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聚乙二醇衍生物的合成及其对胰蛋白酶的化学修饰

吴进  
【摘要】:聚乙二醇衍生物由于具有良好的溶解性、生物相容性和免疫原性而被广泛应用于生化和医药领域。本论文通过不同的合成方法,利用不同分子量的聚乙二醇(PEG)和甲氧基聚乙二醇(mPEG)为原料,制备了不同类型的聚乙二醇衍生物。采用红外光谱仪和核磁共振仪对合成产物进行表征,各步产物的红外表征都与其结构一致,且分枝型PEG的~1H NMR的表征结果与其结构吻合。所合成的衍生物有很多用途,为了评价它们效果,论文中将其作为修饰剂以琥珀酰亚胺活性酯的形式在适当的条件下修饰胰蛋白酶,并对修饰酶进行酶学表征,测定酶活性、热稳定性、pH值稳定性和K_m值,结果与原酶进行比较。数据表明:特定类型的修饰剂适度的修饰可使胰蛋白酶的活性增加,但大部分修饰酶的活力都比原酶要低;热稳定性数据表明由于偶联PEG修饰剂使得胰蛋白酶热稳定性得到显著改善;胰蛋白酶的化学修饰并没有改变酶的最适pH值;修饰酶的K_m值有所增大。


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