中药野马追的化学成分分析研究

【摘要】：野马追是菊科植物轮叶泽兰Eupatorium lindleyanum DC的全草，含有黄酮类、生物碱、挥发油、香豆精等。中医药理认为本品苦、平，具有清热解毒、祛痰、定喘、降血压等功效，用于治疗慢性气管炎、支气管炎、高血压等疾病。野马追的主要产地为江苏盱眙。有关野马追化学成分的分析报道较少，本论文采用现代分析方法对它的化学成分进行了分析。 采用干法和湿法消解，电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP—AES)同时测定了野马追全草和花蕾中无机元素。干法先将样品于600℃高温灰化，再用浓硝酸溶解，湿法用HNO_3—HClO_4直接消解。结果表明：盱眙野马追中含有Fe、Al、Si等多种无机元素，其含量占全草的3.45％左右。其中Fe、Cu、Mn、Zn、Sr、Ni、Cr等是人体必需微量元素。 用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了江苏地产药材野马追及其花蕾中的总氨基酸和游离氨基酸。用邻苯二甲醛(OPA)与一氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化反相高效液相色潜仪，liozospheze C_(18)柱，pH=7.2的醋酸钠缓冲溶液和甲醇为流动相，流速为1.0ml／min，荧光检测器，波长为Ex=340nm Em=450nm，样品中的氨基酸在30min内得到分离和检测。结果表明：野马追及其花蕾中含半胱氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等17种氨基酸和游离氨基酸，总氨基酸含量分别为2.396％和6.510％，游离氨基酸含量分别1.846‰和5.079‰，半胱氨酸(cys)和谷氨酸(glu)含量较高，其中7种为人体必需氨基酸。 用气相色谱-质谱法对野马追花蕾的挥发油进行了化学成分的分析。采用水蒸气蒸馏法从野马追花蕾中提取挥发油。用不同类型的毛细管柱进行气相色谱分离，确定最佳分析条件为：DB-5玻璃毛细管色谱柱(商业用毛细管柱)30m×φ0.32mm，柱温从60℃(保持6 min)程序升温至280℃，10℃／min；检测器为FID；汽化室及检测室温度为250℃；载气为高纯氮，60ml／min，分流比为60：1。用气相色谱-质谱法对其化学成分进行鉴定，共鉴定了19个成分，用归一化法测定各组分的相对百分含量，占挥发油总成分的57.13％。 用95％的乙醇作为提取剂，分别采用冷浸法、加热回流法和超声法三种提取 南京工业大学硕士论文 方法提取了野马追中的总黄酮，用芦丁作为对照品，硝酸铝一亚硝酸钠紫外分光 光度法测定野马追中总黄酮含量。在选定的实验条件下，芦丁的浓度和吸光度呈 良好的线性关系，标准曲线的相关系数为0.9999，测定的相对标准偏差为1.27一 1.63%，平均回收率为98.20%。结果显示:野马追中含大量黄酮类化合物，含量 在2%左右;不同提取方法比较，加热回流法黄酮的浸出率最高。 用和提取野马追总黄酮相似的方法，以乙醇作为提取剂，提取野马追中的化 学成分，然后用气相色谱一质谱联用法分别对其乙醇提取物的化学成分进行了分 析，给出了33个典型成分的相对百分含量和其中26个化合物的参考结构。通过 对三种提取方法的气相色谱一质谱联用分析总离子流色谱图的峰位置进行比较， 说明乙醇加热回流法和超声提取法对化合物的结构不造成破坏。