收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

5-氟尿嘧啶联合吉美嘧啶对肠癌细胞恶性表型的影响及机制研究

周玲娜  
【摘要】:[背景与目的]结直肠癌(Colorectal cancer)是全球最常见的恶性肿瘤之一,我国结直肠癌的发病率和死亡率分别位于恶性肿瘤的第3位和第4位。近年来,虽然在结直肠癌的治疗方法上有明显提高,但是5年生存率仍低于60%,结直肠癌的侵袭转移是影响患者生存和预后的主要因素。肿瘤的侵袭转移过程复杂,众多信号分子及信号传导通路在其中发挥了重要作用。其中JAK2/STAT3信号通路广泛表达于不同类型的细胞和组织中,STAT3的持续激活与多种恶性肿瘤的发生发展相关。5-氟尿嘧啶(5-FU)是治疗晚期胃肠道肿瘤的基本化疗药物,但5-氟尿嘧啶半衰期短,直接影响抗癌效应。替吉奥(S-1)是新一代氟尿嘧啶类药物,是以替加氟为药物主体,加入生化调节剂吉美嘧啶(CDHP),奥替拉西钾(OXO)组成的口服复方制剂。近年来,替吉奥治疗晚期胃癌的分子机制报道甚多,但是关于结直肠癌的机制研究却很少。在本研究中,5-FU和CDHP以1:0.4摩尔比联合使用,模拟S-1药物在细胞实验中的作用,以此来观察其对结直肠癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响,并探讨了JAK2/STAT3信号通路在其中的作用。[研究方法]1.选用不同浓度的5-FU、CDHP、JAK2抑制剂AG490分别处理常规培养的结直肠癌细胞株Lo Vo和HT29,应用CCK8实验检测不同药物治疗后对结直肠癌细胞增殖活力的影响。2.选用CDHP、5-FU、S-1(5-FU+CDHP)分别处理结直肠癌细胞24h,通过CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验、细胞划痕实验,检测在不同药物干预下对结直肠癌细胞增殖能力、克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力的影响。3.选用CDHP、5-FU、S-1(5-FU+CDHP)分别处理结直肠癌细胞24h,检测结直肠癌细胞内JAK2/STAT3信号通路及其下游分子Bcl-XL和Survivin的m RNA和蛋白表达水平。4.选用S-1(5-FU+CDHP)、S-1(5-FU+CDHP)+AG490分别处理结直肠癌细胞24h,通过CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验和流式细胞术,检测在不同药物干预下,对结直肠癌细胞增殖能力、克隆形成能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡水平的影响。5.选用S-1(5-FU+CDHP)、AG490、S-1(5-FU+CDHP)+AG490分别处理结直肠癌细胞24h,应用qPCR和Western Blot技术,检测结直肠癌细胞内JAK2/STAT3信号通路及其下游分子Bcl-XL和Survivin的m RNA和蛋白表达水平[研究结果]1.CCK8实验结果显示,与空白对照组相比,CDHP对细胞增殖能力无统计学差异(P0.05);5-FU对结直肠癌细胞的增殖抑制作用呈时间、浓度依赖性,5-FU处理细胞24h,48h和72h的IC50分别为178.63μM,79.87μM,51.82μM(Lo Vo)和240.72μM,120.29μM,76.44μM(HT29),选用40μM 5-FU浓度进行后续实验,因以5-FU:CDHP=1:0.4模拟S-1体外细胞实验浓度,故CDHP选用16μM浓度进行后续实验;JAK2抑制剂AG490处理细胞24h后,其IC50为103.88μM(Lo Vo)和124.3μM(HT29),选用50μM浓度进行后续实验。2.CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验和细胞划痕实验表明,CDHP组、5-FU组及S-1(5-FU+CDHP)组处理细胞24h后,与空白对照组相比,CDHP组无统计学差异(P0.05)。与5-FU组相比,S-1(5-FU+CDHP)组增殖能力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力均下降(P0.05)。3.qPCR和Western Blot结果显示,CDHP组、5-FU组及S-1(5-FU+CDHP)组处理细胞24h后,与空白对照组相比,CDHP组无统计学差异(P0.05);5-FU组、S-1(5-FU+CDHP)组中Bcl-XL、Survivin的m RNA水平均表达下降;5-FU组、S-1(5-FU+CDHP)组p-JAK2、p-STAT3、Bcl-XL、Survivin蛋白表达均下降。与5-FU组相比,S-1(5-FU+CDHP)组Bcl-XL、Survivin较5-FU组m RNA表达和蛋白水平明显下降。4.CCK8实验、平板克隆形成实验、Transwell侵袭实验和流式细胞术结果表明,S-1(5-FU+CDHP)、AG490、S-1(5-FU+CDHP)+AG490处理细胞24h后,S-1(5-FU+CDHP)+AG490组较S-1组或AG490组细胞增殖能力、克隆形成能力和侵袭能力显著下降,细胞凋亡率明显增加。5.qPCR和Western Blot结果显示,S-1(5-FU+CDHP)、AG490、S-1(5-FU+CDHP)+AG490处理细胞24h后,S-1(5-FU+CDHP)+AG490组较S-1组或AG490组相比,Bcl-XL、Survivin的m RNA表达和p-JAK2/t-JAK2、p-STAT3/t-STAT3、Bcl-XL、Survivin蛋白水平均明显下降。[结论]1.5-氟尿嘧啶联合吉美嘧啶对结直肠癌细胞的恶性表型抑制具有协同作用。2.5-氟尿嘧啶联合吉美嘧啶可能通过抑制JAK2、STAT3磷酸化以及Bcl-XL、Survivin蛋白表达来调控结直肠癌细胞恶性生物学行为。3.靶向抑制JAK2/STAT3信号通路可增强5-氟尿嘧啶联合吉美嘧啶对结直肠癌细胞的抑制作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前16条
1 张玉峰;叶坤英;张广玉;刘新爱;;结直肠癌细胞周期的研究[J];中国地方病防治杂志;2016年11期
2 苟青;何先东;吴胜海;;双氢青蒿素对人结直肠癌细胞的体外作用[J];肿瘤药学;2011年06期
3 杨光之,丁彦青,李祖国,张进华;Kail/CD82在转移能力不同结直肠癌细胞系的表达[J];中华病理学杂志;2003年05期
4 张义平;郑美蓉;殷嫦嫦;吴萍;周许峰;吴建芳;周小鸥;;热休克诱导结直肠癌细胞外泌体的免疫效应[J];肿瘤防治研究;2011年07期
5 胡祥;程勇;王吉明;刘彬;;结直肠癌细胞系肿瘤干细胞相关亚群初步研究[J];重庆医科大学学报;2008年12期
6 杨祖立;康亮;黄美近;王磊;彭俊生;向军;兰平;汪建平;;结直肠癌细胞中脾酪氨酸激酶基因甲基化状态和表达的关系[J];中国病理生理杂志;2008年09期
7 Baskaranathan S. ,Philips J. ,McCredden P. ,Solomon M.J.,王志宇;腹膜表面游离结直肠癌细胞:与病理类型和生存率的关系[J];世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册);2005年06期
8 白雪;于波;苑树俊;左富义;孙亮;;洛铂和奥沙利铂对结直肠癌细胞系生物学行为影响的实验研究[J];临床肿瘤学杂志;2009年08期
9 崔澂;傅占江;贡树基;胡建军;李金生;郑文广;;结直肠癌细胞所致免疫抑制及免疫抑制分子分泌模式的研究[J];白求恩军医学院学报;2012年01期
10 耿焱;姜泊;王伟;马强;;四分子交联体5表达上调对结直肠癌细胞转移能力的促进作用观察[J];解放军医学杂志;2010年06期
11 贾健锋;贺长林;;人结直肠癌细胞系的成球培养方法及转移侵袭能力研究[J];世界科技研究与发展;2013年06期
12 王艳俊;蒋永新;刘珊;王红;;同期放化疗诱导人结直肠癌细胞发生上皮-间质转化[J];临床与病理杂志;2017年01期
13 张晓槟;孙凯;雷尚通;钟育波;邓海军;区文弢;吴承堂;;Anti-microRNA-221通过上调PTEN蛋白表达增加结直肠癌细胞的放射增敏性[J];南方医科大学学报;2013年05期
14 王艳俊;蒋永新;刘珊;付凤莲;王红;;上皮–间质转化在蒿甲醚逆转结直肠癌细胞放化疗抵抗中的作用[J];临床与病理杂志;2017年02期
15 张继民,刘明姬,溝井贤幸,椎葉健一,佐々木嚴,松野正纪;单核细胞增强5′-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性[J];中华胃肠外科杂志;2003年06期
16 杨晓群;葛慧娟;汪佳祺;余宏宇;何金;刘惠敏;蔡在龙;;pcDNA3.1-Annexin A1真核表达载体对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响[J];第二军医大学学报;2010年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 熊伟;蒋永新;刘珊;王红;谢青;;体外同期放化疗抵抗结直肠癌细胞模型的建立及其长链非编码RNA表达谱的变化[A];全国肿瘤流行病学和肿瘤病因学学术会议论文集[C];2015年
2 林洁;李婷婷;王博;金贺;丁彦青;;转移相关基因Tiam1启动子高甲基化抑制结直肠癌细胞生长与侵袭[A];第九届全国肿瘤转移学术大会暨2011年黑龙江省医学会肿瘤学年会摘要集[C];2011年
3 张月宁;鲁重美;吴海燕;陈原稼;;S100P在人结直肠癌中表达的临床意义及其对结直肠癌细胞生物学行为的影响[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议教育集[C];2006年
4 胡若磊;张素梅;周青;汪渊;;褪黑素对结直肠癌细胞RKO增殖和迁移抑制作用的初步研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会-2011年学术交流会论文汇编[C];2011年
5 常环环;李文帅;杨姝;孙海梅;季凤清;吴波;孙婷怡;周德山;;白藜芦醇通过上调miR-34c表达抑制结直肠癌细胞的增殖和侵袭[A];中国解剖学会2015年年会论文文摘汇编[C];2015年
6 汪桂华;王惠民;;结直肠癌细胞APRIL的异常表达促进肿瘤的生长和转移[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年
7 刘莉;丁彦青;;Tiam1基因表达沉默后对结直肠癌细胞蛋白表达谱的影响[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议教育集[C];2006年
8 朱淑珍;阮文静;来茂德;;IGFBP7与结直肠癌细胞SW620分化的相关性研究[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年
9 刘玉辉;;C-FOS对结直肠癌细胞HCT-116的影响[A];中国肿瘤内科进展 中国肿瘤医师教育(2014)[C];2014年
10 宋歌;程英升;;RGD-Gd荧光纳米探针在体外结直肠癌细胞的荧光及MRI显像评价[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王刚;mtSSB介导的线粒体发生通过激活端粒酶促进结直肠癌细胞生长[D];中国人民解放军空军军医大学;2018年
2 程利鹏;肝炎微环境中IRF-1调控结直肠癌细胞let-7a簇表达降低肝转移能力的机制研究[D];中国人民解放军海军军医大学;2018年
3 穆昱;FAM83D对结直肠癌细胞生物学功能的影响及其分子机制的初步研究[D];郑州大学;2018年
4 黄培;DDX46在肠癌中的生物学功能及辐射敏感性研究[D];苏州大学;2016年
5 王运刚;粒细胞样髓源性抑制细胞来源exosomes调节结直肠癌细胞干性的机制研究[D];江苏大学;2018年
6 许颖华;P53抑制Fascin蛋白活化进而抑制结直肠癌转移的分子机制研究[D];浙江大学;2018年
7 刘姣;MORC2下调NDRG1在结直肠癌细胞恶性表型中的作用及机制[D];中国医科大学;2018年
8 罗云春;miR-31靶向作用RASA1对结直肠癌细胞的影响[D];武汉大学;2016年
9 夏术森;MicroRNA-22/Sp1负反馈环路调控结直肠癌细胞生长和转移的作用机制研究[D];重庆医科大学;2017年
10 任辉;同源盒基因的表达调控在结直肠癌细胞分化诱导过程中的作用机理研究[D];吉林大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 卢新泉;MEK5小分子抑制剂对K-ras基因突变型结直肠癌细胞生物学行为的影响[D];广州中医药大学;2017年
2 成海春;siRNA-Ambra1促进结直肠癌细胞的增殖和迁移[D];广州医科大学;2018年
3 周玲娜;5-氟尿嘧啶联合吉美嘧啶对肠癌细胞恶性表型的影响及机制研究[D];东南大学;2018年
4 崔垄臻;G9A调控结直肠癌细胞生长及其相关机制研究[D];河南大学;2018年
5 张朋飞;B7-H3分子介导的结直肠癌细胞耐药机制的探究[D];江南大学;2018年
6 任延松;TUSC3基因调控结直肠癌细胞干性和耐药性的作用及分子机制研究[D];南方医科大学;2018年
7 李月侨;下调FOXK1表达对结直肠癌细胞系SW480基因表达谱的影响[D];南方医科大学;2018年
8 胡水清;过表达Twist1促进结直肠癌细胞SW620获得多药耐药性的研究[D];遵义医学院;2018年
9 朱德华;ZC3H13通过抑制Ras-ERK信号通路调控结直肠癌细胞的增殖和侵袭[D];中国医科大学;2018年
10 吴延婷;miR-320a对结直肠癌细胞生物学行为的影响及下游靶基因鉴定[D];昆明理工大学;2018年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 本报记者 丁学汉;“锁住”癌变“饿死”肿瘤[N];大庆日报;2011年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978