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乐东拟单性木兰、华木莲、红叶石楠‘红罗宾’的组织培养及快繁技术研究

邓小梅  
【摘要】:本研究以国家二级保护、濒危树种乐东拟单性木兰Parakmeria lotungensis(Chun et C.Tsoong)Law,江西特有的国家一级保护树种、木兰科单种属华木莲Sinomanglietia glauca Z.X.Yu et Q.Y.Zheng及现行珍稀彩叶观赏树种红叶石楠‘红罗宾’Photinia×fraseri 'Red Robin'为试验材料,利用细胞全能性及其发育调控理论,建立三树种的组织培养再生体系。通过细胞学观察及与生根相关的酶活性分析,探讨红叶石楠的组培再生机理。探索生物防腐剂对组培过程中污染的抑制作用。结合设施园艺栽培技术,有针对的研究林木组培规模化育苗技术体系。本研究取得的主要结果: 1、以成年树嫩枝为外植体建立了乐东拟单性木兰的组培再生系统。10月上旬采取嫩枝作外植体,经4℃冰箱低温处理5~7d,有利于降低褐化和污染率,提高诱导率。试验筛选以MS为基本培养基,较好增殖培养基为:MS+6-BA0.2mg/L(单位下同)+IBA0.05+30g/L糖+7g/L卡拉胶;pH值范围为5.5~6.5;光照强度控制在10001x左右;继代周期以4周为宜,继代9次以后可进入快速、稳定增殖阶段,增殖系数可达3.5以上。1.5~2cm长的不定芽放入1/2MS+NAA3+6-BA0.1的根诱导培养基中暗培养15d后,转入不加任何激素的1/2 MS根形成培养基中,12d左右可出根,生根率达15~25%。 首次将物质E应用于组培苗的根诱导。在以上根诱导培养基上添加物质E,暗培养10d后,转入根形成培养基中,5d左右可出根,生根率达77%,生根率提高了50%以上,生根时间缩短10d左右,表现出对乐东拟单性木兰生根很大的促进作用。 2、初步建立了华木莲组培再生系统。3月份采取即将萌动的休眠芽和10月上旬采集生长旺盛的嫩枝,有利于不定芽的诱导。接种后材料需15d接转一次。试验筛选以M_木为基本培养基,较好增殖培养基为:M_木+6-BA0.5+IBA0.05+30g/L糖+7g/L卡拉胶;pH值调至5.8;光照强度控制在10001x左右;继代周期以10d为宜。分化出的不定芽放入1/2MS+NAA3+6-BA0.1(去卡拉胶,加珍珠岩或蛭石)的根诱导培养基中,暗培养10-12d后,转入不加任何激素的1/2 MS根形成培养基中,12-15d左右可出根。 3、建立了一套经济、高效的红叶石楠组培规模化育苗技术体系,繁育组培商品苗150万株。 以红叶石楠当年生半木质化嫩枝为材料,对红叶石楠进瓶诱导、增殖培养、生根培养、瓶苗移栽的主要影响因子进行了系统的研究。较佳的诱导培养基为:MS+KT1.0+NAA0.2+30g/L糖+7g/L卡拉胶;较好的增殖培养基为:MS+6-BA2.0+KT0-5+IBA0.2+3g/L白糖+7g/L卡拉胶,最高增殖系数可达9.3;适宜的光照为:3-5d的暗培养与1000-1500 1X\12h/d光照培养相结合,平均每瓶增殖苗中有效芽可达32棵。M_木基本培养基、生长素NAA有利于红叶石楠根的诱导,在M_木+NAA0.3的生根培养基上,20d以后生根率达66%。 将物质E应用于红叶石楠组培苗的根诱导,表现出对红叶石楠生根很大的促 进作用。在M木+NAA 0.3的生根培养基上,添加E物质69/L后,红叶石楠出 根整齐而快、10天内生根率达98.5%,比对照提高了30多个百分点,完成生根 时间缩短10一15d。通过细胞解剖学观察及与生根有关的酶(POD、IAAO、PPO) 活性的测定,在添加E物质后,红叶石楠生根苗的三种酶活性表现为利于生根的 动态变化,而在未添加E物质上的酶活性表现为不利于生根的动态变化。 4、首次将热稳定性强的生物防腐剂702发酵液应用于组培过程中污染的控 制。抑菌试验结果表明对组培过程中常见的14种细菌、真菌、酵母菌的抑菌率 达100%。而对瓶苗的生长尚未发现不良影响。 5、较系统地研究了红叶石楠组培苗移栽管理技术,移栽成活率可达90%。 关键词:乐东拟单性木兰,华木莲,红叶石楠‘红罗宾,组织培养,快繁


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