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环孢菌素A联合雌激素受体抑制剂逆转K562/A02细胞多药耐药的研究

鲍文  
【摘要】: 目的:本课题旨在研究环孢菌素A(CsA)联合雌激素受体抑制剂雷洛昔芬(raloxifene)单独及联合应用对人慢性粒细胞白血病急性红白血病变细胞株K562及其耐药细胞株K562/A02 P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响,以探讨它们逆转多药耐药的作用机理,为环孢菌素A和雌激素受体抑制剂雷洛昔芬作为耐药逆转剂的临床应用提供理论依据。 方法: (1)采用甲基四唑蓝法(MTT)法检测雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA( 1mg/L)单独及联合作用于K562细胞和K562/A02细胞一定时间柔红霉素(DNR)对细胞的半数抑制量;(2)采用半定量PCR(RT-PCR)法检测K562细胞、雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA( 1mg/L)单独及联合作用于K562/A02细胞一定时间细胞多药耐药基因(mdr1基因)mRNA表达水平;(3)采用流式细胞仪(FCM)检测K562细胞、雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA( 1mg/L)单独及联合作用于K562/A02细胞一定时间细胞膜上P-gp的表达。(4)FCM检测K562细胞、雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA( 1mg/L)单独及联合作用于K562/A02细胞一定时间细胞内DNR浓度。(5)FCM检测雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA( 1mg/L)单独及联合作用于K562/A02细胞一定时间细胞的凋亡。 结果:(1)逆转剂处理前后DNR对K562细胞和K562/A02细胞的毒性作用:①K562/A02、K562细胞IC50值分别为23.51和0.29mg/L;②雷洛昔芬及CsA单独联合处理K562细胞IC50值无明显影响;③雷洛昔芬及CsA单独处理K562/A02细胞的IC50值分别为5.98、8.15 mg/L,两药联合作用增强IC50值为3.68mg/L;(2)未加逆转剂K562/A02耐药株细胞48h凋亡率为9.73%;K562/A02经CsA(1mg/L),雷洛昔芬(2.5mg/L)及CsA(1mg/L) +雷洛昔芬


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