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AR99菌剂诱导的番茄青枯病抗性研究

华苟根  
【摘要】:AR99混合菌剂是本实验室制备出的植物土传病害的一种生防制剂,在前期的研究中对番茄细菌性青枯病有着很好的防效。为了研究AR99的生防机制,本文对AR99处理番茄后植株体内超氧化物歧化酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)的活性变化进行了比较研究,结果表明AR99处理后番茄体内PAL与PPO活性明显高于对照水平,SOD活性在处理后24小时内明显高于对照水平,24小时后与对照水平并没有显著差异,甚至低于对照。而POD活性在AR99处理后略高于与对照水平。四种酶活性高峰期的出现并不相同,SOD于处理后12小时出现高峰,72小时PAL与PPO达到高峰,随后POD的高峰期在处理后96小时出现。 植物体内活性氧含量与植物的抗病反应有着密切关系。本文对经过AR99处理的番茄接种青枯病菌后植物体内H_2O_2的含量变化以及植物体内H_2O_2清除酶过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性变化进行了研究,结果表明,在接种青枯病菌后24小时内,处理组植物体内H_2O_2含量有一个明显的突增期,其H_2O_2含量也明显高于对照水平,但在整个测定过程中并没有观察到植物的过敏性坏死反应。CAT与APX活性与植株体内H_2O_2含量整体上成一种负相关的关系,但两者活性的变化规律并不相同,CAT活性在测定前期与H_2O_2含量变化相关,而测定后期则是APX的活性变化与H_2O_2含量变化关系更密切。 AR21是AR99菌剂中的一种主要菌株,在前期的研究中其单菌也有着很好的防效。本文利用绿色荧光蛋白基因对AR21进行了标记,并对AR21在番茄根围的定殖进行了研究。gfp标记的AR21菌落在紫外灯下可发出强烈的荧光,在荧光显微镜下也可检测到单个菌体的发光。gfp标记后菌株生长速率以及标记质粒稳定性的测定结果表明gfp标记质粒对AR21的生长并没有多大影响,荧光蛋白质粒也可在AR21中稳定遗传。对AR21的根围定殖研究表明,AR21主要定殖在根围的基部,而在根围的中部定殖量最少,在根内则没检测到菌株的定殖。


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