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板栗主要栽培品种的分子鉴别及遗传分析

高捍东  
【摘要】:板栗是经济价值很高的经济树种,栽培历史悠久,资源丰富。板栗果实营养丰富,树体各部分可以入药,树形美观,抗性强,适合用作绿化观赏树种,材质优良。产量低是目前板栗生产中的主要问题,而使用优良品种是板栗优质高产栽培的首要因素。 传统的板栗品种划分方法主要依据其形态学特征、生物学特性和经济性状,其中又以经济性状为主,即以花序、总苞和果实的形态为主要依据。但是,木本植物结实周期长,品种早期鉴定仅仅依据营养器官的形态特征难以准确地进行。另外,由于板栗品种化程度相对不高,存在同名异物现象,甚至有把实生类群当作品种使用的现象。这就增加了品种鉴别的难度,也使准确鉴别品种显得尤为重要和迫切。因此需要一方面通过立法规范新品种的审定、注册、保护和管理程序,另一方面需要建立准确、可靠的品种特异性检测方法,这种方法必须是不受环境因子及植物发育阶段的影响.使得早期准确鉴定品种成为可能。 本研究应用RAPD分子标记手段,研究板栗品种的遗传多样性,建立了板栗品种RAPD标记的标准程序,以及板栗品种的DNA指纹数据库,为板栗育种提供理论依据,并为板栗品种鉴别提供了准确、可靠的标准方法,并把板栗品种的分子分类与传统分类方法作比较。主要结果与结论如下: 1.板栗营养体中酚类化合物和单宁类物质含量高,DNA提取和纯化非常困难。本研究对CTAB法加以改良,总结出能够产生扩增产物的模板DNA提取和纯化方法。 2.建立了稳定的板栗DNA扩增反应体系。并对影响RAPD反应效果和特异性的两个关键因子,即对退火温度和镁离子浓度进行研究。 板栗DNA扩增反应体系中,反应体积为20μl。94℃预变性2min,然后执行38个扩增循环,每个循环中,94℃变性30S,40℃退火30S,72℃延伸90S,最后72


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