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隐孢子虫卵囊分离鉴定及锌和维生素A对小鼠感染的影响

梁俊文  
【摘要】: 本论文对南京地区犊牛粪便中的隐孢子虫卵囊进行了分离鉴定,并对该地区犊 牛隐孢子虫的感染情况作了较为系统的调查,同时首次研究了锌和/或VA对小鼠隐 孢子虫感染的影响。具体内容如下: (1)采集南京地区三个奶牛场2-4周龄犊牛新鲜粪便,应用不连续蔗糖密度梯 度离心法分离纯化隐孢子虫卵囊,然后通过用光学显微镜观察,单克隆抗体间接免 疫荧光试验和动物感染试验进行鉴定。结果显示,该地区犊牛感染的隐孢子虫为小 隐孢子虫(Cryptosporidium parvum),从而为该地区隐孢子虫病的防治提供了科学 依据,同时为开展隐孢子虫病的研究提供了新的分离株。这是国内首次应用单克隆 抗体技术和免疫荧光技术鉴定隐孢子虫卵囊。 (2)以本实验室单克隆抗体鉴定的隐孢子虫卵囊为标准,首次对南京地区三个 奶牛场6月龄以内的犊牛隐孢子虫的感染情况进行了调查,在被调查的55头犊牛中 有16头犊牛的粪便中查到了隐孢子虫卵囊,其平均感染率为29.1%(16/55)。虽然 其中两个奶牛场感染率(分别是40%和35.7%)高于另外一场(19.2%),但统计学分 析表明,三个奶牛场的感染率差异不显著(P>0.05)。另外,各个奶牛场的隐孢子虫 感染强度和感染率在1-3月龄时均比在4-6月龄时高,统计结果表明差异显著 (P<0.05)。作者认为,这可能是因为隐孢子虫的感染与机体的免疫状态有关。 (3)为探讨锌和VA对隐孢子虫感染小鼠的影响,将75只清洁级昆明小鼠随机 分成5组,各组均饲喂自制日粮,其中Ⅱ组以饮水方式添加锌(38.5μmol/ml〕、 Ⅲ组以灌喂的方法添加VA(400IU/0.1ml)、Ⅳ组添加锌和VA,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 组均在试验开始时灌喂小隐孢子虫卵囊(2.56×10~6个卵囊/ml)。Ⅱ组、Ⅲ组和 Ⅳ组小鼠的粪便排卵量和排卵持续时间分别显著地低于Ⅰ组(P<0.05);在试验的第 二周和结束时,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组小鼠血液中CD4、CD8细胞百分率以及CD4/CD8比值 均极显著高于Ⅰ组(P<0.01)。结果表明锌和/或VA能够增强小鼠的细胞免疫功能, 提高机体抵抗隐孢子虫感染的能力。


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