收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

以CotX为分子载体表面展示WSSV囊膜蛋白Vp19和Vp28的枯草芽孢杆菌重组芽孢的研究

李倩  
【摘要】: 对虾白斑综合症(white spot syndrome,WSS)是由白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)感染甲壳动物,尤其是对虾引发的一种严重的疾病。此前的研究结果显示,接种WSSV疫苗可有效地保护对虾感染WSSV所致的死亡。然而,疫苗注射接种在对虾养殖中难以应用。因此,通过对虾口服接种抗WSSV疫苗成为研究的焦点。枯草芽孢杆菌是一种非致病性的革兰氏阳性菌,常被用于人类食品或动物饲料的添加剂。在营养缺乏或其他胁迫条件下,枯草芽孢杆菌能形成具有抗逆性的休眠体—芽孢。由于芽孢具有独特的抗逆性,在极端的温度、干燥、以及暴露于有机溶剂和其他毒性化学物质等不利条件下能长期存活。因此,芽孢成为在极端环境中运载外源抗原蛋白或具有活性的生物大分子的潜在有效载体。本研究的目的是通过芽孢表面展示技术将具有保护作用的WSSV抗原展示在芽孢表面,构建具有抗WSSV作用的表面展示WSSV抗原的重组芽孢。 本研究的内容和结果包括4部分: 第一.以CotX为分子载体,以编码GFP的gfp为报告基因的重组芽孢表面具有GFP绿色荧光。证明枯草芽孢杆菌的芽孢衣壳蛋白CotX位于芽孢衣壳外层,可作为芽孢表面展示外源蛋白的载体分子。 第二.将芽孢衣壳蛋白基因cotX与WSSV囊膜蛋白基因vp19和vp28重组,构建了融合表达CotX-Vp19和CotX-Vp28的整合型重组质粒pJS747和pJS748。 第三.融合表达Vp19或Vp28整合型重组质粒转化Bacillus subtilis168,得到重组菌株DRJS747和DRJS748。诱导重组菌株产生的芽孢表面展示Vp19或Vp28。 第四.以构建的重组芽孢口服接种克氏螯虾,接种后以WSSV进行攻击试验,分析克氏螯虾的相对存活率。结果显示口服重组芽孢后的克氏鳌虾具有抗WSSV感染致死作用。 本研究的主要结论包括: 1.枯草芽孢杆菌的芽孢衣壳蛋白CotX位于芽孢衣壳外层,可作为芽孢表面展示外源蛋白的载体。 2.表面展示Vp19或Vp28的重组芽孢可以作为对虾抗WSSV感染的口服免疫制剂,表面展示外源抗原蛋白的重组芽孢为控制WSSV和其他甲壳动物病原菌的口服免疫制剂提供了新的思路。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 郑天伦,王国良;对虾白斑综合症病毒的诊断和检测[J];海洋湖沼通报;2002年03期
2 汪岷,戴继勋,张士璀,包振民,李红岩,王馗;用ELISA检测中国对虾的白斑综合症病毒(WSSV)[J];海洋学报(中文版);2000年02期
3 刘庆慧,黄倢,宋晓玲,刘莉;1种可用于检测WSSV蛋白酶的微量酶活测定技术[J];中国水产科学;2002年02期
4 李红霞,孟小林,徐进平,王健,鲁伟,曹旭;白斑综合症病毒囊膜蛋白VP19、VP28的融合表达及中和抗体的制备[J];中国病毒学;2004年06期
5 雷质文,黄倢,寇运同,鲍蕾,林修光,战文斌;白斑综合症病毒(WSSV)的实验室检测技术[J];海洋湖沼通报;2002年02期
6 易志刚,黄倢,解飞霞,贾佩侨,李筠;对虾白斑综合症病毒与虾鳃细胞膜特异性结合关系的确立[J];中国病毒学;2003年03期
7 莫照兰,雷质文,杨冰,黄倢,张培军;对虾WSSV人工感染螯虾及其检测[J];海洋科学;2002年03期
8 周化民;斑节对虾白斑综合症杆状病毒(WSSV)感染的组织特异性[J];徐州师范大学学报(自然科学版);2000年03期
9 解云礼,黄茹,石正丽;对虾白斑综合征病毒的细胞因子受体基因的分析与表达[J];中国病毒学;2003年04期
10 王维新;黄倢;高天翔;;酵母双杂交系统用于WSSV结构蛋白VP39相互作用的宿主蛋白基因的初步研究[J];海洋湖沼通报;2010年02期
11 高宏,袁必锋,袁丽,赵新颜,戴和平;一种筛选对虾白斑综合症病毒中和抗体的新方法[J];水生生物学报;2002年03期
12 潘忠诚;王芳宇;何建国;赵志英;翁少萍;付小哲;陈国良;;凡纳滨对虾在不同实验条件下感染白斑综合症的研究[J];衡阳师范学院学报;2008年06期
13 王蔚;章晓波;;对虾—病毒互作的分子机制研究[J];生命科学;2010年11期
14 冯书营;景爱华;杨建英;;白斑综合征病毒囊膜蛋白在对虾免疫保护应用中的研究进展[J];中国生物工程杂志;2011年08期
15 谢数涛,何建国,杨晓明,吕玲,江静波;套式PCR检测斑节对虾白斑症病毒(WSSV)[J];青岛海洋大学学报(自然科学版);2001年02期
16 赵新颜,魏聪,戴玲芬,高宏,戴和平;对虾白斑综合症病毒结构蛋白VP28的原核表达和性质研究[J];水生生物学报;2004年03期
17 张莉;;对虾白斑综合症病毒VP37基因诱饵重组载体的构建、转化与自激活作用检测[J];海洋湖沼通报;2010年04期
18 黄旭雄;周洪琪;宋理平;;急性感染对中国明对虾非特异免疫水平的影响[J];水生生物学报;2007年03期
19 王维新;黄倢;高天翔;;WSSV囊膜蛋白vp37和vp39基因酵母双杂交诱饵载体的构建及其激活作用检测[J];水生生物学报;2009年03期
20 胡贤德;孙成波;丁树军;王平;李义军;许政生;李婷;徐安敏;;不同饵料对斑节对虾(Penaeus monodon)幼虾的生长及对WSSV敏感性的影响[J];海洋与湖沼;2009年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 杨丰;;对虾白斑综合症病毒(WSSV)功能基因组研究进展[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
2 仇知光;张颖;刘庆慧;黄倢;;WSSV-VP24的原核表达与纯化及抗体制备[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
3 刘海鹏;陈荣元;张秋霞;彭会;王克坚;;红螯螯虾造血组织干细胞感染WSSV后的差异表达基因筛选研究[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
4 施慧;许文军;谢建军;查智辉;徐汉祥;史海东;;南美白对虾苗种白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下及造血组织坏死病病毒(IHHNV)携带情况调查[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
5 王丹丽;左迪;王兰梅;孙婷;赵云龙;;感染白斑综合症病毒(WSSV)红螯光壳螯虾相关免疫因子及组织超微结构的研究[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
6 左迪;王丹丽;田伟;吕巍巍;赵云龙;;人工注射免疫多糖及WSSV病毒对红螯光壳螯虾幼虾免疫相关酶活性及超微结构的影响[A];中国甲壳动物学会第十一届年会暨学术研讨会论文摘要集[C];2011年
7 黃茹;陈孝煊;张建红;解云礼;李莉娟;袁军法;石正丽;;对虾白斑综合征病毒对澳洲龙虾的人工感染实验[A];生命科学与微生物专辑[C];2004年
8 韦秀梅;绳秀珍;唐小千;邢婧;战文斌;;兔抗对虾白斑症病毒(WSSV)独特型抗体的制备及其特性分析[A];新型疫苗研发及基因工程疫苗应用研讨会论文集[C];2010年
9 李莉娟;黄茹;石正丽;;对虾白斑综合征病毒的核衣壳蛋白VP15的核定位研究[A];武汉市首届学术年会论文集[C];2004年
10 梁高峰;黄倢;梁艳;;凡纳滨对虾astakine全长CDNA的克隆及其在WSSV感染过程中的功能研究[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 朱斐;对虾白斑综合征病毒(WSSV)灭活制剂及多糖对克氏原螯虾抗WSSV作用的研究[D];浙江大学;2009年
2 孟宪红;中国对虾“黄海2号”对WSSV的抗病性分析[D];中国海洋大学;2010年
3 赖晓芳;中国对虾应答WSSV侵染相关基因的研究[D];中国海洋大学;2010年
4 唐小千;中国对虾白斑症病毒(WSSV)血细胞受体蛋白的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 钟汝杰;中国对虾整合素β亚基与对虾白斑症病毒(WSSV)感染的相互关系研究[D];中国海洋大学;2013年
6 梁廷明;中华绒螯蟹螺原体重要功能基因的筛选和研究及螺原体与WSSV的多重PCR检测技术[D];南京师范大学;2011年
7 高美玲;对虾白斑综合症病毒(WSSV)不同毒力株分析,及病毒结构蛋白VP95的功能[D];厦门大学;2014年
8 孙玉苗;白斑综合征病毒(WSSV)三种重要囊膜蛋白的重组表达及在病害防控中的作用[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2012年
9 梁焯;Harpin蛋白纳米药物药效研究及Pen-2 DNA纳米药物抗WSSV研究[D];武汉大学;2010年
10 赵建梅;对虾白斑症病毒(WSSV)囊膜蛋白VP31、VP110在中国明对虾血细胞和鳃细胞中结合蛋白的研究[D];中国海洋大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 罗淑娅;水温对对虾白斑综合症病毒(WSSV)感染克氏螯虾的影响[D];国家海洋局第三海洋研究所;2010年
2 戴俊逸;白斑综合症病毒(WSSV)侵染对虾途径的研究[D];国家海洋局第三海洋研究所;2012年
3 张涛;斑节对虾抗WSSV家系筛选[D];上海海洋大学;2012年
4 邬君君;对虾白斑综合症病毒(WSSV)进入宿主细胞的方式及增殖情况[D];国家海洋局第三海洋研究所;2013年
5 刘飞;中国大陆几株WSSV毒株毒力测定及分析[D];中国海洋大学;2013年
6 李凡;两种蓝藻对WSSV潜伏感染对虾的影响[D];大连海洋大学;2014年
7 黄建华;WSSV部分基因序列分析及防控WSS免疫增强剂的筛选[D];南京农业大学;2012年
8 余晓巍;浙东沿海地区对虾白斑综合症病毒分子流行病学研究[D];宁波大学;2009年
9 孙凡;凡纳滨对虾热休克蛋白60、70和90与WSSV的相互作用[D];上海海洋大学;2013年
10 刘鹿山;对虾白斑综合征病毒(WSSV)双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立与应用[D];中国海洋大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;对“澳大利亚关于虾及虾制品一般进口风险分析报告”的评议[N];中国渔业报;2009年
2 ;白衣佳人[N];中国电脑教育报;2005年
3 ;南美白对虾病害的诊断[N];中国海洋报;2003年
4 ;南美白对虾病害的诊断[N];中国海洋报;2003年
5 刘炳胜;氨基酸碘实现新药重大突破 盼融资新策助民营科技腾飞[N];科技日报;2005年
6 ;“黄海1号”的缔造者[N];中国渔业报;2010年
7 潘咏平;水科院2项成果获国家科技进步奖[N];中国渔业报;2011年
8 ;斑节对虾的病害防治[N];海南日报;2000年
9 俐颖;美国成功研制新型养殖虾疫苗[N];中国渔业报;2011年
10 任德建;引起栉孔扇贝死亡的是球形病毒[N];中国渔业报;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978