收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

猪源益生菌复合制剂的开发及应用

许光胜  
【摘要】:近年来抗生素作为添加剂在饲料中得到广泛使用,在畜禽的防病和促生长的方面发挥着重要作用。但随之而来的是大量耐药菌株的产生、畜禽产品中药物残留等问题。实践和研究表明,益生菌是一种良好的抗生素替代品。地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis,B1)和粪肠球菌(Enterococcus faecalis,Ef)可抑制病原微生物的生长,并产生多种营养物质,因此B1和Ef可作为益生菌添加于饲料中。本研究利用益生菌分离筛选的常规方法,分别得到具有良好益生特性的地衣芽孢杆菌B1和粪肠球菌NA14,对其生物学特性、细菌素和应用试验进行研究,实验表明两株菌株对断奶仔猪有防病和促生长作用。1.猪源益生地衣芽抵杆菌与粪场球菌的分离、鉴定及生物特性分析从健康仔猪的肠道及粪便中分离得到3株芽孢杆菌和18株肠球菌。以肠道致病菌大肠杆菌0157、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌C78-1为抗菌试验的指示菌株,其中芽孢杆菌菌株B1和肠球菌菌株NA1、NA3、NA4、NA10、NA14和NA18对指示菌有显著地抑制作用。综合培养特性、生理生化试验和16SrRNA序列分析鉴定方法,结果表明分离到的菌株B1为地衣芽抱杆菌,菌株NA4和NA14为粪肠球菌。进一步对上述菌株进行生物学特性研究,菌株B1能够耐受人工胃液2h和人工肠液2.5h,在0.3%胆盐12h和90℃ 15min作用下该菌株的存活率接近100%。菌株NA4和NA14在人工胃液中2h,细菌数量下降一个数量级,而人工肠液处理无影响;NA14耐胆盐能力比NA4强,可耐受0.3%胆盐;两者均能耐受60℃温度。在菌株B1和菌株NA14的抗生素敏感试验中,发现菌株对常见的多种抗生素均敏感,仅对青霉素、金霉素和多粘菌素B表现出耐药性,可避免动物体内微生物之间抗生素抗性的转移。利用仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)检测B1和NA14的粘附性,粘附率分别为0.88%和8.7%,实验结果表明粪肠球菌具有较好的粘附能力。2.菌株分泌抗菌物质的纯化和鉴定菌株B1和NA14发酵液表现出广谱抗菌能力,两种发酵液对所列指示菌都有抑制作用。采用硫酸按法对培养基上清中的抗菌物质进行纯化。B1细菌素具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,100℃及以下处理30min抑菌活性未发生任何改变;在pH 6-9之间活性维持稳定;在常见的蛋白酶中仅对蛋白酶K敏感;超滤管处理细菌素大小在3000-5000Da之间。NA14细菌素最高耐受温度为50℃,最佳pH为6-7,仅对蛋白酶K敏感,分子量在5000-10000Da之间。PCR方法检测B1和NA14细菌素的存在,结果表明NA14细菌素为enterocin A。3.菌株B1和NA14的发酵工艺优化在发酵基础培养基的基础上,分别对菌株B1和NA14的发酵条件和成分进行优化。B1菌株的最优发酵条件为初始pH值为6.5,8%接种量,30℃ 190r/min,最佳培养基配方:葡萄糖5%、牛肉膏20g/L、CaCl2 10g/L、MgSO45g/L。NA14菌株发酵条件为初始pH值为7.0,6%接种量,37℃ 180r/min,最佳培养基配方:蔗糖1%、牛肉膏20g/L、CaCl21 g/L、MgSO4 1 g/L。4.益生菌的应用研究试验选取杜长大三元杂交断奶仔猪(30日龄)160头,随机分为4组,分别饲喂金霉素(75mg/kg)、金霉素+地衣芽孢杆菌(75mg/kg + 200亿CFU/g)、金霉素+粪肠球菌(75mg/kg + 200亿CFU/g)、金霉素+地衣芽孢杆菌和粪肠球菌复合制剂(75mg/kg+地衣芽孢杆菌:150亿CFU/g,粪肠球菌:50亿CFU/g),连续饲喂30d。结果显示,益生菌各组在提高日增重、降低料肉比和腹泻率方面均好于抗生素组,但差异不显著;地衣芽孢杆菌和粪肠球菌抑制肠道大肠杆菌的生长,也能促使机体免疫力产生;综合评价复合菌制剂比单一菌株作用能力强。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王良;;地衣芽孢杆菌的应用现状及展望[J];生物技术世界;2013年04期
2 唐娟;张毅;李雷雷;林开春;;地衣芽孢杆菌应用研究进展[J];湖北农业科学;2008年03期
3 李卓佳;王少沛;曹煜成;陈素文;文国樑;;地衣芽孢杆菌与3种微藻生长的相互影响[J];农业环境科学学报;2009年04期
4 牛丹丹;石贵阳;王正祥;;分泌高效蛋白的地衣芽孢杆菌及其工业应用[J];生物技术通报;2009年06期
5 董尚智;王国霞;陈远凤;程萍;;饲用地衣芽孢杆菌的生物学特性研究[J];饲料研究;2009年07期
6 刘阳;谭明;潘宝平;宋诙;;一株地衣芽孢杆菌的性质研究及发酵培养基优化[J];安徽农业科学;2012年03期
7 李福彬;景翠;陈宝江;于会民;梁陈冲;;饲用地衣芽孢杆菌抗逆性与益生性的体外评价[J];黑龙江畜牧兽医;2012年05期
8 张菊;李金敏;张志焱;李伟;谷巍;;地衣芽孢杆菌的研究进展[J];中国饲料;2012年17期
9 石笛;江洁芳;钟瑜;黄琼;;一株产蛋白酶地衣芽孢杆菌的分离与鉴定[J];安徽农业科学;2012年29期
10 张邑帆;沈克飞;郑华;杨飞云;;一株地衣芽孢杆菌的体外益生作用研究[J];上海畜牧兽医通讯;2013年04期
11 葛文霞;柳旭伟;;地衣芽孢杆菌在养殖业中的应用研究进展[J];上海畜牧兽医通讯;2014年01期
12 王丽芳;满达虎;;2株地衣芽孢杆菌抗逆性及益生性的研究[J];饲料研究;2009年04期
13 韩廷义;刁富花;;一株鸡源地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其益生作用的初步研究[J];中国畜牧兽医;2012年06期
14 孙静;李晔;刘联国;詹萍萍;张春丹;苏秀榕;;地衣芽孢杆菌富集镉的特性及机理研究[J];核农学报;2013年11期
15 崔京春,吴俊罡,阎英凯,刘吉华,王梅雪,范圣弟;地衣芽孢杆菌发酵过程的优化[J];饲料博览;2004年07期
16 郝向举;李义;王文娟;郭明凯;孙汉;王玥;;蟹源地衣芽孢杆菌培养条件的优化[J];中国饲料;2010年15期
17 刘付军;;地衣芽孢杆菌在种植业上应用研究进展[J];中国园艺文摘;2013年08期
18 柏建玲,莫树平,郑婉玲,贺鹰抟;地衣芽孢杆菌与其他微生物产酶能力的比较[J];饲料研究;2003年07期
19 江敏;胡小军;;动物肠道益生菌地衣芽孢杆菌的筛选及培养基的优化[J];中国食品添加剂;2007年03期
20 江敏;梁金钟;;动物肠道益生菌地衣芽孢杆菌的筛选及培养基的优化[J];乳业科学与技术;2007年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 吴俊罡;阎英凯;刘吉华;王梅雪;;地衣芽孢杆菌发酵过程的优化[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第七次学术研讨会论文集[C];2004年
2 蒋若天;宋航;张楠;卢涛;李甜;汪伟;刘成君;;一株产a-高温淀粉酶的地衣芽孢杆菌的筛选以及其发酵条件的研究[A];第三届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(上)[C];2006年
3 张念海;易安妮;丛莉;吴希阳;;地衣芽孢杆菌1103的产酶、抑菌特性及其发酵条件的优化[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
4 刘静;李昊;王志娟;何美琳;翟静;;504株肠球菌分布及耐药性监测[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
5 华孝挺;蒋琰;俞云松;瞿婷婷;;粪肠球菌和屎肠球菌的利福平耐药突变的分子机制研究[A];2011年浙江省医学会医学病毒学分会、医学微生物与免疫学分会学术年会论文汇编[C];2011年
6 郑颖;;123株肠球菌的临床分布和耐药特征分析[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
7 黎四平;;肠球菌感染的检测及耐药性分析[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
8 潘康成;倪学勤;吴岳;;地衣芽孢杆菌对鸡增重及肠道形态发育的影响研究[A];中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第六次学术研讨会论文集[C];2002年
9 王娟;刘宇;吴爱慧;周荣斌;;粪肠球菌肺炎1例[A];2010全国中西医结合危重病、急救医学学术会议论文汇编[C];2010年
10 杜田丰;马净植;熊紫兰;卢新培;曹颖光;;载药等离子体对粪肠球菌生物膜的作用[A];全国第八次牙体牙髓病学学术会议论文汇编[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 许光胜;猪源益生菌复合制剂的开发及应用[D];南京农业大学;2012年
2 MUHAMMAD ZAFARULLAH;益生菌微囊化适用材料的探索及其对重金属致死性的治疗应用[D];东北农业大学;2017年
3 龚震宇;谷氨酰胺和益生菌联合应用对大鼠烧伤后肠道的保护作用及机制研究[D];第三军医大学;2016年
4 吴婷婷;补喂绵羊瘤胃液、益生菌对28日龄羔羊胃肠道菌群及免疫的影响[D];新疆农业大学;2016年
5 雷凯;地衣芽孢杆菌对蛋鸡生产性能的影响及机理研究[D];浙江大学;2015年
6 郭静;地衣芽孢杆菌及其γ-聚谷氨酸合成调控机理的系统生物学研究[D];华中农业大学;2016年
7 刘冰南;地衣芽孢杆菌转化薯渣与汁水效能及其代谢机理研究[D];哈尔滨工业大学;2015年
8 焦月华;基因组学分析粪肠球菌益生功能及增殖调控研究[D];哈尔滨工业大学;2016年
9 黎满香;感染猪的粪肠球菌的分离鉴定及部分特性和诊断方法研究[D];湖南农业大学;2010年
10 贾丽艳;产类细菌素菌株的筛选鉴定及类细菌素的研究[D];山西农业大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王开毫;术前应用益生菌对胰十二指肠切除术后患者的影响[D];天津医科大学;2017年
2 于焕;益生菌发酵工艺、冻干保护剂优化与活性研究[D];辽宁大学;2017年
3 靳爱红;猪源益生菌分离鉴定及复合物筛选[D];河北工程大学;2018年
4 张玉婵;口服益生菌对血液透析病人便秘症状的改善研究[D];河北工程大学;2018年
5 周海璐;益生菌细胞壁多糖提取与生物学活性研究[D];辽宁大学;2017年
6 尹成芳;益生菌牙膏对5岁重度龋儿童口腔微生物的影响[D];昆明医科大学;2017年
7 暴宁;复合益生菌对大菱鲆(Scophthalmus maximus)生长、免疫等指标的影响[D];大连海洋大学;2017年
8 刘晓霞;富硒益生菌对鸡生长和肉品质的改善及抗球虫感染的机制研究[D];南京农业大学;2016年
9 王雪平;南京市犬幽门螺旋杆菌感染的流行病学调查及益生菌对其防治效果的研究[D];南京农业大学;2016年
10 杜泓明;不同益生菌培养物对断奶仔猪生长性能、免疫功能及盲肠微生物区系的影响[D];吉林农业大学;2017年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 王太伟;细菌素饲料添加剂有营养有风味能杀菌[N];天津日报;2007年
2 香红星;走进微生物世界让这个“小精灵”为你增效[N];中国畜牧兽医报;2006年
3 香红星;走进微生物世界让这个“小精灵”为你增效[N];中国畜牧兽医报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978