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7-硝基吲唑对深低温停循环大鼠的脑保护作用的研究

刘尊涛  
【摘要】: 【目的】深低温停循环技术(DHCA)目前广泛应用于大血管和复杂先天性心脏病手术中。但深低温停循环安全时限仅为45~60min,并且可能并发脑损伤的问题尚未得到较好的解决。因此,研究DHCA脑损伤机制,及如何延长DHCA安全时限显得尤为重要。7-硝基吲唑(7-NI)是一种特异性神经源型一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂。近年来研究发现7-N工具有减轻局灶性脑缺血—再灌注损伤的作用,但其对于DHCA脑损伤的影响尚未见有深入报道。本研究采用深低温停循环大鼠模型,分别观察7-NI对深低温停循环大鼠脑含水量、组织光镜结构、细胞超微结构及脑组织MDA、NOS含量的影响。 【方法】200只健康SD大鼠(江苏大学医学院实验动物中心提供)。随机分为五组,A组(假手术组)16只;B组(DHCA组),C组(7NI组),D组(7NI+L-Arg(L-精氨酸)组)和E组(花生油组)各46只,每组再分为DHCA后2h、6h、12h、24h共四个亚组,其中24h亚组16只,其余每个亚组各10只。冰块包埋体温降至21℃时阻断双侧颈总动脉建立DHCA模型。观察7-硝基吲唑(7-NI)对脑水肿,脑组织光镜、电镜结构和再灌注2h、6h、12h、24h时脑组织丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)含量变化的影响。 【结果】 1.脑含水量:深低温停循环再灌注24h C组脑水质量分数明显低于B、D、E三组(P<0.05),B、D、E三组间脑水质量分数无明显差异。 2.光镜结构:B、D、E三组星形胶质细胞明显肿胀,血管周围间隙明显增大,其中B、D二组可见锥体细胞核固缩,胞质空泡化甚至胞膜破裂。C组星形胶质细胞和锥体细胞肿胀较以上三组明显减轻,血管和组织周围间隙轻度增大。 3.电镜超微结构:B、D、E三组出现核固缩,染色质聚集成块,异染色质边集,线粒体肿胀等表现,甚至出现脱髓鞘病变。C组病变较轻,表现为核轻度不规则,核膜完整,异染色质分布较均匀,线粒体基本正常。 4.脑组织MDA含量:深低温停循环再灌注后B、C、D、E四组MDA含量较A组均升高,DHCA后2h MDA含量最高,后逐渐降低。但C组各时间点MDA含量均明显低于B组(P<0.05)。DHCA后24h时B、D、E三组含量仍明显高于假手术组(P<0.05)。加用L-Arg(D组)可逆转7NI降低MDA含量的作用。 5.脑组织NOS表达:深低温停循环再灌注后B、C、D、E四组NOS表达较A组均升高。但C组各时间点NOS表达均明显低于B(P<0.05)。加用L-Arg后(D组)能逆转7NI的这一作用。 【结论】 1.深低温停循环导致脑损伤的机制极为复杂,NO在该过程中的作用复杂而重要。 2.7NI对DHCA大鼠脑组织具有保护作用,有望用于延长DHCA安全时限。 3.7NI可能通过选择性抑制神经元型一氧化氮合酶(nNOS),减少有害NO的生成达到对深低温停循环脑损伤的保护作用。 4.7-NI还可以通过抑制MDA的生成,发挥脑保护作用。


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