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大豆蛋白与酪蛋白酶解物抗氧化作用比较研究

胡文琴  
【摘要】:本实验首先研究大豆蛋白与酪蛋白酶解物体外抗氧化作用,并确定了大豆蛋白和酪蛋白的最佳酶解条件;进一步研究大豆蛋白与酪蛋白酶解物对正常小鼠以及CCl4肝损伤大鼠肝脏和血浆抗氧化功能的影响,旨在为其进一步开发利用提供科学依据。本研究包括以下三个部分: 1.大豆蛋白与酪蛋白酶解物体外抗氧化作用的研究 选用枯草杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶酶解大豆蛋白和酪蛋白,以羟自由基清除率作为测定指标,通过单因素和正交实验优化酶解条件,确定大豆浓缩蛋白最佳酶解条件为:木瓜蛋白酶、pH7.5、酶浓度6%、温度40℃和时间30min,在此条件下羟自由基清除率为68.20%;大豆粕最佳酶解条件为:木瓜蛋白酶、pH7.5、酶浓度6%、温度40℃和时间30min,在此条件下羟自由基清除率为58.67%;酪蛋白最佳酶解条件为:pH7.5、酶浓度8%、温度45℃和时间90min,在此条件下,羟自由基清除率为72.06%。 2.大豆蛋白与酪蛋白酶解物对小鼠抗氧化功能的影响 纯昆明系小鼠80只,随机分为8组,分别为:正常对照组(C),Vitamin E组(VE),大豆蛋白酶解物低剂量组(SPH1)、中剂量组(SPH2)和高剂量组(SPH3),酪蛋白酶解物低剂量组(CH1)、中剂量组(CH2)和高剂量组(CH3)。分别灌胃0.25mL生理盐水,7.2mg/mLVE,4、12和20mg/mL大豆蛋白酶解物以及4、12和20mg/mL酪蛋白酶解物,连续灌胃10天,处死小鼠,检测肝脏和血浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果表明:VE能够显著降低血浆和肝脏MDA的浓度(P<0.05),但对血浆和肝脏SOD和GSH-Px活性无显著影响(P>0.05);不同剂量的大豆蛋白酶解物均能增强小鼠的抗氧化功能,其中高剂量组效果最好,能极显著增加小鼠肝脏SOD和GSH-Px活性以及血浆GSH-Px活性(P<0.01),但对小鼠肝脏和血浆MDA浓度无显著影响(P>0.05);不同剂量的酪蛋白酶解都能提高小鼠的抗氧化功能,其中高剂量组效果最好,能显著提高小鼠血浆和肝脏GSH-Px活性以及血浆SOD活性,降低血浆和肝脏MDA浓度(P<0.05)。 人豆蛋自与酪蛋自酶解物抗牡化作用比较研究 3.大豆蛋白与酪蛋白酶解物对CCI4损伤大鼠抗氧化功能的影响 SD大鼠70只,随机分为7组,分别为对照组,CC14灌胃组,CC14一维生素E保 护组,Ccl4一酪蛋白保护组,CC14一大豆蛋白保护组,CC14一酪蛋白酶解物保护组和CC14- 大豆蛋白酶解物保护组,每天分别灌胃lmL生理盐水,生理盐水,维生素E( sm创mL), 酪蛋白水溶液,大豆蛋白水溶液,酪蛋白酶解物,大豆蛋白酶解物(蛋白水溶液和蛋 白酶解物折合蛋白质含量为50mg/mL)。正试2周后,对照组灌胃1 .sm眺g体重橄榄 油溶液,其它各组大鼠灌胃同剂量的30%CC14橄榄油溶液。2次/周灌胃,连续2周. 正试4周后,处死大鼠,检测血浆CAI,、SOD、GSH一Px、GOT和GPT活性以及MDA 浓度和肝脏中CAf、SOD、GSH一Px活性以及MDA浓度。结果表明:CC14肝损伤大 鼠血浆和肝脏CAT、SOD以及GSH一Px活性没有明显变化(P0.05),但血浆和肝脏 MDA浓度极显著增加(尸0 .01);大豆蛋白与酪蛋白酶解物显著增加血浆SOD、 GSH一Px活性以及肝脏CAT、SOD、GSH一Px活性(尸0 .05),极显著降低血浆和肝脏 MDA浓度(尸0.01)。灌胃CCI4会严重损害大鼠肝细胞结构和功能的完整性,血浆 GOT和GPT活性极显著升高(尸0 .01),VE,大豆蛋白与酪蛋白酶解物可以显著抑 制CC14导致的大鼠血浆GOT和GPT活性的升高,减轻CC14对肝细胞的损伤. 以上结果表明,大豆蛋白与酪蛋白酶解物在体外具有抗氧化作用,同时能提高正 常小鼠和CC14损伤大鼠肝脏和血浆的抗氧化功能.


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