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桑椹防腐技术研究和桑树果用性状关联分析

张健  
【摘要】:桑椹(或者桑葚)又叫桑果、桑枣,是桑树的成熟果实,桑椹属于浆果类,生物活性物质含量丰富,营养价值高,被誉为“21世纪最佳的保健果品”之一。采前桑椹菌核病和采后果实腐生性病害是影响桑椹产量和品质重要原因之一,目前果桑品种选育也是桑树新品种选育的热点,因此本文主要对桑椹病原真菌的分离鉴定,生防微生物对桑椹保鲜及品质影响等桑椹防腐技术,以及桑椹果用性状分子标记进行了研究:从桑园采集的桑椹菌核病菌核在土壤中培养产生三种不同形状的子实体,将不同形状的子实体分离体通过真菌ITS1/ITS4引物扩增测序,鉴定为桑实杯盘菌(Ciboria shiraiana),核地杖菌(Scleromitrula shiraiana)和肉阜状杯盘菌(Ciboria carunculoides strain);从采后腐烂桑椹上分离获得三株桑椹致腐性真菌,分别是葡萄孢属(Botrytis spp)霉菌,匐枝根霉(Rhizopus stolonifer spp.)菌和毛霉属(Mucor spp.)霉菌;研究了TR16、TR66和BS对桑椹致腐菌具有拮抗活性,结果表明TR16和TR66比桑椹致腐菌空间定殖能力≧50%,对峙培养对致腐菌菌丝生长抑制率为60%-80%;研究了TR16,TR66和BS的发酵滤液和孢子悬液采后处理对桑椹品质的影响,结果表明壳聚糖处理桑椹后显著性抑制采后水果腐烂率、失重率、可溶性固形物和抗坏血酸含量的损失,花青素,黄酮,总酚抗氧化物质的含量和抗氧化活性比对照组显著性的提高。以中桑5801为材料,研究了生防菌木霉对桑椹菌核病的防控效果:从桑椹菌核病发病桑园桑树根围土壤中分离得到48株木霉,经鉴定分属于木霉组、厚基孢组、长枝组和肉座组;通过对峙培养法从48株木霉中筛选出20株对桑椹菌核病病原菌具有较强空间竞争能力的菌株;采用玻璃纸法研究这20株木霉菌株的代谢物质对桑椹菌核病病原菌生长的抑制作用;从中筛选出3株不同种、拮抗潜能最好的木霉菌株进行桑椹菌核病田间防效试验,发现Tr16、Tr50木霉发酵液对桑椹菌核病的防控作用较好;在桑椹采前喷施壳聚糖(CTS)、冠菌素(COR)、桑黄多糖、木霉发酵液等诱导子,发现4种诱导子处理对桑椹果实酚类和黄酮含量的积累有一定影响,而对总糖的含量影响不大,4种诱导子对桑椹总多酚的效果为Tr16发酵原液0.5 g/L CTS0.01μmol/L COR0.1 g/L桑黄多糖CK,4种诱导子对桑椹总黄酮的效果为Tr16发酵原液0.1g/L CTS0.01μmol/L COR0.1 g/L桑黄多糖;利用4种外源诱导子处理新鲜桑椹,研究其对果实贮藏品质的影响,结果表明:Tr16木霉发酵原液、0.1 g/L壳聚糖处理,0.001μmol/L冠菌素处理能够很好的保持桑椹果实的糖含量而桑黄多糖对桑椹糖含量的保持较短,木霉发酵液稀释10倍和原液处理、0.1g/L壳聚糖处理、冠菌素处理能够较好的保持总黄酮含量。利用丰富的果桑资源,构建了93份果桑资源ISSR分子指纹图谱,分析了果桑资源的遗传多样性及亲缘关系;利用TASSEL软件中的混合线性模型(MLM),进行标记和性状的关联分析,在p0.01的情况下,共有24个位点与4个果用性状性状相关联,表型变异解释率7.24%-28.56%。


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