测发现40nmol/L TSA+DDP组对胃癌细胞生长抑制率较单纯DDP组高(P0.05);40nmol/L TSA+DDP组细胞克隆形成率较单纯DDP组低(P0.05);Hochest 33258染色法示40nmol/L TSA+DDP组细胞凋亡情况较单纯DDP组更明显。 结论TSA对人胃癌细胞株SGC-7901具有明显生长抑制作用,呈时间与剂量依赖性;TSA能诱导胃癌细胞发生凋亡,并将细胞周期阻滞于G0/G1期;TSA对胃癌细胞增殖抑制与诱导凋亡作用可能与其下调bcl-2和上调caspase-3表达有关;一定浓度TSA与DDP联用后,可增强胃癌细胞株SGC-7901对DDP化疗的敏感性。


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