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哮喘大鼠下丘脑室旁核内P物质在神经内分泌调制中的作用及机制探讨

刘悦  
【摘要】:【目的】探讨哮喘大鼠下丘脑室旁核(PVN)内P物质(SP)在哮喘发病中的神经内分泌调制作用。 【材料与方法】取健康雄性SD大鼠162只,随机分成正常对照组和哮喘组。哮喘组用卵蛋白(OA)腹腔注射致敏,建立哮喘模型后,静脉注射OA激发哮喘急性发作,然后PVN注药,按PVN注射药物的不同分为OA+NS组、OA+SP组、OA+S0145(SPR阻断剂)组、OA+S0145+SP组(n=6)。采用中枢立体定位及核团微量注射技术在哮喘大鼠下丘脑室旁核内微量注射SP和/或S0145,用Powerlab/400生物信号采集系统记录肺功能指标;用放射免疫分析方法(RIA)检测正中隆起(ME)中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和外周血中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量及PVN内SP含量;用免疫组织化学方法、葡萄糖氧化酶-DAB-镍染色和计算机图像分析等技术检测肺内神经源性炎性介质降钙素基因相关肽样免疫反应(CGRP-IR)阳性物的含量、Fos蛋白在PVN和海马内的表达。 【结果】 1)与正常对照组相比,哮喘大鼠PVN内SP含量明显增多;海马、PVN出现大量Fos蛋白表达。静脉注射OA生理盐水溶液(8mg·kg-1)激发哮喘发作后,肺功能指标明显改变,出现哮喘活动表现,即:膈肌放电频率(EMGdi frenquency)、呼/吸(TE /TI)和气道阻力(RAW)增加,膈肌放电积分(EMGdi integral)、每分通气量(MVV)、肺顺应性(cL)减小;放射免疫分析方法(RIA)检测结果表明,哮喘急性发作后,外周血中CORT、ACTH及正中隆起组织中CRH的含量明显降低;免疫组织化学研究表明,哮喘急性发作后,支气管、肺内有较密集的CGRP样免疫反应(CGRP-IR)阳性物分布;与正常对照组相比,差异有统计学意义。2)哮喘大鼠静脉注射OA(8mg·kg-1)激发哮喘发作后,PVN内微量注射SP,与OA+NS组相比,膈肌放电频率(EMGdi frenquency)、呼/吸(TE /TI)和气道阻力(RAW)增加,膈肌放电积分(EMGdi integral)、每分通气量(MVV)、肺顺应性减小(cL);外周血中CORT、ACTH及正中隆起组织中CRH含量明显降低;支气管、肺内CGRP-IL阳性物数量显著增多,差异有统计学意义。3)哮喘大鼠静脉注射OA(8mg·kg-1)激发哮喘发作后,PVN内微量注射SPR阻断剂S0145,与OA+NS组相比,肺功能明显改善;外周血中CORT、ACTH及正中隆起组织中CRH含量明显升高;支气管、肺内CGRP-IL阳性物数量显著减少,差异有统计学意义。4)哮喘大鼠如果用1μg S0145预处理后,PVN注射8ug SP,则SP的上述效应可被阻断。 【结论】大鼠PVN内SP可通过下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)参与哮喘发作,可能与其改变组织或血液中的CRH、ACTH、CORT含量进而增加肺部神经源性炎症介质CGRP生成有关。


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